EL ADN Se encuentra formado por dos cadenas muy largas de polinucleotidos unidas entre si por puentes de hidrgeno formndose

los pares de bases. Las dos cadenas se encuentran en una estructura helicoidal alrededor de un eje lo que le da el nombre de doble hlice, en cambio el azcar y el fosfato estn orientados hacia el exterior de la molcula. Una molcula de ADN de un milmetro de longitud estar formado por 3 mil Kb o sea unas tres millones de bases. Podemos decir que por ello la molcula de ADN es un largo filamento de 20 Angstrom de dimetro cuya longitud depende del numero de Kb,que a su vez depende de la especie.

As pues la molcula de ADN es un largo filamento de 20 Angstrom La estructura de doble hlice fue propuesta por Watson y Crick en 1953 ,cuyo postulado era que la secuencia en la que estaban las bases a lo largo de la cadena de ADN es lo que contiene la informacin gnica estos cientficos propusieron el mecanismo de duplicacin del ADN que dar lugar a dos clulas hijas con idntica copias de ADN por medio de una divisin celular.A la duplicacin del ADN se la conoce con el nombre de replicacion. Durante la replicacin, las dos cadenas se van separando y cada una de ellas sirve de patrn para la sntesis de su cadena complementaria. Las bases se van agregando una a una y la seleccin de cul base entra en un sitio especfico de la cadena en formacin, queda determinada por la base en la cadena patrn con la que se va a aparear. El modelo de duplicacin de ADN se dice que es semiconservativo ,debido a que la mitad del ADN de un cromosoma proviene de la clula paterna ,mientras que la otra mitad se sintetiza durante el proceso de replicacion. Este fue el mecanismo propuesto

por Watson y Crick para explicar como se transfiere la informacin de generacin en generacin. Los enlaces fosfodiester son catalizados por la ADN polimerasa que comprueba que las bases se apareen correctamente y si hubiera un error lo corrige ,la frecuencia de que pueda suceder un error es menor a 1 en 100 millones. El apareamiento de las bases tambin es el mecanismo para enviar informacin gentica desde el ncleo hacia los ribosomas y dirigir la sntesis proteica.Una porcin de la cadena de ADN sirve como patrn para la sntesis de ARN y la secuencia de bases de ARN es complementaria a la otra porcin de la cadena que se esta copiando. Al ARN sintetizado de esta forma se le denomina ARN mensajero .La sntesis del ARN es catalizada por la ARN polimerasa que tambin es una enzima patrn-dependiente. El ARN mensajero se une en el citoplasma a subunidades ribosomales ,formndose el ribosoma activo,que es responsable de la sntesis de protenas ,en este organelo el ARN mensajero especifica la secuencia con que deben insertarse los aminocidos en la sntesis de polipeptidos. As es como la informacin contenida en los cromosomas se traduce en la especificacin de la estructura primaria de una protena ,la cual determina la funcionalidad de las protenas. A l proceso de copiado de la informacin contenida en el ADN cromosomal durante la sntesis del ARN mensajero se le llama transcripcin.Al proceso de lectura ,en el ribosoma de la informacin transportada por el ARN mensajero ,durante la sntesis de la protena se le conoce como traduccin.

Mutacion Y ReparaciN Adn Presentation Transcript

1. MUTACIONES DEL ADN Cambio en la secuencia original, de nucletidos del ADN, que no se corrige y por tanto queda incorporado de forma permanente en el material gentico. 2. MUTACIONES DEL ADN 1. NIVELES: M. Cromosmica M. Gnica 2. CLASES: M. Somtica M. Germinal 3. MECANISMOS QUE LAS INDUCEN: M. Espontneas M. Inducidas 3. MUTACIONES DEL ADN 4. EFECTOS DE LAS MUTACIONES a. No detectable b. Sentido errneo M. errnea aceptable M. errnea parcialmente aceptable M. errnea inaceptable c. Aparicin de un codn sin sentido 4. MUTACIONES DEL ADN Sentido Hb A (cad. b) 61 Lisina AAA errneo aceptable Hb Hikari Arginina AAU o AAC Sentido Hb A (cad. b) 6 Glutamato GAA o GAG errneo parcial/ Hb S Valina GUA o GUG aceptable Sentido Hb A (cad. a) 58 Histidina CAU CAC errneo inaceptable Hb M Tirosina UAU UAC 5. MUTACIONES GENICAS MUTACIONES ESPONTANEAS a. Errores en la replicacin del ADN b. Lesiones fortuitas c. Transposones 6. MUTACIONES GNICAS a. ERRORES EN LA REPLICACIN 1. SUSTITUCION DE BASES a. Transicin: T C G A b. Transversin: T A C G M. puntuales M. con cambio de fase 2. DELECIONES 3. INSERCIONES 7. MUTACIONES GNICAS b. LESIONES FORTUITAS 1. DESAMINACIN C U: Empareja con A: CG AT A Hipoxantina Empareja con C Producen Transiciones 8. LESIONES FORTUITAS 1. DESAMINACIN 9. LESIONES FORTUITAS 2. DEPURINACIN: Produce Transiciones 10. MUTACIONES GNICAS C. ELEMENTOS TRANSPONIBLES Unidades genticas que pueden moverse o transponerse por el genoma. Elementos dispersos cortos SINE Elementos dispersos largos LINE 11. MUTACIONES GNICAS C. ELEMENTOS TRANSPONIBLES 12. MUTACIONES GNICAS MUTACIONES INDUCIDAS 1. Mutgenos Fsicos 2. Mutgenos Qumicos 3. Mutgenos Biolgicos 13. MUTACIONES GNICAS MUTACIONES INDUCIDAS Mecanismos de induccin de las mutaciones: 1. Reemplazo de una base en el ADN. 2. Alteracin de una base lo cual lleva a un emparejamiento errneo. 3. Dao de la base por lo cual no puede emparejarse.

14. MUTACIONES GNICAS AGENTES FSICOS RAYOS ULTRAVIOLETA Origina fotoproductos como los dmeros de pirimidina T T TC Produce: Transiciones y transversiones Duplicaciones Deleciones Cambios de Fase. 15. MUTACIONES GNICAS RAYOS ULTRAVIOLETA 16. MUTACIONES GNICAS RAYOS ULTRAVIOLETA 17. MUTACIONES GNICAS AGENTES QUIMICOS ANLOGOS DE BASES NITROGENADAS 5 bromouracilo Anlogo de Timina Aparea con Adenina Produce Transicin 2 aminopurina Anlogo de Adenina Aparea con Timina Produce Transicin o con Citosina 18. MUTACIONES GNICAS AGENTES ALQUILANTES Etilmetano sulfonato (EMS) Adiciona grupo etilo Produce Transiciones Guanina EMS O6 etilguanina T: GC AT Nitrosoguanidina (NG) Adiciona grupo metilo Produce Transiciones Hidroxilamina (HA) Induce transiciones especficas GC AT Acido nitroso (AN) Desamina la citosina y la convierte en uracilo 19. MUTACIONES GNICAS AGENTES ALQUILANTES Nitrosoguanidina 20. MUTACIONES GNICAS AGENTES INTERCALANTES Se intercalan entre dos pares de bases consecutivas: Bromuro de etidio Naranja de Acridina Proflavina ICR 191 21. AGENTES INTERCALANTES 22. MUTACIONES GNICAS AFLATOXINA B1 Origina sitios apurnicos Produce transversiones GC AT 23. MUTACIONES GNICAS AGENTES BIOLGICOS Papiloma VIRUS Epstein Barr Herpes Simple Tipo II Rubeola BACTERIAS Mycoplasma 24. MECANISMOS BIOLGICOS DE REPARACIN 1. DETOXIFICACIN Dismutasa de Superxido Radicales D de S Catalasa superxido H2O2 H2O 25. MUTACIONES GNICAS 2. REVERSIN DIRECTA DE LA LESIN a. Dmeros de pirimidina Luz UV Enzima fotorreactivante (Luz blanca) b. Transferasa de grupos alquilo: Corrige daos del EMS c. Transferasa de grupos metilo y etilo: Corrige daos de la NG 26. REVERSIN DIRECTA DE LA LESIN Dmeros de pirimidina Luz UV Enzima fotorreactivante 27. ELIMINACIN DE GRUPOS METILO ADICIONADOS 28. MUTACIONES GNICAS 3. VIAS DE ESCISIN GENERAL Reparacin por escisin: a. La ADN polimerasa con accin exonucleasa reconoce el error en el emparejamiento de las bases. b. Escinde de 10 a 12 nucletidos. c. Polimeriza los nucletidos corrigiendo el error hallado. d. La ADN ligasa sella las uniones por 5. 29. VIA DE ESCISION GENERAL CORRECCIN DE LOS DMEROS DE PIRIMIDINA 30. VIA DE ESCISION GENERAL 31. MUTACIN EN LAS VAS DE ESCISIN GENERAL XERODERMA PIGMENTOSUM 32. MUTACIONES GNICAS 4. VAS DE ESCISIN ESPECFICA a. Reparacin por glicosilasas del ADN: Corrige las desaminaciones. b. Reparacin por endonucleasas de sitios apurnicos: Corrige las depurinaciones. 33. REPARACIN POR GLICOSILASAS (Reparan la desaminacin) 34. REPARACIN POR GLICOSILASAS 35. REPARACIN POR GLICOSILASAS (Reparan la desaminacin) 36. REPARACIN POR ENDONUCLEASAS DE SITIOS AP (Reparan las depurinaciones) 37. MUTACIONES GNICAS 5. REPARACIN POSTERIOR A LA REPLICACIN a. Sistema de reparacin por emparejamientos errneos. (RER) b. Reparacin por recombinacin. 38. SISTEMA DE REPARACIN POR EMPAREJAMIENTOS ERRNEOS 39. MUTACIONES GNICAS 6. SISTEMA S.O.S. Se induce cuando la clula ha recibido una agresin tan fuerte que ha producido mltiples rupturas del ADN y por tanto busca evitar la muerte celular. Su induccin implica la activacin de los genes: Rec A Umu C

40. ESTRATEGIA DE REPARACIN 1. Error sutil sin distorsin de la doble hlice: Vas de escisin especficas 2. Distorsin de la doble hlice: Sistema de escisin general. 3. Eliminar errores naturales de la replicacin: S. de reparacin por emparejamientos errneos 4. Daos que continan despus de la replicacin: S. de reparacin posteriores a la replicacin. 5. Evitar la muerte celular: Activacin Sist. S.O.S

Anlogo de base. loc.

rea temtica: Genotoxicologa. Citogentica. Definicin: Los anlogos de base, que son mutgenos qumicos, son molculas que pueden sustituir a las purinas o a las pirimidinas durante la biosntesis de los cidos nucleicos. Un buen ejemplo de anlogo de base es el derivado halogenado del uracilo en la posicin 5 del anillo de la pirimidina, el 5-bromouracilo (5 -BU). Contexto: Los mutgenos que actan exclusiva o fundamentalmente mediante ciertos tipos de reacciones de sustitucin de base (anlogo de base, hidroxilamina y algunos agentes alquilantes monofuncionales) o aquellos que son agentes intercalantes que provocan desplazamiento de la pauta de lectura ( acridina y antraquinona) no son clastgenos efectivos. Francs: Analogue de base. Ingls: Base analogue.

MUTACIN Y REPARACIN DEL ADN (1)

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Tipos de mutaciones Mutaciones espontneas Efectos de los cambios Mutaciones inducidas Test de AMES Supresin y reversin Mecanismos de replicacin

Una de las fuentes de variabilidad gentica que han hecho posible la evolucin es la mutacin o cualquier cambio heredable en la secuencia de nucletidos del material gentico (ADN) de un organismo. Las mutaciones suponen la alteracin del genotipo, o constitucin gentica del individuo, y en ocasiones tambin del fenotipo que son las caractersticas externas del individuo.

Las mutaciones ocurren al azar, esto se descubri en un experimento en el que se hicieron 10 cultivos de 10 (8) clulas cada uno. A cada cultivo se le aadi el fago T1, las clulas eran de E. coli. Si las mutaciones no ocurren al azar cabra esperar que el nmero de colonias resistentes fuera ms o menos igual en cada cultivo, si la mutacin es al azar se espera gran variabilidad en el nmero de colonias resistentes en cada tubo. As, se comprob, que la mutacin era al azar. Las mutaciones pueden afectar a uno (puntuales), unos pocos (pseudopuntuales) o a un gran nmero de nucletidos de una secuencia de ADN (cromosmicas).

TIPOS DE MUTACIONES
Puntuales y pseudopuntuales * cambios de base

transiciones: Purina por purina y pirimidina por pirimidina transversiones: Purina por pirimidina y pirimidina por purina

* desfases (cambio en el nmero)

delecin insercin

Cromosmicas

deleciones duplicaciones inversiones translocaciones

Las mutaciones pueden ser espontneas mediante varios mecanismos diferentes, incluyendo errores de replicacin del DNA y lesiones fortuitas de ste; o mediante mutgenos. Los mutgenos son agentes que aumentan la frecuencia de mutagnesis, generalmente alterando el DNA y en este caso son inducidas.

MUTACIONES ESPONTNEAS
Errores en la replicacin del DNA
Durante la sntesis del DNA puede producirse un error en la replicacin porque se forme un emparejamiento ilegtimo de nucletidos como A-C que da lugar a la sustitucin de una base por otra. Cada una de las bases aparece en el DNA en una de varias formas llamadas tautmeros que son ismeros que se diferencian en las posiciones de sus tomos y en los puentes que se forman entre ellos. Esas formas estn en equilibrio. La forma ceto es la que se encuentra normalmente en el DNA mientras que las formas imino o enol son

menos frecuentes. La capacidad del tautmero menos frecuente de una base de emparejarse errneamente y producir mutaciones durante la replicacin del DNA fue puesta de manifiesto por primera vez por Watson y Crick. A estos emparejamientos errneos se les llama cambios tautomricos. Tambin pueden ocurrir emparejamientos errneos cuando una de las bases se ioniza, esto sucede con ms frecuencia que los cambios tautomricos.

Transiciones
Todos los emparejamientos errneos anteriores producen mutaciones por transicin, en las que una purina es sustituida por otra purina y una pirimidina es sustituida por otra pirimidina.

Transversiones
No pueden realizarse por emparejamientos errneos como los debidos a cambios tautomricos. Pero s pueden realizarse si una base sufre un cambio tautomrico mientras que la otra base rota sobre su enlace glucosdico y quedan enfrentadas sus cargas.

Desaminacin
Es una de las ms frecuentes debido a la inestabilidad qumica, afectando gravemente a la replicacin del ADN provocando transiciones. En este caso la base se modifica antes de la replicacin debido a los radicales que provoca el metabolismo. La desaminacin de citosina produce uracilo, as los resduos de uracilo que no sean reparados se emparejarn con adenina durante la replicacin produciendo la conversin de un par GC en uno AT, se produce una transicin.

Cambios de fase
Estas mutaciones pueden ser inserciones o deleciones. Las inserciones se producen por un deslizamiento o "resbaln" de la cadena sintetizada con lo que se forma un lazo de varios pares de bases. En la siguiente ronda de replicacin se aadirn tantas bases como comprenda el lazo ya que cuando se produce el "resbaln" sigue replicndose por donde se qued antes del "resbaln". Las deleciones se producen por un deslizamiento o "resbaln" de la cadena molde, como las que hay que copiar no se pueden no se aaden a la caden hija.

Despurinizacin

El ADN pierde de alguna manera alguna de sus bases y si hay un hueco la reparacin introduce una base. La frecuencia de las mutaciones espontneas es generalmente baja.

EFECTOS DE LOS CAMBIOS

Se expresan cuando el gen pasa a su protena correspondiente. Los efectos de los cambios pueden ser:

Cambios de sentido: se cambia un aminocido por otro Sin sentido: la mutacin se produce porque se transforma en un codn de terminacin. Desfases: si hay una delecin de la base, la pauta de lectura cambia y se produce un gran cambio en la protena y es muy grave. Mutaciones silenciosas: son mutaciones sin efecto: UUU (Phe)---> UUC (Phe) El aminocido que cambia es muy parecido y la protena sigue funcionando.

En eucariotas tienen un efecto muy grave ya que pueden provocar enfermedades, se dan sobre todo, cuando hay una delecin de 5.000 pb (pares de bases) que afecta a dos genes y producen la enfermedad como problemas respiratorios de inteligencia.

MUTACIONES INDUCIDAS
Existen puntos de un gen donde la mutacin es ms frecuente se llaman PUNTOS CALIENTES. Al genotipo silvestre o salvaje se le utiliza como patrn y en el que se produce la variacin se le llama mutante. Una estirpe mutante puede cambiar a otra y luego volver a la inicial, a esto se le llama regresin. Los mutantes se inducen con mutgenos que son de varios tipos y cada uno induce una mutacin distinta, aunque suele ser al azar. Los mutgenos son de varios tipos:

Mutgenos Qumicos
Anlogos de bases:
Algunos compuestos qumicos son suficientemente parecidos a las bases nitrogenadas normales del DNA para, ocasionalmente, incorporarse a ste en lugar de las bases normales, tales compuestos se llaman anlogos de bases. Una vez en su sitio tienen propiedades de emparejamiento distintas de aquellas a las que han sustituido, de este modo, causan mutaciones al provocar que, durante la replicacin, se inserten frente a ellas nucletidos incorrectos. El anlogo de base original slo estn en una cadena sencilla pero puede provocar el cambio de un par de nucletidos

que se replica en todas las copias de ADN descendientes de la cadena original. Ejemplos son: 5-bromurouracilo, 2-aminopurina.

Modificadores de bases:

cido nitroso: provoca una desaminacin que modifica las bases C-->U, G--->X, con lo que se produce un apareamiento errneo. Hidroxilamina: provoca una transicin de G-->A y se da principalmente en bacterias. Agentes alquilantes: introducen grupos alquilo a las cuatro bases en muchas posiciones, produciendo transiciones, etilmetanosulfonato y la nitrosoguanidina. Agentes intercalantes: son molculas planas que imitan pares de bases y son capaces deddeslizarse entre las bases nitrogenadas apiladas en el ncleo de la doble hlice, mediante un proceso de intercalacin. En esta posicin el agente puede producir deleciones o deleciones de un par de nucletidos. Algunos agentes intercalantes son: proflavina, naranja de acridina y ICRs.

Prdida del emparejamiento especfico:

Un gran nmero de mutgenos daan una o ms bases, haciendo imposible el posterior emparejamiento especfico. El resultado es un bloqueo en la repliacin, puesto que la sntesis del DNA no sigue ms all de una base que no puede especificar una complementaria mediante puentes de hidrgeno. Este fallo es replicado por el mecanismo SOS.

Radiaciones
UV que producen dmeros de timina, rayos X y las radiaciones gamma que rompen el DNA. Siguiente - Mutacin y reparacin del ADN (2) >>>

MUTACIN Y REPARACIN DEL ADN (2)

TEST DE AMES
Es un test para detectar la carcinogenicidad. Utiliza dos mutaciones de auxotrofa para histidina que revierten por diferentes mecanismos moleculares. Llevan una mutacin que inactiva el sistema de reparacin por escisin, y otra que elimina la cubierta protectora.

SUPRESIN Y REVERSIN
Se explica mediante un ejemplo. Si tenemos una mutante de E. coli que no crece en un medio sin histidina, es his- y es auxtrofo. El silvestre se llama his+. Sometemos el mutante a mutgenos y puede pasar a his+, y es una reversin. En este mutante puede ocurrir una reversin verdadera o una reversin equivalente. Se produce una supresin cuando la segunda mutacin se produce en otro sitio pero s se convierte en his+. Es una complementacin intergnica. La supresin intergnica consiste en una mutacin en otro gen distinto de donde ocurri la primera. La supresin intragnica consiste en una mutacin supresora en el mismo gen que ocurri la supresin inicial. La complementacin intragnica se produce sobre todo en protenas polmero.

MECANISMOS DE REPLICACIN
Reparacin directa
Son sistemas que eliminan directamente el dao del UV en el DNA, como es el caso de los dmeros de timina. La luz visible activa la fotoliasa que rompe los dmeros de timina. Otro ejemplo son las alquiltransferasas y su actividad consiste en eliminar los grupos alquilo, tambin se repara la despurinizacin gracias a las glicosidasas del ADN.

Dependiente de replicacin
Todas las clulas contienen endonucleasas que atacan los sitios que quedan tras la prdida espontnea de resduos de purina o pirimidina. Por comodidad, los sitios sin purina o sin pirimidina se denominan sitios AP. Las endonucleasas AP son vitales para la clula porque, como se apunt con anterioridad, la despurinizacin espontnea es un hecho relativamente frecuente. Estas enzimas introducen hendiduras en la cadena mediante la rotura de enlaces fosfodisteres en los sitios AP. Esto promueve un proceso de reparacin por escisin medidado por otras tres enzimas: una exonucleasa, la polimerasa de DNA I y la ligasa de DNA.

Escisin
Esta va de reparacin est determinada por tres genes denominados uvrA, uvrB y uvrC. Este sistema reconoce cualquier lesin que cree una distorsin importante en la doble hlice de DNA. Una endonucleasa denominada nucleasa uvrABC realiza una incisin alejada varios pares de bases a cualquier lado de la base daada,

eliminndose a continuacin un fragmente de DNA de cadena sencilla. El pequeo hueco se rellena entonces mediante sntesis de reparacin y queda sellado por la ligassa de DNA.

Sistema GO
Dos glucosilasas actan conjuntamente para eliminar las mutaciones causadas por las lesiones que produce en el DNA el 8-oxodG. Las glucosilasas junto al producto del gen mutT forman el sistema GO. Cuando se originan lesiones GO en el DNA, por dao oxidativo espontneo, una glucosilasa cifrada en el gen mutM elimina la lesin. An as persisten algunas lesiones GO que emparejan errneamente con adenina. Una segunda glucosilasa producto del gen mutY elimina la adenina de este emparejamiento errneo especfico, llevando al restablecimiento de la citosina correcta por sntesis de reparacin.

Sistema SOS
En E. coli depende de los genes recA, umuC y umuD. Cuando se encuentra un tramo sin cifrar acta el sistema SOS. Se activa la protena recA que induce la presencia de las protenas SulA y SulB que interaccionan con la DNA pol III. sta hace que pierda afinidad y prosiga la sntesis de ADN y dejando el hueco y sin que la clula muera.

Reparacin postreplicativa
Algunas vas de reparacin reconocen errores incluso despus de que haya tenido lugar la replicacin. Uno de estos sistemas, denominado sistema de reparacin de emparejamientos errneos. Para averiguar cual de las dos bases es la errnea debe diferenciar entre la cadena progenitora y la cadena hija. Lo diferencia porque la enzima metiladora metilasa de la adenina tarda varios minutos en metilar la cadena hija. Las protenas mut S y mut L interaccionan con el sitio mal emparejado y una protena mutH rompe la cadena recin sintetizada. Alrededor del emparejamiento errneo, las cadenas de DNA se separan con ayuda de una protena denominada MutU y se estabilizan con SSB. Y las polimerasas copian el segmento de DNA.