Giberelinas

As giberelinas foram identificadas como compostos de fungos que promovem o alongamento do caule
DoenaBakanae (Gibberella fujikuroi) Plantas no afetadas Plantas infectadas so hiperalongadas Doena de Bakanae produz plantas bobas, as plantas infectadas se alongam muito rapidamente, e so incapazes de se sustentar; elas so tambm macho estreis, inviveis.

Giberelina (GA3) Descoberta em 1926 no Japo

Photo source: Nigel Cattlin, Visuals Unlimited, Inc

As giberelinas foram identificadas como reguladores endgenos do crescimento vegetal

Ervilha normal

Giberelina promove alongamento do caule e produo de sementes. Em algumas plantas elas promovem florescimento e desenvolviento de fruto.

Ervilhas ans de Mendel so deficientes na sntese de GA.

Algumas plantas so tratadas com inibidores da sntese de GA para manter um estatura baixa e prevenir tombamento e acamamento .

Dsenvolvimento de muitos frutos sem semente necessita aplicao de GA.

Lester, D.R., Ross, J.J., Davies, P.J., and Reid, J.B. (1997) Mendel's stem length gene (Le) encodes a gibberellin 3[beta]-hydroxylase. Plant Cell 9: 1435-1443; Wheat mage courtesy of Mary Burrows, Montana State University, Bugwood.org; Clementine photo by Azcolvin429.

Sntese de GA e homeostase
In 1956, B.O. Phinney encontrou que algumas plantas de milho ans poderiam ser recuperadas pela aplicao de GA.

Normal

Normal + GA

An-1

An-1 + GA

A via de biossntese de GA em plantas foi determinada em parte pela anlise de plantas ans deficientes em GA.

Phinney, B.O. (1956). Growth response of single-gene dwarf mutants in maize to gibberellic acid. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 42: 185-189.

Fotossntese METABOLISMO PRIMRIO DE CARBONO Eritrose 4 fosfato Fosfoenolpiruvato

Piruvato

3 fosfoglicerato

Ciclo do cido tricarboxlico

Acetil-CoA

Aminocidos alifticos
Via do cido shikimico Aminocidos aromticos Produtos secundrios contendo nitrognio Via do cido malnico Via do cido mevalnico Via Metileritritol fosfato

Compostos fenlicos

Terpenos

Via do cido mevalnico

Via Metileritritol fosfato

CPS ent copalil difosfato sintase KS ent-caureno sintase

GA promove o crescimento atravs da expanso e diviso celular

GA induz a expreso de protenas regulatrias do ciclo celular chamadas ciclinas.

Expanso celular

Diviso celular

Expanso celular

GA promove alongamento celular atravs do afrouxamento da parede celular

Ao contrrio das auxinas, GA no possui transporte polar

A mesma quantidade de GA move da parte superior contendo o bloco doador para o bloco abaixo independentemente da polaridade do segmento do caule. Ao contrrio, auxinas se movem do pice do caule para a base.

Orientao normal

Orientao invertida

Adapted from Kato, J. (1958) Non polar transport of gibberllin through pea stem and a method for its determination. Science 128: 1008-1009.

GAs so transmitidos por enxertia; elas podem mover por longas distncias
WT - d1
Em ervilha, um broto do mutante na resgatado pela enxertia no sistema radicular Na. na Na na na

Plntulas de milho so enxertadas alado a lado

d1- d1

Em milho, GA ou GAprecursor move da planta normal para o mutante d1 e promove crescimento.

Proebsting, W.M., et al. (1992). Gibberellin concentration and transport in genetic lines of pea : Effects of grafting. Plant Physiol. 100: 1354-1360; Katsumi, M., et al. (1983). Evidence for the translocation of gibberellin A3 and gibberellin-like substances in grafts between normal, dwarf1 and dwarf5 seedlings of Zea mays L. Plant Cell Physiol. 24: 379-388 Copyright 1983 Japanese Society of Plant Physiologists, with permission.

GA pode superar a o comprimento de dia necessrio para promover o florescimento

Em algumas espcies de plantas que necessitam dias longos para o florescimento, GA pode induzir florao mesmo em dias curtos.

Controle

Giberelina

Samolus parviflorus cresce em dias curtos com ou sem tratamento com giberelina.

Lang, A. (1957). The effect of gibberellin upon flower formation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 43: 709-717.

Mutantes com perda da funo das enzimas CPS ou KS so ananizantes

GGPP
CPS

CPP
KS

entkaurene

Tipo selvagem e mutante an de arroz

Geranilgeranil difosfato
Ent copalil difosfato CPS ent copalil difosfato sintase KS ent-kaurene sintase

Essas enzimas so codificadas por um ou poucos genes, assim mutantes tem nveis de GA severamente reduzidos.

oscps-1

osks-1

Wt

oscps-1

osks-1

Sakamoto, T., et al. (2004). An overview of gibberellin metabolism enzyme genes and their related mutants in rice. Plant Physiol. 134: 1642-1653.

De forma similar, perda da funo dos genes KO ou KAO gera plantas ans
O gene de ervilha LH codifca a enzima entcaureno oxidase (KO) Em ervilha o gene NA codifica para a enzima cido entcaureno oxidade (KAO)

entcaureno
KO

cido entcaureno
KAO

GA12
Davidson, S.E., Elliott, R.C., Helliwell, C.A., Poole, A.T., and Reid, J.B. (2003). The pea gene NA encodes ent-kaurenoic acid oxidase. Plant Physiol. 131: 335-344. Davidson, S.E., Smith, J.J., Helliwell, C.A., Poole, A.T., and Reid, J.B. (2004). The pea gene LH encodes ent-kaurene oxidase. Plant Physiol. 134: 1123-1134.

As ltimas enzimas da via so codificadas por vrios genes com diferente padro de expresso
GA12 A variedade semi-an 1 mutada em uma GA 20 oxidase que expressa em brotaes mas no em tecidos reprodutivos, direcionando ao um aumento na produo de gros (revoluo verde).
GA 13hidroxilase

GA53

GA 20-oxidase

GA9 GA4

GA 3-oxidase
Gas ativas

GA20 GA1

Imaage courtesy of M. Matsuoka. Sasaki, A., Ashikari, M., Ueguchi-Tanaka, M., Itoh, H., Nishimura, A., Swapan, D., Ishiyama, K., Saito, T., Kobayashi, M., Khush, G. S., Kitano, H. and Matsuoka, M. (2002) A mutant gibberellin-synthesis gene in rice. Nature 416, (6882) 701-702.

GAs podem ser desativadas por vrias enzimas

GA4
HO

GA2ox Entren alongado superior (EUI)

HO

HO

GA MetilTransferase (GAMT)

HO HO CH3

ELONGATED UPPERMOST INTERNODE codifica uma enzima para desativao de GA

Perda da funo em mutantes causa alongamento e linhas com super-expresso produzem plantas ans.

Zhu, Y., et al. (2006). ELONGATED UPPERMOST INTERNODE encodes a cytochrome P450 monooxygenase that epoxidizes gibberellins in a novel deactivation reaction in rice. Plant Cell 18: 442-456.

GA2oxidase controla o movimento de GA no meristema apical

OsGA2ox1 mRNA GA4 GA5

Antes da transio para florao, OsGA2ox1 expresso apenas abaixo do meristema apical, seletivamente excluindo GA1 e GA4.

Tem sido demosntrado em Lolium (azevem) que GA5 (que resistente a desativao por GA2ox) pode se mover dentro do meristema mesmo na presena de GA2ox .

Sakamoto, T., Kobayashi, M., Itoh, H., Tagiri, A., Kayano, T., Tanaka, H., Iwahori, S., and Matsuoka, M. (2001). Expression of a gibberellin 2-oxidase gene around the shoot apex is related to phase transition in rice. Plant Physiol. 125: 1508-1516.

GA4 entra no meristema aps a expresso de GA2ox ser cessada

Em Lolium, nveis de GA5 aumentam rapidamente nos brotos aps uma simples induo por um dia longo, enquanto que os nveis GA4 e GA1 aumentam depois.

GA4

GA5

Days after induction

Aps induo floral, a expresso de GA2ox cessada, permitindo que GA4 mova para dentro do meristema e promova alongamento das brotaes.

King, R.W., Moritz, T., Evans, L.T., Junttila, O., and Herlt, A.J. (2001). Long-day induction of flowering in Lolium temulentum involves sequential increases in specific gibberellins at the shoot apex. Plant Physiol. 127: 624-632.

Nanismo conferido pela superexpresso da enzima que desativa GA, GA 2-oxidase

Arabidopsis Arabidopsis

GA 2oxidase
Forma inativa

GA12

GA 13hidroxilase

GA53

GA 20oxidase

GA 2oxidase
Forma inativa

GA9
GA 3-oxidase

GA20
GA1
GA 2-oxidase

GA4
WT WT Fumo GA2ox

GA2ox

GA2ox GA2ox

Forma inativa

Forma inativa

WT

GA2ox

GA2ox

As diferentes GA2 oxidases podem preferencialmente atuar em GAs ativas ou em seus precursores, com diferentes resultados no desenvolvimento.
Schomburg, F.M., Bizzell, C.M., Lee, D.J., Zeevaart, J.A.D., and Amasino, R.M. (2003). Overexpression of a novel class of gibberellin 2-oxidases decreases gibberellin levels and creates dwarf plants. Plant Cell 15: 151-163.

Superexpresso de uma GAmetiltransferase causa nanismo

GAMT1

GAMT1

Fumo
WT WT Petunia

Varbanova, M., et al. (2007). Methylation of gibberellins by Arabidopsis GAMT1 and GAMT2. Plant Cell 19: 32-45.

Modulao de GA em tecido especfico otimiza o crescimento e produo

ACTPRO::GA2OX Aumento do catabolismo de GA em toda a planta usando um promotor constitutivo afeta a produo de sementes.
GA3OXPRO::GA2OX Aumento do catabolismo de GA somente em interns produz plantas ans de arroz com alta produtividade.

Reprinted by permission from Macmillan Publishers, Ltd: Nature Biotechnology. Hedden, P. (2003) Constructing dwarf rice. Nature Biotech. 21: 873 - 874 , copyright 2003.

Liberando GAs da forma conjugada, glucosidade: ativa GA e induz crescimento

Mutantes de arroz e cevada slender1 tem uma resposta constitutiva a GA

WT sln1-1
250 200

WT

WT slr1 + GA

[GA3]150 (pg/g)
100 50 0

Arroz WT sln1

Cevada

O acmulo de GA em plantas sln muito menor que em WT, indicando que esta uma mutao na sinalizao e no um mutante de superexpresso de GA.

Rice

Fu, X., Richards, D.E., Ait-ali, T., Hynes, L.W., Ougham, H., Peng, J., and Harberd, N.P. (2002). Gibberellin-mediated proteasome-dependent degradation of the barley DELLA protein SLN1 repressor. Plant Cell 14: 3191-3200. ; Ikeda, A., et al. (2001). slender Rice, a constitutive gibberellin response mutant, is caused by a null mutation of the SLR1 gene, an ortholog of the height-regulating gene GAI/RGA/RHT/D8. Plant Cell 13: 999-1010.

GIBBERELLIN INSENSITIVE DWARF1 (GID1) codifica um receptor de GA

Improvvel mutao na biossntese, o mutante de arroz g gid1 no recuperado por GA ele insensvel a giberelina.

WT

gid1-1
Reprinted by permission from Macmillan Publishers, Ltd: NATURE. Ueguchi-Tanaka, M., et al. (2005) GIBBERELLIN INSENSITIVE DWARF1 encodes a soluble receptor for gibberellin. Nature 437: 693-698, copyright 2005.

Superexpresso do gene GID1 gera plantas hipersensveis a GA

Essas observaes so consistentes pois GID1 um receptor de GA.

Reprinted by permission from Macmillan Publishers, Ltd: NATURE. Ueguchi-Tanaka, M., et al. (2005) GIBBERELLIN INSENSITIVE DWARF1 encodes a soluble receptor for gibberellin. Nature 437: 693-698, copyright 2005.

Arabidopsis tem trs genes codificando para GID1

Mutante triplo
WT gid1a-1 gid1b-1 gid1c-1 gid1a-1 gid1b-1 gid1c-1

Como em arroz, a planta mutantGID insensvel a GA.

Mutantes simples

Griffiths, J. et al. (2006) Genetic characterization and functional analysis of the GID1 gibberellin receptors in Arabidopsis. Plant Cell18: 33993414.

A expresso do gene GID1 negativamente controlada por GA

GA reprime a expresso dos genes envolvidos em sua prpria sntese (e.g GA3ox) e resposta (e.g. GID1a,b,c); estes genes so importantes no controle feedback.

GA3ox1

GA
GID1

Resposta

Griffiths, J. et al. (2006) Genetic characterization and functional analysis of the GID1 gibberellin receptors in Arabidopsis. Plant Cell18: 33993414.

Biossntese de GA e desativao ocorrem sob forte controle

Auxina eleva a sntese de GA. Auxin Temperatura e luz regulam A3ox GAs ativos reprimem a sntese de GA e induzem a desativao de GA.

A maioria dos genes so expressos de forma clula especfica

Thomas, S.G., Phillips, A.L., and Hedden, P. (1999). Molecular cloning and functional expression of gibberellin 2- oxidases, multifunctional enzymes involved in gibberellin deactivation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96: 4698-4703 Copyright 1999 National Academy of Sciences, USA.

Paclobutrazol inibe a sntese de GA

0 M PAC 1 M PAC 5 M PAC 25 M PAC

Paclobutrazol frequentemente aplicado (spray) em plantas para interferir na sntese de GA e prevenir o crescimento de ramos (e.g. em rvores frutferas).

Plantas de Arabidopsis tratadas com diferentes concentraes de paclobutrazol (PAC).

Adapted from Rieu, I., et al. (2008). Genetic analysis reveals that C19-GA 2-Oxidation is a major gibberellin inactivation pathway in Arabidopsis. Plant Cell 20: 2420-2436.

Formao de frutos partenocrpicos

Auxinas e gibrelinas
Auxina Giberelina

GA e a altura das plantas: Vantagens x desvantagem

Giberelinas - Resumo
Mutantes na sntese de GAs so anes, e podem ou no ser afetados no desenvolvimento reprodutivo Os nveis de GAs ativos so controlados pela regulao da sntese e da desativao GA move dentro de tecidos mas os mecanismos de transporte ainda no so conhecidos

O Controle no acmulo de GAs ativos atravs de estratgias qumicas e genticas contribuiu grandemente para a produtividade agrcola