ADN

Estructura y función

Miescher Descubre el ADN
• 1868

• Johann Miescher investiga la composición química del núcleo
• Aisló un ácido orgánico rico en fósforo • El lo llamo nucleína • Nosotros lo llamamos ADN o ácido desoxirribonucleico

Misterio del material herediatario
• Originalmente se pensaba que era una clase de proteína • Razones:
– Las características heredables son diversas – Estas moléculas codifican para características que son diferentes – Las proteínas pueden estar compuestas de 20 aminoácidos, además de que son estructuralmente diversas

Watson & Crick proponen que el ADN es una doble hélice .Estructura del Material Hereditario • Experimentos en 1950 mostraron que el ADN es el material hereditario • Los científicos tratan de determinar su estructura • 1953 .

Guanina. Citosina . Timina.Estructura de Nucleótidos en el ADN • Cada nucleótido consiste de: – Desoxirribosa (azúcar en el carbono 5' ) – Un grupo fosfato – Una base con un grupo nitrogenado • Hay cuatro bases – Adenina.

Bases Nucleotídicas adenina (A) Base con una estructura de doble anillo Azúcar (desoxirribosa) timina (T) Una base con una estructura de un solo anillo guanina (G) Una base con una estructura de un doble anillo citosina (C) Una base con una estructura de un solo anillo .

Composición del ADN • Chargaff encontró que: – El promedio relativo de Adenina y Guanina difiere entre las especies – El promedio de Adenina es siempre igual al promedio de Timina y el promedio de Guanina igual al de Citosina A=T y G=C .

Regla de Chargaff (1949):
L a RELACIÓN 1:1 DE PURINAS (A y G) Y PIRIMIDINAS (C y T) se mantiene CONSTANTE Composición del DNA en pares de bases: Especie Hombre Micobacteria Erizo de mar Adenina 30.3 15.1 32.8 Timina 30.3 14.6 32.1 Guanina 19.5 34.9 17.7 Citosina 19.9 35.4 18.4

Trabajo de Rosalind Franklin
• Fue experta en cristalografía de rayos x • Usó esta técnica para examinar las cadenas de ADN • Concluyó que el ADN es una doble hélice

Trabajo de Rosalind Franklin

Fotografía de difracción de rayos X Estructura de la fibra de DNA es helicoidal

Año culminante: Dos líneas de evidencia: •Reglas de Chargaff •Fotografías de difracción de rayos X .1953.

1953. Año culminante: Watson y yo hemos encontrado el secreto de la vida Eagle Pub .

Crick resuelven la estructura tridimensional del DNA (Nature 171: 737-738) Primer boceto de Crick sobre la estructura del DNA .J. Watson y F.

Modelo de Watson-Crick • El ADN consiste en dos cadenas de nucleótidos • Las cadenas corren en direcciones opuestas • Estas cadenas se unen entre sí por enlaces de hidrógeno entre las bases • A se une a T y C con G • La molécula es una doble hélice .

formada por cadenas orientadas en direcciones opuestas (antiparalelas).La estructura se mantiene gracias a enlaces de hidrógeno entre las bases nitrogenadas que se encuentran orientadas hacia el interior de las cadenas Doble hélice. .

El patrón del apareamiento de bases (A solo con T.Modelo de Watson-Crick El modelo de Watson–Crick para la estructura del ADN es consistente con los datos bioquímicos y la difracción de rayos x. . y G = C). y G solo con C) es consistente con la conocida composición del ADN (A = T.

Wilkins. . Stokes y Wilson (acidos nucleicos formados por desoxipentosas) 3..Franklin y Gosling (configuración molecular de la sal de DNA).Watson y Crick (sobre estructura del DNA) 2..Abril 1953 = revista Nature publica 3 artículos científicos sobre el DNA: 1..

Premio Nobel de Medicina 1962 Maurice Wilkins Francis Crick James Watson .

*Bases hacia adentro. *Fosfato y desoxiribosa hacia afuera.Estructura del DNA *Doble hélice *Complementación de bases. *Cadenas antiparalelas .

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ASPECTOS A RESALTAR DE LA ESTRUCTURA DEL DNA: *FORMADO POR UNION DE NUCLEOTIDOS DE FORMA REPETITIVA: POLIMERO *NUCLEOTIDOS: TRES COMPONENTES = FOSFATO. DESOXIRIBOSA Y BASE NITROGENADA *COMPLEMENTARIEDAD DE BASES => ENLACES DE HIDROGENO ENTRE: TIMINA = ADENINA CITOSINA ≡ GUANINA .

Y SON ANTIPARALELAS *BASES NITROGENADAS: EN EL INTERIOR DE LA MOLECULA *GRUPOS FOSFATO: PARTE EXTERNA DE LA MOLECULA .*CADA CADENA PRESENTA UNA POLARIDAD.

Funciones del DNA: •Almacenar la información genética (secuencia de bases → genes) . •Codificar para proteínas y RNAs (código genético) •Transmitir esa información correctamente (mecanismo eficiente de replicación del DNA) .....AATCGGCATTAACGAAGTCCATGACT.

Esencial a la relación íntima entre estructura molecular y función genética del DNA es el concepto de molde La complementariedad de las bases nitrogenadas permite que la secuencia de una cadena sencilla de DNA actúe como un molde para la formación de una copia complementaria de DNA (replicación) o de mRNA (transcripción) .

25 de Abril 1953 It has not escaped our notice that the specific pairing we have postulated immediately suggests a possible copying mechanism for the genetic material. .

La estructura del ADN ayuda a explicar como se duplica • El ADN son dos cadenas de nucleótidos unidas entre sí por enlaces de hidrógeno • Los enlaces de hidrógeno entre las dos cadenas se rompen muy fácil • Cada cadena original sirve como molde para una nueva cadena .

Replicación del ADN  Cada cadena molde permanece intacta molécula de  Cada ADN es la mitad “vieja” y la otra mitad “nueva” .

mitad-nueva del ADN es idéntica a la molécula original . Cada molécula mitadvieja.a Una molécula de ADN con las dos cadenas de pares de bases complementarias b Inicio de la replicación. las dos cadenas de la doble hélice se desenrrollan y se separan en un sitio específico de la molécula c Cada cadena “vieja” se utiliza como molde para la unión de nuevas bases. de acuerdo a las reglas del apareamiento d Las bases colocadas en cada cadena vieja se ensamblan juntas como una cadena "nueva".

Tema 6: Estructura y replicación del material genético 30 .

Enzimas en la Replicación • Hay enzimas que desdoblan las dos cadenas • La ADN polimerasa une los nucleótidos complementarios • La ADN ligasa repara los “huecos” • Hay enzimas que unen las dos bandas .

Tema 6: Estructura y replicación del material genético 32 .

REPLICACIÓN • Reproducción exacta • Base molecular de la transmisión de la vida • Semiconservativa • Requiere varias enzimas 1° Apertura de doble hélice 2° Horquilla de replicación (Replicación bidireccional y aimétrica) • En eucariotas no se conocen con exactitud las enzimas que intervienen • Diferencias entre procariotas y eucariotas Longitud del cromosoma Empaquetamiento ADN .

coli) por proteínas iniciadoras. Varios orígenes en eucariotas •La replicación es bidireccional Horquilla replicación Tema 6: Estructura y replicación del material genético 34 .Replicación del DNA •Origen de replicación: •Secuencia reconocida (Ori C en E.

Cada unidad de replicación es un replicón. La replicación es bidireccional Tema 6: Estructura y replicación del material genético 35 .En el DNA nuclear de eucariotas hay muchos orígenes de replicación (~500 en levaduras y 60000 en mamíferos).

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Tipos de RNA • RNA mensajero (RNAm) • RNA de transferencia (RNAt) • RNA ribosomal (RNAr) .

la que tiene el promotor 3° la transcripción finaliza con secuencia o señal específica de terminación 4° ARN pol se desprende y se restablece la doble hélice .TRANSCRIPCIÓN o SÍNTESIS DE ARN MENSAJERO Síntesis de ARN tomando ADN como molde Similar a la replicación ARN pol cataliza la reacción 1° Reconoce y se une a secuencia específica del ADN = promotor 2° La hélice se desenrolla y sólo se transcribe una cadena.

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Transcripción: Iniciación: Una ARN-polimerasa comienza la síntesis del precursor del ARN a partir de unas señales de iniciación "secuencias de consenso " que se encuentran en el ADN. ARNpolimerasa T A C A U G G A A C C U U C G G T T G G C A A C A C A T C C G U G .

Alargamiento: La síntesis de la cadena continúa en dirección 5'3'. ARNpolimerasa T A C A U G G A A C C U U C G G T T G G C A A C A C A T C C G U G m-GTP . Después de 30 nucleótidos se le añade al ARN una cabeza (caperuza o líder) de metil-GTP en el extremo 5„ con función protectora.

llamado ahora ARNm precursor. y el ARN. una poliA-polimerasa añade una serie de nucleótidos con adenina. se libera. la cola poliA.Finalización: Una vez que la enzima (ARN polimerasa) llega a la región terminadora del gen finaliza la síntesis del ARN. poliA-polimerasa m-GTP A U G C U C G U G U A G A A A A A ARNm precursor . Entonces.

SINTESIS DE PROTEINAS: TRADUCCIÓN .

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Iniciación: La subunidad pequeña del ribosoma se une a la región líder del ARNm y el ARNm se desplaza hasta llegar al codón AUG. Subunidad menor del ribosoma 5’ P A C GA UAG AAAAAAAAAAA 3’ A U G C AA U G C U U A UAC Codón Anticodón ARNt ARNm 1er aminoácido . que codifica el principio de la proteína. Se les une entonces el complejo formado por el ARNt-metionina (Met). La unión se produce entre el codón del ARNm y el anticodón del ARNt que transporta la metionina (Met).

Subunidad menor del ribosoma P A 5’ A U G C AA U G C U U A UAC G U U C GA UAG AAAAAAAAAAA 3’ . La región del ribosoma a la que se une el complejo ARNt-Gln se le llama región aminoacil (A). El complejo ARNt-aminoácido2 . la glutamima (Gln) [ARNt-Gln] se sitúa enfrente del codón correspondiente (CAA).Elongación: A continuación se une la subunidad mayor a la menor completándose el ribosoma.

la glutamina (Gln). P 5’ A ARNm AAAAAAAAAAA 3’ A U G C AA U G C U U A UAC G U U C GA UAG .Elongación: Se forma el enlace peptídico entre el grupo carboxilo de la metionina (Met) y el grupo amino del segundo aminoácido.

P 5’ A ARNm AAAAAAAAAAA 3’ A U G C AA U G C U U A GUU C GA UAG .Elongación: El ARNt del primer aminoácido. la metionina (Met) se libera.

quedando ahora la región aminoacil (A) libre para la entrada del complejo ARNt-aa3 P A ARNm 5’ A U G C AA U G C U U A GUU C GA UAG AAAAAAAAAAA 3’ .Elongación: El ARNm se traslada. de tal manera que el complejo ARNt-GlnMet queda en la región peptidil del ribosoma.

P 5’ A ARNm C GA UAG AAAAAAAAAAA 3’ A U G C AA U G C U U A GUU ACG . correspondiente al tercer aminoácido. la cisteína (Cys).Elongación: Entrada en la posición correspondiente a la región aminoacil (A) del complejo ARNt-Cys.

P A ARNm 5’ A U G C AA U G C U U A GUU ACG C GA UAG AAAAAAAAAAA 3’ .Elongación: Unión del péptido Met-Gln (Metionina-Glutamina) a la cisteína (Cys).

P 5’ A ARNm AAAAAAAAAAA 3’ A U G C AA U G C U U A ACG C GA UAG . la glutamina (Glu).Elongación: Se libera el ARNt correspondiente al segundo aminoácido.

Elongación: El ARNm corre hacia la otra posición. quedando el complejo ARNt3-Cys-Glu-Met en la región peptidil del ribosoma. P A ARNm 5’ A U G C AA U G C U U A ACG C GA UAG AAAAAAAAAAA 3’ .

la leucina.Elongación: Entrada del complejo ARNt-Leu correspondiente al 4º aminoácido. P A ARNm 5’ A U G C AA U G C U U A ACG C GA UAG AA U AAAAAAAAAAA 3’ Leu .

Elongación: Este se sitúa en la región aminoacil (A). P 5’ A ARNm AAAAAAAAAAA 3’ A U G C AA U G C U U A C G A U A G A C G AA U .

El ARNm se desplaza a la 5ª posición 5’ ARNm P A AAAAAAAAAAA 3’ A U G C AA U G C U U A C G A U A G AA U .Elongación: Unión del péptido Met-Gln-Cys con el 4º aminoácido. Liberación del ARNt de la leucina. la leucina (Leu).

Elongación: Entrada del ARNt de la leucina. la arginina (ARNt-Arg). 5’ ARNm P A AAAAAAAAAAA 3’ A U G C AA U G C U U A C G A U A G AA U GCU . el 5º aminoácido.

Liberación del ARNt de la leucina (Leu). se trata del un codón de finalización o de stop. la arginina (Arg).Elongación: Unión del péptido Met-Gln-Cys-Leu con el 5º aminoácido. El ARNm se desplaza a la 6ª posición. 5’ ARNm A U G C AA U G C U U A P A AAAAAAAAAAA 3’ C GA UAG GCU Arg-Leu-Cys-GlnMet .

ARNm P A 5’ A U G C AA U G C U U A C GA UAG GCU AAAAAAAAAAA 3’ Arg-Leu-Cys-GlnMet . Las subunidades del ribosoma se disocian y se separan del ARNm.Finalización: Liberación del péptido o proteína.

Finalización: Después unos minutos los ARNm son digeridos por las enzimas del citoplasma. ARNm 5’ AAAAAAAAAAA 3’ A U G C A A U G C U U A C GA U A G .

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UGA . UAG. sin solapamientos ni puntos • degenerado o redundante : Codones sinónimos Señal de inicio = AUG Señales de terminación = UAA.CÓDIGO GENÉTICO ARNm lleva mensaje en código de 4 letras Clave para descifrar el código = letras tomadas de a 3 (tripletes o codones) 43 = 64 tripletes para 20 aminoácidos Características del código • Universal • Lectura continua.

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1953 -2003 Watson y Crick 50 años después .