Ciclo Celular

Apoptosis, muerte celular programada.

Lic. Gustavo C. Ramos E.

Apoptosis

La apoptosis es un elemento clave en muchos procesos biolgicos, ej:

Eliminacin de membranas entre dgitos ( dedos de las manos y de los pies ) durante el desarrollo embrionario. Reabsorcin de la cola de los renacuajos durante la metamorfosis. Poda de neuronas en humanos durante los primeros meses de vida.

En humanos adultos la apoptosis ocurre de manera continua:

Cuando las clulas son infectadas por patgenos. Al final del ciclo de vida de los leucocitos. En el cuerpo humano mueren millones de clulas cada minuto.

Cuando las clulas que debera morir por apoptosis no lo hacen, las consecuencias pueden ser graves. Las mutaciones de algunas protenas que participan en la apoptosis pueden producir cncer.
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Apoptosis.

Apoptosis es un hecho normal en que una secuencia organizada de fenmenos conduce a la muerte de clulas.

Durante el desarrollo embrionario la reproduccin celular (mitosis) es mayor que la apoptosis.

En el momento que los tejidos han llegado al estado adulto de desarrollo, se logra un equilibrio entre la reproduccin celular y la apoptosis, a fin de mantener un nivel adecuado para la renovacin de los tejidos. Hay dos formas de muerte celular en el organismo:
Necrosis Apoptosis

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Necrosis celular.
Causada por agentes txicos, traumticos e hipxicos (todos patolgicos) Se observan varias clulas vecinas sometidas al mismo proceso. Por destruccin de la membrana celular escapan al exterior elementos txicos que provocan inflamacin. Material acromtico con dispersin irregular.

Apoptosis.
El proceso afecta a determinadas clulas no necesariamente contiguas y no todas de un rea tisular. La membrana celular no se destruye lo que impide el escape de su contenido. Proceso silencioso sin inflamacin.
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Citoplasma con granulacin fina. Se conservan algunos organelos, en especial las mitocondrias. A nivel nuclear la cromatina se condensa agrupada en varios sectores formando cuerpos apoptticos. Se forman cuerpos globuliformes que finalmente son fagocitadas. En clulas en cultivo dura de 30 a 60 minutos, en clulas hepticas 3 horas.

Durante el proceso de apoptosis la morfologa de la clula sufre una serie de cambios.

Se reduce el volumen total de la clula, se vuelve mas densa. La cromatina se condensa en la periferia nuclear, los nucleolos se desintegran, se reduce el volumen del ncleo. Los organelos citoplasmticos se condensa y el retculo endoplsmico se dilata. Las mitocondrias se mantienen morfolgicamente normales. Prdida de adhesin a clulas contiguas. Fragmentacin del ncleo y citoplasma, forman corpsculos pequeos rodeados de membrana (cuerpos apoptticos), fagocitados por macrfagos.
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Durante el proceso de apoptosis se producen una serie de procesos bioqumicos.

Se producen una serie de endonucleasas dependientes de Ca 2+ y Mg 2+ que cortan al ADN genmico generando fragmentos. Se produce una prdida del potencial mitocondrial. Prdida en la asimetra de la membrana, residuos de fosfatidilserina, normales en la cara interna de la membrana, aparecen tambin en la cara externa. Lo anterior permite que las clulas apoptticas sean reconocidas y fagocitadas por macrfagos.

Las clulas destinadas para la apoptosis se localizan en cualquier parte del organismo. Ejemplo:
Durante el desarrollo embrionario. Linfocitos T que se unen protenas de la superficie de clulas normales. Eliminacin de clulas con dao genmico irreparable. Se supone que participan en enfermedades neurodegenerativas, Alsheimer, Parkinson y Huntington, que se caracterizan por eliminacin de clulas esenciales que conducen a la prdida de la memoria o coordinacin motora.
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La apoptosis es importante para mantener la homeostasis en organismos multicelulares, la falta de regulacin de la apoptosis ocasiona grandes daos al organismo. Existen dos vas de induccin de la apoptosis:
Va extrnseca, una seal externa interacciona con una serie de receptores de muerte de la membrana celular como el factor de necrosis tumoral (TNF o TRAIL). Va intrnseca o mitocondrial, activada por estrs (radiaciones) o agentes genotxicos (drogas, toxinas, etc.)

El proceso de apoptosis, comprende cuatro fases :

Primera fase: Accin de los estmulos externos o internos sobre la clula. Segunda fase: Comprende la deteccin y transduccin de las seales a la maquinaria efectora de la muerte celular. Tercera fase: Es la fase efectora en la que estn implicadas proteasas que activan la apoptoisis, as como reguladores positivos y negativos. Cuarta y ltima fase: Fase post-mortem en la que se produce la condensacin de la cromatina y degradacin del ADN
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Va intrnseca de la apoptosis. La va intrnseca de la apoptosis se desencadena por estmulos internos:

Dao gentico irreparable. Concentraciones demasiado elevadas de Ca 2+ en el citosol Estrs oxidativo grave, produccin de gran cantidad de radicales libres destructivos. Falta de seales de supervivencia, ausencia de factores de crecimiento.

Miembros de la familia Bcl-2 de protenas regulan la activacin de la va intrnseca.

Los integrantes de la familia Bcl-2 pueden dividirse en dos grupos
Miembros proapoptticos, promueven apoptosis , Ej: Bad y Bax Miembros antiapoptticos, protegen a la clula de la apoptosis, Ej: Bcl-xl, Bcl-w, y Bcl-2, que acta como oncogn mediante la promocin de la supervivencia de clulas cancerosas
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Va intrnseca.
Estmulos estresantes activan ciertos miembros proapoptticos de la familia Bcl-2 (Bax), que se traslada del citosol a la membrana mitocondrial externa.
Aumento de la permeabilidad de la membrana mitocondrial, Liberacin de protenas mitocondriales, en especial citocromo c., que se encuentra en el espacio intermembranoso. Bax y otras protenas forman un canal recubierto de protena en la membrana mitocondrial. Protenas antiapoptticas, como Bcl-2 inhiben la liberacin de citocromo c y otras protenas mitocondriales proapoptticas que provocan muerte celular. El citocromo c forma parte del complejo multiproteico llamado apoptosoma, que tambin incluye a la procaspasa 9. La procaspasa se activa con la unin del complejo multiproteco
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APOPTOSIS Citocromo C Dao celular interno Activacin de Bad o Bax Bax

Fact. Citoplasmticos, + Por Ej: Apaf-1

Procaspasa 9 Complejo caspasa 9 Iniciadora activado (apoptosoma)

Procaspasas ejecutoras

Caspasa ejecutora

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En los procariontes, hongos y plantas verdes, no existe apoptsis ni caspasas. Cuando la clulas ejecutan el programa de apoptosis, pierden el contacto con sus vecinas y empiezan a encogerse. Como existen seales que destinan a la clula a la autodestruccin, tambin hay seales opuestas que mantienen la supervivencia celular.

La interaccin del TNF con un receptor para TNF puede transmitir seales distintas y contrarias al interior celular, una estimula la apotosis y la otra promueve la supervivencia celular.
La supervivencia celular esta mediada por la activacin de un factor de transcripcin clave llamado NF-kB, que media la expresin de genes que codifican protena para la supervivencia celular Parece que el destino de la clula, ya sea la supervivencia o la muerte dependen del equilibrio entre las seales que fomentan y las que impiden la apoptosis
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La informacin sobre la base molecular de la apoptosis se revel por primera vez en estudios con el gusano nemtodo C. elegans, donde se identifico al gen CED-3. Posteriormente se descubri su homlogo en los mamferos y se le llam caspasa-3. Las caspasas son proteasas de cistena que se activan en una etapa temprana de la apoptosis y desencadenan la mayora de los cambios observados durante la muerte celular Se identific una familia de protenas denominadas caspasas (CisteinaAspartato-Proteasas), se han descrito 12 miembros en humanos. La caspasa-1 fue identificada como regulador de la respuesta inflamatoria, al menos, 8 de las 12 han sido implicadas en la apoptosis.
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Entre las clulas blanco de las caspasas figuran:

Mas de una docena de cinasas de protena (FAK), PKB, PKC, Raf 1). La inactivacin de las FAK interrumpe la adhesin celular, las clulas apoptticas se desprenden de sus vecinas. Lminas. Proteinas que constituyen el recubrimiento interno de la envoltura nuclear. Conduce al desensamble de la lmina nuclear, encogimiento del ncleo. Protenas del citoesqueleto. Filamentos intermedios, actina, tubulina, gelsolina. La divisin y desactivacin de estas protenas conduce a cambios en la forma celular. Endonucleasa (ADN-asa) activada por caspasa (CAD), se activa despus que la caspasa divide una protena inhibidora , una vez activada la CAD se traslada al ncleo donde ataca al ADN dividindolo en fragmentos
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Las caspasas se sintetizan como proenzimas (zimgenos, procaspasas), con tres dominios.
Dominio N-terminal Sub-unidad grande Sub-unidad pequea , dominio C-terminal.

Para ser activadas deben proteolizarse en dos fases

1. Divide la subunidad grande y la pequea 2. Elimina el dominio N-terminal

Heterotetrmero activo. Va extrinseca de la apoptosis.

Estmulo para la apoptosis, protena mensajera extracelular TNF. Se produce en ciertas clulas del sist. Inmunitario como respuesta a la exposicin de

Radiaciones Ionizantes, Temperaturas elevadas, Infeccin viral Sustancias Txicas.

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El TNF se une a un receptor transmembranoso TNFR1 (receptores de muerte) que se encuentra en la membrana Plasmtica. Cada receptor para TNF contiene un dominio citoplasmtico de 70 aminocidos (dominio de muerte) El receptor activado se une a dos protenas adaptadoras citoplsmicas (TRADD y FADD) y dos procaspasa 8 para formar un complejo multiproteico en la superficie interna de la membrana Plasmtica. Dos molculas de caspasa 8 se dividen para formar una molcula activa de caspasa 8, caspasa iniciadora. Se activan las procaspasas ejecutoras para finalmente dar origen a las caspasas ejecutoras que producen la muerte celular (caspasa 3).
30/12/2012 FADD TNF TNFRI

Mem. Plasm Dom. De muerte.

TRADO

PROCASPASA 8

CASP. 8 INICIADORA

PROCASP. EJECUTORAS CASPASA EJECUTORA APOPTOSIS

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La activacin de las caspasas es fundamental para el proceso de muerte celular por apoptosis. Existen tres tipos de caspasas
Caspasas inflamatorias, participan en procesos de activacin de citoquinasas, caspasas-1, -4, -5 y -14. Caspasas iniciadoras, son activadas en respuestas a seales de stress o dao celular o cuando recibe una seal que debe morir, Caspasas-8, -9, -10 y -12 Caspasas efectoras o ejecutoras, son proteolizantes y activadas por las caspasas iniciadoras, responsables de la protelisis de sustratos que producirn cambio morfolgico en la clula. Caspas-3, -6 y -7 La principal es la caspasa-3, responsable de la condensacin de la cromatina, fragmentacin del ADN y formacin de los cuerpos apoptticos.

Las caspasas participan tanto de la va extrnseca como intrnseca

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