EL MICROSCOPIO

MICROSCOPA

MICROSCOPA- Historia

El uso del microscopio se extendi durante el siglo XVII entre algunos naturalistas europeos, los denominados microscopistas, que realizaron el descubrimiento de numerosas criaturas vivientes minsculas y detalles anatmicos desconocidos hasta entonces. El ingls R.Hooke (1635-1703) fue quien, observando al microscopio una fina lmina de corcho y viendo lo que en realidad eran paredes vacas de las clulas muertas que constituyen aquel tejido, propuso el nombre de clula (celda pequea).

MICROSCOPA- HistoriaAntonio Van Leeuwenhoek (1632-1723)

Naturalista holands llamada "El primer Cazador de Microbios" y el "Padre de la Bacteriologa". Tendero en msterdam, se dedico por aficin a pulir lentes y logr fabricar un microscopio. Construyo hasta 250 microscopios y en lugar de venderlos los regalo a sociedades cientficas. Aunque careca de preparacin cientfica era un agudo observador de lo que vea bajo el microscopio y comunicaba sus observaciones a la Real Sociedad de Londres, de la que fue nombrado miembro en 1680. Su invento y sus observaciones propiciaron un gran avance cientfico.

MICROSCOPA- HistoriaAlgunos descubrimientos en la historia de la microscopa ptica 1611 1655 Kepler sugiri la manera de construr un microscopio compuesto. Hooke utiliz un microscopio compuesto para describir unas pequeas celdillas en los cortes de corcho a las que denomin "clulas". Leeuwenhoek inform sobre su descubrimiento de protozoos. Nueve aos ms tarde observ por primera vez bacterias. Brown public sus observaciones microscpicas de las orqudeas y describi claramente el ncleo celular.

1674

1833

1838
1857 1876

Schleiden y Schwann propusieron la teora celular, afirmando que la clula nucleada es la unidad estructural y funcional de las plantas y los animales.
Kolliker describi las mitocondrias de las clulas musculares. Abb analiz los efectos de la difraccin en la formacin de la imagen en el microscopio y mostr la manera de optimizar el dieseo de los microscopios. Flemming describi con gran claridad el comportamiento de los cromosomas durante la mitosis de las clulas animales. Retzius describi muchos tejidos animales con una precisin que an no ha sido superada por ningn especialista en microscopa ptica. En las dos dcadas siguientes, tanto l como Cajal y otros histlogos, disearon mtodos de tincin y establecieron las bases de la anatoma microscpica.

1879

1881

MICROSCOPA- Historia1882 Koch utiliz colorantes de anilina para teir microorganismos e identific las bacterias que causan la tuberculosis y el clera. Zeiss hizo una serie de lentes, siguiendo las leyes de Abb, que permitieron a los especialistas en microscopa la resolucin de estructuras situadas en los lmites tericos de la luz visible. Golgi observ por primera vez el aparato llamado "de Golgi", impregnando clulas con nitrato de plata. Klebs y Pasteur, identificaron los agentes causantes de otras muchas enfermedades examinando al microscopio preparaciones teidas. Lebedeff dise y construy el primer microscopio de contraste interferencial. Zernicke invent el microscopio de contraste de fases. Estos dos adelantos permitieron observar por primera vez clulas clulas vivas no teidas en detalle. 1886

1898 1924

1930 1932

1941
1952

Coons utiliz anticuerpos acoplados a colorantes fluorescentes para detectar antgenos celulares.
Nomarski ide y patent el sistema de contraste interferencial para el microscopio ptico., que an lleva su nombre.

1981

Allen e Inou perfeccionaron la microscopa ptica de contraste video-amplificada.

MICROSCOPA- HistoriaModelos de microscopios Italianos del siglo XVII como los que utiliz

PERFECCIONAMIENTO DEL MICROSCOPIO

Marcello Malpighi.

Microscopio diseado por Leeuwenhoek y como

se utiliza
Microscopio utilizado por Hooke en 1655

Microscopio acromtico diseado y utilizado por Lister en 1820

MICROSCOPA- HistoriaPERFECCIONAMIENTO DEL MICROSCOPIO

Desde 1660 hasta la actualidad el microscopio ptico ha sido el pilar fundamental en el conocimiento de lo invisible. Aunque su poder de resolucin aument travs del tiempo (con la mejora en la calidad de las lentes) al igual que el poder de magnificacin, su factor limitante fue la longitud de onda de la luz. En 1930 el mundo submicroscpico se ampli con la aparicin del microscopio electrnico cuya ventaja principal con respecto al microscopio ptico es un aumento de 1000 veces en la magnificacin del material observado acompaado de una mayor capacidad de resolucin generando una mejor definicin y una ampliacin del mundo microscpico (virus y pequeas organelas fueron observadas por primera vez con este microscopio).

MICROSCOPA- Microscopio ptico

El microscopio ptico tiene un limite resolucin de cerca de 200 nm (0.2 m ). Este limite se debe a la longitud de onda de la luz (0.4-0.7 m ). Las clulas observadas bajo el microscopio ptico pueden estar vivas o fijadas y teidas.

MICROSCOPA- Microscopio
electrnico

Tiene un limite de resolucin de cerca de 2 nm.

Un MET mira clulas muertas , despus de haber sido fijadas y teidas con iones de metales pesados. Los electrones son dispersados cuando pasan a travs de una fina seccin del espcimen, y luego detectados y proyectados hacia una imagen sobre una pantalla fluorescente.

MICROSCOPA- Microscopio Electrnico de Barrido

El microscopio electrnico de barrido (MEB) tambin tiene un limite de 2nm. El MEB permite mirar a clulas muertas, despus de haber sido fijadas y teidas con iones de metales pesados. Con esta tcnica los electrones son reflectados sobre la superficie del espcimen.

MICROSCOPA - Partes del Microscopio -

El equipamiento adicional de un microscopio consta de un armazn con un soporte que sostiene el material examinado y de un mecanismo que permite acercar y alejar el tubo para enfocar la muestra. Los especimenes o muestras que se examinan con un microscopio son transparentes y se observan con una luz que los atraviesa, y se suelen colocar sobre un porta objetos. El soporte tiene un orificio por el que pasa la luz. Bajo el soporte se encuentra una fuente de luz elctrica que dirige la luz a travs de la muestra.

MICROSCOPA -Partes del Microscopio

Sistema ptico

OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen del objetivo. OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta. CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin. DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador. FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

Sistema mecnico

SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo. PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin. CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular, .. REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos. TORNILLOS DE ENFOQUE: Macromtrico que aproxima el enfoque y micromtrico que consigue el enfoque correcto.

MICROSCOPA- Microscopia ptica

Clula de Pisum, coloracin: safranina-fastgreen

Traqueidas del leo de Pinus Coloracin: safranina

El material a observar se colorea con colorantes especficos que aumentan el contraste y revelan detalles que no aprecian de otra manera

MICROSCOPA- Microscopa de campo brillante

el material se observa sin coloracin. La luz pasa directamente y se aprecian detalles que estn naturalmente coloreados.

MICROSCOPA- Microscopa de campo oscuro

Leptospira

Utiliza una luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espcimen. El campo de visin del objetivo se encuentra en la zona hueca del cono de luz y slo recoge la luz que se refleja en el objeto. Por ello las porciones claras del espcimen aparecen como un fondo oscuro y los objetos minsculos que se estn analizando aparecen como una luz brillante sobre el fondo. Esta forma de iluminacin se utiliza para analizar elementos biolgicos transparentes, invisibles con iluminacin normal.

MICROSCOPA- Microscopa de contraste de fase

Se usa principalmente para aumentar el contraste entre las partes claras y oscuras de las clulas sin colorear. Es ideal para especimenes delgados, o clulas aisladas. El microscopio de fase ilumina el espcimen con un cono hueco de luz, como en el microscopio en campo oscuro. Sin embargo en el microscopio de fase el cono de luz es ms estrecho y entra en el campo de visin del objetivo, que contiene un dispositivo en forma de anillo que reduce la intensidad de la luz y provoca un cambio de fase de un cuarto de la longitud de onda. Este tipo de iluminacin provoca variaciones minsculas en el ndice de refraccin de un espcimen transparente, hacindolo visible. Este tipo de microscopio es muy til a la hora de examinar tejidos vivos, por lo que se utiliza con frecuencia en biologa y medicina

Celulas epiteliales

MICROSCOPA- Microscopa diferencial de contraste

Celulas epiteliales

Utiliza dos rayos de luz polarizada y las imgenes combinadas aparecen como si la clula estuviera proyectando sombras hacia un lado. Fue diseado para observar relieves de especimenes muy difciles de manejar, es muy utilizado en los tratamientos de fertilizacin in-vitro actuales. DIC se usa cuando el espcimen es muy grueso para usar contraste de fases.

MICROSCOPA- Microscopa de fluorescencia

una sustancia natural en las clulas o un colorante fluorescente aplicado al corte es estimulado por un haz de luz, emitiendo parte de la energa absorbida como rayas luminosos: esto se conoce como fluorescencia. La luz fluorescente de mayor longitud de onda se observa como si viniera directamente del colorante.