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Calidad de leche
El tratamiento de las mastitis clnicas . . . . . . . . . . . . . . . . . 8 Epidemiologa y diagnstico de la agalaxia contagiosa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 La higiene en el ordeo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10

EpidEmiologa y diagnstico dE la agalaxia contagiosa

El conocimiEnto dE los principalEs aspEctos dE
la EpidEmiologa y diagnstico dE la agalaxia contagiosa, as como dE los ltimos avancEs
ngel Gmez-Martn, Joaqun Amores, Ana Paterna, Antonio Snchez, Christian de la Fe, Juan Carlos Corrales y Antonio Contreras Grupo de Investigacin Sanidad de Rumiantes Facultad de Veterinaria de la Universidad de Murcia Imgenes cedidas por los autores El ganado caprino se ve afectado por cuatro especies de micoplasmas: Mycoplasma agalactiae (Ma) y Mycoplasma mycoides subespecie capri (Mmc) son las especies ms prevalentes en Espaa, aunque tambin se describen infecciones espordicas por Mycoplasma capricolum subespecie capricolum (Mcc) y Mycoplasma putrefaciens (Mp) (Corrales et al ., 2007) . En el ganado ovino, el agente causal de la enfermedad es Ma, aunque Mmc tambin puede estar implicado ocasionalmente (Chazel et al ., 2010) . En el ganado caprino, varias especies de micoplasmas pueden estar presentes en un mismo rebao o individuo, ocasionando infecciones mixtas que junto a la presencia de otros micoplasmas considerados apatgenos complica las medidas de diagnstico y control de la enfermedad .

ciEntficos llEvados a cabo En EstE mbito, son hErramiEntas fundamEntalEs para El control y la prEvEncin dE la EnfErmEdad.
est evaluando tambin la capacidad que el dodecilsulfato sdico (SDS) tiene para eliminar micoplasmas en calostro caprino, ya que este detergente aninico consigue reducir la carga bacteriana del calostro en esta especie (Morales-de la Nuez et al., 2011) . reproductivo de los pequeos rumiantes, hace necesario considerar significativamente el riesgo de transmisin venrea . Entre rebaos, la principal fuente de transmisin es la introduccin de animales infectados . En relacin con este aspecto, la existencia de portadores auriculares asintomticos desempea un papel importante dentro de la epidemiologa de la enfermedad y su presencia se ha observado en numerosos colectivos caprinos, en individuos de ambos sexos . Los portadores son capaces de vehicular todas las especies de micoplasmas implicadas en la agalaxia contagiosa y se ha constatado su implicacin en diversos brotes de la enfermedad (Gil et al ., 1999) . En este sentido, la introduccin de machos en los rebaos sin un chequeo previo tambin supone un factor de riesgo a tener en cuenta . Recientemente se ha descrito la presencia de sementales portadores auriculares asintomticos serolgicamente negativos en diversos colectivos (Amores et al ., 2011a) . En estos individuos se ha descrito recientemente la infeccin sistmica y la presencia de lesiones crnicas en diversas localizaciones anatmicas, datos que parecen confirmar lo observado a nivel epidemiolgico y que confirman el riesgo que suponen para la propagacin de la infeccin (Gmez-Martn et al., 2012b) . En este sentido, cabe destacar que en colectivos de mucho inters, como los des-

EpidEmiologa
La agalaxia contagiosa es una enfermedad endmica de la cuenca mediterr-

nea que se debe comunicar anualmente de forma obligatoria a la Organizacin Mundial de Sanidad Animal (OIE) . En Espaa se trata de una enfermedad de declaracin obligatoria . Los individuos jvenes y las hembras en lactacin son los colectivos ms vulnerables a la infeccin por micoplasmas y la produccin intensiva supone un importante factor de riesgo aadido para la aparicin de brotes clnicos . Dentro de un rebao, las vas de transmisin ms habituales son a travs del contacto directo, la lactancia y el ordeo, constituyendo la leche y las secreciones respiratorias las principales vas de excrecin de micoplasmas (Bergonier et al ., 1997) . El calostro tambin puede ser una fuente de excrecin de elevadas concentraciones de micoplasmas . Estudios de nuestro grupo de investigacin han puesto de manifiesto que tanto a 56 C como a 60 C se observa una disminucin significativa de la concentracin de Ma a partir de 30 minutos, mantenindose posteriormente estable desde el minuto 90 al 120 . En el caso de Mmc, no se observaron colonias viables a partir de 60 minutos a 60 C . Estos resultados ponen de manifiesto que la pasteurizacin reduce drsticamente la concentracin de Ma en el calostro caprino y consigue la inactivacin de Mmc al aplicarlo durante 60 minutos a 60 C (Paterna et al ., 2011) . Por otro lado, se

El diagnstico dE la EnfErmEdad
puEdE rEalizarsE mEdiantE El uso dE tcnicas dirEctas, quE EvidEncian la prEsEncia dEl patgEno, o indirEctas, basadas En la dEtEccin dE la rEspuEsta dEl hospEdador antE su prEsEncia.

Aunque en menor medida, otras vas de excrecin son las secreciones oculares, fecales y genitourinarias . Tambin se ha demostrado recientemente la excrecin a travs del semen de Ma y Mmc en ganado caprino (De la Fe et al ., 2009; GmezMartn et al., 2012a) as como su capacidad de interferir en la calidad espermtica (Gmez-Martn et al., 2011) . Todo ello, unido a la habilidad que tienen los micoplasmas para sobrevivir en el aparato

Mycoplasma mycoides subespecie capri .

Aislamiento de Mycoplasma agalactiae a partir de semen caprino .

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tinados a la seleccin y mejora gentica de las razas selectas, diversas entidades como la Asociacin Espaola de Criadores de la raza Murciano-Granadina (ACRIMUR) y la Asociacin Espaola de Criadores de la Cabra Malaguea (CABRAMA) llevan a cabo programas especficos de prevencin para impedir la entrada de estos individuos infectados en sus centros de sementales .

diagnstico
El diagnstico de la enfermedad puede realizarse mediante el uso de tcnicas directas, que evidencian la presencia del patgeno, o indirectas, basadas en la deteccin de la respuesta del hospedador ante su presencia . El diagnstico directo microbiolgico convencional basado en el aislamiento e identificacin del agente requiere medios de cultivo enriquecidos, manipulacin especfica y prolongados periodos de incubacin . No obstante, su sensibilidad puede ser mayor que la PCR cuando la muestra es fresca y se procesa en 24 horas (Amores et al ., 2012a) . Por el contrario, su sensibilidad disminuye al utilizar muestras congeladas o con ciertos conservantes empleados en muestras de leche como el bronopol, empleados en los programas de pago por calidad o de mejora gentica . En cuanto al diagnstico molecular, la PCR ofrece un diagnstico directo en poco tiempo . Adems, presenta altos parmetros de validez que no se ven afectados por el empleo de muestras de leche congeladas o el uso de conservantes (Amores et al., 2010 y 2011b) . En lo referente al uso de tcnicas indirectas, las tcnicas serolgicas deben utilizarse preferiblemente como tcnica diagnstica a nivel de colectivo, debido a las carencias que presenta para la deteccin de todos los individuos infectados .

eficacia de las fluoroquinolonas, tetraciclinas y macrlidos, aunque dos cepas de Ma fueron resistentes a las tetraciclinas y todas lo fueron a la eritromicina, estreptomicina y cido nalidxico . En nuestro entorno, los estudios in vitro corroboran que la eritromicina presenta una elevada concentracin mnima inhibitoria en cepas de Ma aisladas tanto de mastitis como de tanque, semen u odo de rebaos con o sin clnica de la enfermedad (Amores et al., 2012b) . Por lo tanto, previamente a la utilizacin de la eritromicina en el control de la agalaxia contagiosa caprina, la especie de micoplasma implicada debe

Disminucin de la viabilidad espermtica en semen caprino inoculado con Mycoplasma agalactiae o Mycoplasma mycoides subespecie capri (tincin de eosina-negrosina) .

para la dEtEccin dE portadorEs asintomticos, El anlisis dE hisopos

tomados a partir dEl conducto auditivo ExtErno sE rEvEla como El mtodo dE ElEccin, dEbido al ElEvado nmEro dE infEccionEs auricularEs dEtEctadas.

Hay que tener en cuenta que el ELISA, la tcnica ms comn comercialmente, no discrimina entre anticuerpos vacunales y de infeccin, y posee parmetros de validez inferiores a otras tcnicas (Poumarat, 2011) . Adems, todas las tcnicas serolgicas presentan el inconveniente de reacciones cruzadas existentes entre muchos micoplasmas, dando lugar a reacciones falso-positivas originadas, en ocasiones, por micoplasmas apatgenos . El diagnstico de la especie de micoplasma involucrada en las infecciones es importante para ayudar a esclarecer el curso de la infeccin y el establecimiento de un tratamiento o medidas especficas . As, se ha observado que los antibiticos con mejores efectos frente a Mmc son las fluoroquinolonas, tetraciclinas y macrlidos (tilosina y eritromicina) (Antunes et al ., 2007) . Estudios similares con Ma (Antunes et al., 2008) han destacado la

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Calidad de leche

PCR especfica para la deteccin de Mycoplasma agalactiae .

Los sementales caprinos suponen un factor de riesgo para la transmisin de las infecciones por Mycoplasma spp .

confirmarse . Finalmente, no podemos obviar en el diagnstico de la agalaxia contagiosa que algunas especies de micoplasmas apatgenas u oportunistas tambin pueden aislarse de forma habitual en los pequeos rumiantes (Chazel et al ., 2010) . Para la deteccin de portadores asintomticos, el anlisis de hisopos tomados a partir del conducto auditivo externo se revela como el mtodo de eleccin,

Es nEcEsario idEntificar la
EspEciE dE micoplasma implicada para EstablEcEr una EstratEgia tEraputica Eficaz.

debido al elevado nmero de infecciones auriculares detectadas . En referencia a la determinacin del estatus de los rebaos respecto a la agalaxia contagiosa, los trabajos realizados en colaboracin con el Ncleo de Control Lechero de la Regin de Murcia (NUCOLEMUR) y la Asociacin Espaola de Criadores de la Cabra Malaguea (CABRAMA) han sentado las bases para una deteccin eficaz de las explotaciones crnicamente infectadas . En primer lugar, se ha podido comprobar que es necesario el muestreo peridico de varias muestras de leche de tanque . As, fueron necesarios cinco muestreos de tanque a lo largo de una lactacin para detectar el 72% de los rebaos positivos . Adems, dicho programa ha de contar con el anlisis de un nmero representati-

vo de mastitis clnicas, lo que aumenta considerablemente la capacidad diagnstica del programa, registrndose rebaos con casos clnicos de mastitis por micoplasmas en los que la presencia de estos microorganismos no se detecta en la leche del tanque (Amores et al ., 2012c) . El escaso nmero de animales excretores en un momento puntual, la excrecin intermitente caracterstica de la agalaxia contagiosa y el efecto de dilucin que ejerce la leche del tanque, pueden explicar estos resultados . El anlisis de las muestras de mastitis clnicas permiten, adems, el establecimiento de un programa rutinario de control de microorganismos Gram (-) y de Staphylococcus spp ., cuya capacidad diagnstica mediante cultivo convencional no se ve influenciada cuando la muestra se congela .
Agradecimientos Los trabajos actuales del grupo de investigacin han sido financiados por el Ministerio de Ciencia y Tecnologa, Proyecto AGL2009-09128, y la Fundacin Seneca, Agencia Regional de Ciencia y Tecnologa de la Regin de Murcia (Proyecto nmero 11785/PI/09) . El primer autor disfruta de una beca predoctoral FPI de la Universidad de Murcia .
Quisiramos agradecer la ayuda prestada durante tantos aos por parte de los ganaderos y tcnicos de ACRIMUR, NUCOLEMUR y CABRAMA .

BiBliografa
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