EDNA PAOLA BECERRA ESPAOL UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA Progress in Biological Control, 2012, Volume 14, 75-88, ARTHROPOD-PLANT

INTERACTIONS. Flix Ortego

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad Nacional de Colombia. 2012

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Coleoptera
Collembola Lepidoptera

Thysanoptera
FITOFAGOS

Diptera

Phasmida

Hymenoptera

Orthoptera

Hemiptera

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Periodo

Millones de aos

Tipo de insectos

Descripcin

Devoniano

410 Mya

Primeros insectos sin alas, Alimento material en Terrestres o descomposicin semiacuaticos Insectos alados Primeros fitfagos Primer registro fsil de un insecto masticador (ancestro Orthoptera) Alimento de fluidos de tejidos de plantas Y primer masticador

Carbonfero

355 -290

Prmico Trisico Jurasico

290 250 250 205 205 -145

Extincin de los anteriores Aparecen Thysanoptera y Hemptera Ordenes de insectos modernos Col, Dip, Hym, Lep, radiacin Colonizan Gimnospermas Se especializan en ser minadores, forman agallas y madera Angiospermas dominan el ambiente terrestre

Cretceo

145 -65

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Propuesta de evolucin de Condylognatha, mostrando las relaciones entre los principales infrardenes de Hemptera y el orden Thysanoptera.
Los principales infrardenes que se alimentan de savia son Auchenorrhyncha y Sternorrhyncha
Phylum: Arthropoda Subphylum: Hexapoda Clase: Insecta Subclase: Pterygota Division: Neoptera Subdivision: Paraneoptera Superorden: Condylognatha Orden Thysanoptera - Hemiptera

Silva et al., 2004)

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

INSECTOS HERBVOROS

Diversidad

Morfolgica

Fisiolgica

Comportamiento

Adaptaciones fisiolgicas

Adaptaciones bioqumicas

Intestino - enzimas (membranas)

http://www.flickr.com/photos/24085570@N04/2290341310/

Defensa de plantas , metabolitos secundarios y protenas insecticidas

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Calidad en la dieta: Protenas y Carbohidratos

Plantas = Bajo cont protenas Alto cont carbohidratos

Aminocidos: varan dependiendo la especie = (diferencias nutricionales para el insecto)

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Proteasas Protenas Serina, Cisteina, proteasas asparticas

Hidrolizan peptidos = oligopeptidos que son digeridos por exopeptidasas

(Aminopeptidasas y carboxipeptidasas) Remueven los a.a.de los borde amino y carboxi de las cadenas peptidicas

Constituyentes de la pared celular

Almidon
Digestin

Carbohidratos

Pectinasas

Hemicelulasas
Celulasas

amilasas degradan almidn = Oligosacaridos que se hidrolizan para producir disacridos: (Sacarosa, maltosa, celobiosa)

Lpidos

Hidrlisis por lipasas y fosfolipasas

cidos grasos y sustancias lipofilicas

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Hiptesis: El proceso digestivo se relaciona con la posicin filogentica y hbitos dietarios resultado de la adaptacin de insectos ancestrales a un tipo particular de alimento.

Matriz extracelular formada por :

Protenas Quitina Proteoglicanos

Intestino medio Alrededor del bolo alimenticio

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

1. 2.

Proteccin contra partculas abrasivas Compartimentalizacin para incrementar la eficiencia de la digestin de protenas y carbohidratos Barrera para microorganismos

3.

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

European corn borer (ECB; (Ostrinia nubilalis, Lepidoptera: Crambidae)) larvae (third instar) fed 0.05% w/w wheat germ agglutinin (WGA) (Germen de trigo)

Microscopa del mesenteron (seccion transversal) tercer estadio del ECB. (A) mesenteron de las larvas control que muestra la membrana peritrfica (PM) y fragmentos celulares de las plantas en clulas epiteliales del IM (x 80). PC, fragmento de clula, mg, intestino medio. (B) vlvulas de estomodeo de larvas alimentadas con WGA mostrando PM en el lumen del intestino vaco y las clulas epiteliales relativamente pequeas (x 80).

Harper et al.,1998)

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Fluorescein isothiocyanate (FITC)-chitinbinding domain (CBD) probe-coupled fluorescence detection of chitin in the PM of an M. alternatus adult.

(a) tracto digestivo de adulto (b) tipo I PM. (c) micrografa electrnica de barrido de la MP . (d) micrografa electrnica de la PM mostrando mltiples capas Kabir et al., 2012 (In press)
Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Orthoptera: Digestin de carbohidratos ( buche) Digestin de protenas y digestin final de carbohidratos ( intestino medio)

Col, Hym, Lep Buche ausente o reducido

Dptera Actividad enzimtica en el Int. medio

Hem, Thys Ausencia de MP Habito de alimentacin lquidos y floema

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Membrana en el intestino medio Lipoprotenas El intestino medio no esta en contacto con los fluidos ingeridos El principal problema de los insectos chupadores es la baja concentracin de a.a esnciales y el alto contenido de sacarosa en la savia
Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Mehrabadia et al, 2012

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Mehrabadia et al, 2012

El V1 tiene clulas columnares con ncleos basales y PMMs. El V2 muestra clulas cilndricas con ncleo en el centro de las clulas y una gran cantidad PMMs que se extienden hacia lumen. En la parte distal de V2 hacia el V3, las clulas del epitelio se organizan de tal manera para formar un lumen estrecho. Las mismas clulas estn presentes en el V3 pero con menos PMMs vistos en V1-V2. El V4 tiene tambin clulas columnares del epitelio sin PMMs. Bacterias simbiontes se encuentran en V4. El recto (R) clulas vacuolares. Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Bacteria simbionte: Genero Buchnera

Bacteriocitos (clulas)
a.a. son absorbidos por la M. perimicroviliar por simporte K+

Usa a.a. no esenciales y sintetiza a.a. esenciales

En Acyrthosiphon pisum (Hemiptera: Aphididae ) la presin osmtica de la savia ingerida es reducida por glucosidasas : catalizan la liberacin de sacarosa (dis) e incorporacin de glucosa (mono) excretando melaza
http://micro.cornell.edu/cals/micro/research/labs/angertlab/spanish-genomes-2.cfm

Paola Becerra. Maestra en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Absorcin de aminocidos Inmovilizar enzimas hidroliticas Digestin de polmeros en Hemiptera que se alimentan de semillas

Quesada gigas (Hemiptera: Cicadidae) Plaga caf

A) Detail of the apex of a V3 cell. Note perimicrovillar membranes (PMM, arrows). B) Immunocytochemical localization of membranebound -glucosidase inmidgut cells. Note arrows and arrow heads pointing to perimicrovillarmembranes close to microvilli.

Fonseca et al., 2010

INTESTINO MEDIO

ALCALINO

ACIDO Coleopteros Hempteros

Lep, Orth, Hymen algunos Col

Proteasas de serina (Tripsina,quimotripsina, elastasa)

Proteasas de cistena y aspartilproteasa

Exopeptidasas

Exopeptidasas: actividad proteoltica

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Los fitfagos han adaptado su sistema digestivo por: 1. Sntesis de enzimas digestivas especificas 2. Regulacin de la sntesis de isoenzimas

La expresin para la sntesis y niveles de proteasa en algunas especies depende del hospedero y la calidad y cantidad de alimento

Las sern proteasas son hidrolasas que degradan enlaces peptdicos de pptidos y protenas y que poseen en su centro activo un aminocido de serina esencial para la catlisis enzimtica. Esta clase de enzimas incluye a la tripsina, quimotripsina, subtilisina
http://es.wikipedia.org/wiki/ Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Incremento de la actividad proteasa = dieta con bajo nivel de proteina Para hacer mas eficiente el uso de esa protena limitada o escasa

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

En el lumen determina las condiciones optimas para la actividad enzimtica y cantidad de nutrientes que pueden ser digeridos La alcalinizacin del lumen en Lep es producido por secrecin de K+ desde la hemolinfa La acidez en el IM de Diptera se debe a los hbitos ancestrales de consumir bacterias

La acidez en el IM de Hemiptera es debido a la presencia de cistena y proteasas asparticas

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Lepidoptera

Glucosa oxidasa

H2O2 (perxido de H)

Tambin puede convertir la glucosa en gluconato (que el insecto NO puede usar)

Inhibe las enzimas oxidativas ingeridas (peroxidasa, polifenoloxidasa, lipoxigenasa)

http://es.wikipedia.org/wiki/Glucosa_oxidasa

La enzima glucosa oxidasa (GOx) es una oxidorreductasa que cataliza la oxidacin de la glucosa para formar perxido de hidrgeno y D-glucono--lactona. En las clulas contribuye a degradar los azcares hacia sus metabolitos.

Membrana peritrfica
Ultrafiltracin Expulsin de iones Barrera para el paso de aleloqumicos hidrofilicos Permeabilidad a taninos Proteccin antioxidante
Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

1. Las hojas heridas de tomate sintetizan prosistemina (200aa)

2. Prosistemina procesada proteolticamente para producir sistemina (18aa)

3. Sistemina es liberada de las clulas daadas en el apoplasto. 4. Sistemina se transporta fuera de la hoja herida va floema. 5. En las clulas diana, la sistemina puede unirse a un sitio en la membrana plasmtica e iniciar la sntesis de cido Jasmnico que tiene efectos de gran alcance. 6. cido Jasmnico finalmente activa la expresin de los genes que codifican para INHIBIDORES DE PROTEASA (PIN)
Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Las plantas al bloquear la sntesis de proteasas intestinales (enzimas que rompen los enlaces peptdicos de las protenas) , frenan el crecimiento y provocan la muerte por ayuno.

Los inhibidores de proteasas bloquean las proteasas de serina, cistena y aspartato (a.a), as como a las carboxipeptidasas (enzimas q catalizan hidrlisis de enlaces peptidicos)
Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Alimentacin de insectos

Adaptacin a protenas insecticidas de plantas

Hiperproduccin de proteasas

Regulacin de enzimas inhibidoras o insensitivas

Protelisis

Compensa los efectos inhibitorios de proteasas y amilasas

Se adapta a inhibidores hidrolticos

Inhibe enzimas hidrolticas de las plantas

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Algunos insectos recurren a estrategias diversas para eludir la defensa vegetal:

incrementan su actividad proteoltica inducen enzimas proteolticas insensibles a los inhibidores de proteasas expresan proteasas que degradan especficamente a los inhibidores de proteasas producidos por las plantas y para las cuales no tiene inhibidores.

Como resultado de la coevolucin, los insectos herbvoros se han adaptado a las defensas de las plantas.
Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Inactiva alelo qumicos

Lepidoptera

pH alto

Surfactantes que precipitan taninos

Altera efectividad de protenas insecticidas producidas por las plantas

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

son metabolitos secundarios de las plantas, fenlicos, no nitrogenados, solubles en agua

Presencia de inhibidor de proteasas en la dieta

Sobre activacin de genes de proteasas

Desactiva genes de sensibilidad a proteasas

Regulacin de proteasas

La habilidad de regular la expresin gentica de enzimas digestivas permite al insecto superar la defensa de las plantas y minimizar el costo metablico asociado a su produccin.
Es necesario estudiar a nivel gentico la interaccin planta insecto incluyendo esas adaptaciones del intestino del insecto a la herbivora.
Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

En los insectos se han presentado adaptaciones morfolgicas en el intestino y fisiolgicas por produccin de enzimas para degradar y asimilar los nutrientes Por coevolucion los insectos herbvoros y las plantas han desarrollado mecanismos de defensa. Los mecanismos de defensa de insectos contra sustancias defensa de las plantas se basa en la regulacin de la expresin de genes dependiendo el tipo de alimento o tipo de sustancia de defensa ingerida.
Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

M. S. Harper 1, T. L. Hopkins 1, T. H. Czapla 2 . Effect of wheat germ agglutinin on formation and structure of the peritrophic membrane in European corn borer (Ostrinia nubilalis) larvae. Tissue & Cell, 1998 30 (2) 166-176

Kabir, K.E., et al., Fluorescein-5 isothiocyanate conjugated-chitin-binding domain probe (FITC-CBD)coupled detection of chitin in the peritrophic membrane of Monochamus alternatus..., J. Asia Pac. Entomol. (2012),
Carlos P. Silvaa, Jose R. Silvaa, Fabio F. Vasconcelosa, Marlvia D.A. Petretskia, Renato A. DaMattab, Alberto F. Ribeiroc, Walter R. Terrad,. Occurrence of midgut perimicrovillar membranes in paraneopteran insect orders with comments on their function and evolutionary significance. Arthropod Structure & Development 33 (2004) 139148Micron 43 (2012) 631637

Mohammad Mehrabadia, Ali R. Bandania,, Morteza Allahyarib, Jose E. Serroc . The Sunn pest, Eurygaster integriceps Puton (Hemiptera: Scutelleridae) digestive tract: Histology, ultrastructure and its physiological significance. Micron 43 (2012) 631637

Fbio V. Fonseca a, Jos R. Silva b, Richard I. Samuels c, Renato A. DaMatta d, Walter R. Terra e, Carlos P. Silva f, Comparative Biochemistry and Physiology, Part B 155 (2010) 2025 Purification and partial characterization of a midgut membrane-bound -glucosidase from Quesada gigas (Hemiptera: Cicadidae)

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012

Paola Becerra. Maestria en Ciencias Agrarias. Universidad nacional de Colombia 2012