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CONTROL DE CALIDAD DE MEDICAMENTOS CON EL USO DEL MINILAB

Bogot, Febrero de 2011

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

OBJETIVOS

a) Conocer la tcnica de cromatografa en capa fina (c.c.f.), sus caractersticas y los factores que en ella intervienen. b) Calcular valores de R.F. de varias sustancias y correlacionarlo a la seleccin adecuada del eluyente y deducir la relacin que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados. c) Aplicar la tcnica de c.c.f. como criterio de pureza e identificacin.

ANTECEDENTES
a) Concepto de cromatografa. Tipos de cromatografa. Cromatografa de adsorcin y cromatografa de particin. b) La cromatografa en capa fina. Sus caractersticas y aplicaciones. c) Eluyentes, soportes y reveladores ms comunes para cromatografa en capa fina. d) Factores que influyen en una separacin por cromatografa de capa fina.

CONCEPTO DE CROMATOGRAFIA

La cromatografa se define como la separacin de una mezcla de dos o ms compuestos por distribucin entre dos fases: Una es estacionaria. Otra una fase mvil.

CONCEPTO DE CROMATOGRAFIA
Varios tipos de cromatografa son posibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas: Slido-lquido (capa fina, papel o columna) Lquido-lquido Gas-lquido.

CONCEPTO DE CROMATOGRAFIA
Todas las tcnicas cromatografas dependen de la distribucin de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: Una fase mvil. Otra fase estacionaria.

La fase mvil puede ser un lquido o un gas y la fase estacionaria puede ser un slido o un lquido.

CONCEPTO DE CROMATOGRAFIA
Todos los slidos finamente pulverizados tienen el poder de adsorber en mayor o menor grado otras sustancias sobre su superficie; y, similarmente, todas las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con ms fuerza que otras. Este fenmeno de adsorcin selectiva es el principio fundamental de la cromatografa.

CONCEPTO DE R.F.
RF (Ratio of Front) es una manera de expresar la posicin de un compuesto. Se define como: Distancia que recorre la muestra desde el punto de aplicacin / distancia que recorre el eluyente.

CONCEPTO DE R.F.
El valor de RF depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra (tipo de adsorbente, eluyente, as como las condiciones de la placa, temperatura, vapor de saturacin, etc.) Tiene una reproducibilidad de + 20%, por lo que es mejor correr duplicados de la misma placa.

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA


Utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeo espesor constante a lo largo de la placa.

El eluyente ascender, por capilaridad, por la placa y arrastrar los componentes a lo largo de sta produciendo manchas de los componentes.

Eluyentes ms comunes para cromatografa en capa fina


Eter de petrleo Tolueno Dietil-ter Terbutil-ter Diclorometano Acetato de etilo N-pentano N-hexano Ciclohexano Tetracloruro de carbono Cloroformo Acetona Iso-propanol Etanol Metanol Acido actico

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA


Se usan lminas de: vidrio como soporte del adsorbente, plstico metlicos. Hay placas con indicador de fluorescencia, para facilitar la identificacin de las muestras. Si no se usa indicador y los componentes no son coloridos se requerirn tcnicas de revelado.

REVELADORES MS COMUNES EN CCF


A simple vista para las sustancias de color. Luz UV para las sustancias incoloras, si la sustancia absorbe luz ultravioleta (254nm 366nm longitud de onda de excitacin).

Vapores de yodo.
Roco con solucin de agua/H2SO4 1:1 (dentro

de un compartimiento protegido y bajo campana de extraccin de gases.


Bao de MeOH/H2SO4 19:1 y calentar.

ADSORBENTES MS COMUNES EN CCF


Silica gel (se utiliza en el 80% de las separaciones) Oxido de aluminio Almina (cida, neutra bsica). Celulosa. Poliamidas (Nylon).

SELECCIN DEL ADSORBENTE


Tomar las siguientes consideraciones: Polaridad Tamao de partcula Dimetro rea superficial Homogeneidad

FACTORES QUE INFLUYEN EN LA SEPARACIN


Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben ms en la fase estacionaria. Corrientes de aire. Limpieza de las placas (grasa o agentes plastificantes o adhesivos) Limpiar con una mezcla de cloroformo y metanol y despus dejar secar. Pureza de los disolventes: Los disolventes deben ser puros para evitar cualquier interferencia.

TALLER DE CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

MUESTRA: TABLETAS CLOROQUINA


Composicin: Cloroquina fosfato 250 mg equivalente a cloroquina base 150 mg.

PREPARACION DEL ESTNDAR


Estndar 100% Estndar 80%

Solucin madre del estndar

PREPARACION DE LA MUESTRA
Moler

Disolver

Solucin muestra

SOLUCIONES DE TRABAJO

Estndar 100%

Estndar 80%

Muestra

PREPARACION DE LA PLACA

1,5 cm

rea de identificacin de los puntos de sembrado

Punto de sembrado

APLICACIN DE LA MUESTRA

Perpendicular a la placa

Punto circular

REVELADO

Placa cromatografica

Papel filtro

DETECCION

Ultravioleta

Visible

DETECCION

Yodo

PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO

REPORTE DE RESULTADOS

REPORTE DE RESULTADOS

GPHF-MINILAB

QUE ES EL MINILAB?
Es un sistema de control de calidad para medicamentos, econmico y de fcil uso, que permite la deteccin e identificacin de principios activos por medio de tcnicas confiables avaladas por la farmacopea norteamericana.

NECESIDAD
Falsificacin de productos farmacuticos. Proliferacin de medicamentos de baja calidad.

FUNCIONALIDAD
Contiene todo el material y reactivos necesarios para realizar test colorimtricos y cromatogrficos rpidos que demuestran la calidad de los medicamentos, as como manuales gua con protocolos para la realizacin de estos anlisis e interpretacin de sus resultados.

CONTENIDO

CONTENIDO
Calibrador pie de rey

CONTENIDO

PROCEDIMIENTOS INDIVIDUALES DE ENSAYO


Inspeccin visual

PROCEDIMIENTOS INDIVIDUALES DE ENSAYO


Pruebas Bsicas

Desintegracin: proceso fsico necesario para la disolucin Cromatografa en Capa Delgada (TLC): Identificacin del Ingrediente Farmacutico Activo Presencia de Impurezas Evaluacin semicuantitiva del contenido (rango del 20%)

PROCEDIMIENTOS INDIVIDUALES DE ENSAYO


Importancia de las Pruebas Bsicas

Capacidad de Identificar Medicamentos Sub-estndar y Falsificados Fcil de: Usar Interpretar Capacidad de Analizar: Varias Muestras Simultneamente Resultados Reproducibles Bajo Costo

EFECTIVIDAD DE LAS PRUEBAS BASICAS


Porcentaje de no conformidades en 325 muestras de un total de 771 medicamentos sub-estndar provenientes de una base de datos de la OMS recopilada entre 1982-1990, que incluye antibiticos, antimalaricos y antituberculosos de varios pases.
Ingrediente Incorrecto

16%
Contenido Incorrecto

17%
60% 7%

Ms del 76% de medicamentos no-conformes podran haber sido identificados por una prueba bsica de CCD

Ingrediente Correcto No Contiene IPA

MUESTREO
MUESTREO INICIAL (PRUEBAS BASICAS) Nmero mnimo de unidades 20 Nmero mximo de unidades 40 Comentarios

Si no fuera posible recolectar el mnimo de 20 unidades, se debe recolectar la cantidad disponible, pero no menos de 5 unidades.

MUESTREO ADICIONAL (PRUEBAS COMPENDIALES) Nmero mnimo de unidades 50 Nmero mximo de unidades 100 Comentarios

Si no fuera posible recolectar el mnimo de 50 unidades, estudiar cada caso. Ej. Inspeccin fsica/Visual: 10 tab, Ident.ificacin: 5 tab. , Valoracin: 20 tab., Disolucin: 24 tab.

CONCLUSIONES

El enfoque de pruebas bsicas permite de un modo: - Eficiente - Oportuno - Rpido Identificar medicamentos de mala calidad: En diferentes etapas de la cadena de suministro Expandiendo el alcance de las actividades de control de calidad