Avaliao da atividade celuloltica de agentes de controle biolgico

Miriam Fumiko Fujinawa , Zayame Vegette Pinto , Elke Simoni Dias Vilela , Luana Piermann

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1UNESP/FCAV,Via

de acesso Prof. Paulo Donato Castelanne, 14884-900, Jaboticabal - SP; 2 Embrapa Meio Ambiente CNPMA, CP 69 Laboratrio de Microbiologia Ambiental, 13820-000, Jaguarina-SP.* Bolsistas do CNPq

INTRODUO A celulose o recurso natural mais abundante do planeta por ser o principal componente dos vegetais. Pode ser uma importante fonte de carbono orgnico, mas requer a ao de enzimas que auxiliam na sua degradao uma vez que tem baixa digestibilidade por ser um polmero de cadeia longa, formado por 8000-12000 cadeias de glicose, unidas entre si por ligaes glicosdicas -1,4, alm das celuloses serem unidas entre si por pontes de hidrognio, formando as fibrilas (Tengerdy & Szakacs, 2003). As celulases so enzimas que possuem capacidade de romper as ligaes glicosdicas de microfibrilas da celulose, sendo assim agentes de controle biolgico que possuem capacidade da degradao da celulose podem propiciar a sua sobrevivncia e persistncia no ambiente, aumentando o efeito de biocontrole. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade celuloltica dos principais agentes de controle biolgico estudados no Laboratrio de Microbiologia Ambiental da Embrapa Meio Ambiente. MATERIAL E MTODOS Os agentes de controle biolgico: Bacillus licheniformis (Q11Bl), Bacillus subtilis (Q11Bs e AP3), Clonostachys rosea (LQC60 e LQC62), Lecanicillium lecanii (CM50, Q20 e AND52), Trichoderma sp. (LQC96), foram colocados em meio contendo carboximetilcelulose (CMCNaNO3: 0,5g; K2HPO4: 1,0g; MgSO4. 7H2O: 0,5g; FeSO4.7H2O: 0,01g; extrato de levedura: 1,0g; CMC: 10g e Agar: 15g/1L). Aps 48h de oC, adicionou-se a soluo de crescimento 20 vermelho de Congo (0,01g /mL) o suficiente para cobrir toda placa. Aps 15 minutos, efetuou-se a lavagem com soluo de NaCl 1M e avaliaramse os halos formados pelo aparecimento de uma zona clara ao redor das colnias, em contraste com o corante vermelho Congo. O teste foi realizado com trs repeties e quadruplicata por placa. A anlise estatstica foi realizada no programa SASM. Onde realizou a anlise de varincia e o teste de mdias realizadas pelo teste Scott-Knott com 5% de probabilidade.

RESULTADOS Tabela 1. Resultado da atividade celuloltica de agentes de controle biolgico. Agente de controle biolgico Cdigo
Bacillus licheniformis Clonostachys rosea Bacillus subtilis Clonostachys rosea Lecanicillium lecanii Bacillus subtilis Trichoderma sp. Lecanicillium lecanii Lecanicillium lecanii
* Scott-Knott (5%)

Halo (cm)
2,57 a* 2,53 a 2,53 a 2,47 a 2,22 b 0,00 c 0,00 c 0,00 c 0,00 c

Q 11 Bl LQC 62 Q 11 Bs LQC 60 CM50 AP3 LQ96C Q 20 AND 52

Figura 1.: Formao de halo referente a atividade celuloltica do Bacillus subtilis e Clonostachys rosea.

CONCLUSO Os isolados Q11Bl, LQC60, LCQ62, Q11Bs e CM50 apresentaram atividade celuloltica devendo possuir um potencial de biocontrole maior. No houve formao de halo nos demais isolados testados, concluindo que estes, possuem pouca ou nenhuma atividade celuloltica.