ADN

Estructura y funcin

Miescher Descubre el ADN

1868

Johann Miescher investiga la composicin qumica del ncleo

Aisl un cido orgnico rico en fsforo El lo llamo nuclena Nosotros lo llamamos ADN o cido desoxirribonucleico

Misterio del material herediatario

Originalmente se pensaba que era una clase de protena Razones:
Las caractersticas heredables son diversas Estas molculas codifican para caractersticas que son diferentes Las protenas pueden estar compuestas de 20 aminocidos, adems de que son estructuralmente diversas

Estructura del Material Hereditario

Experimentos en 1950 mostraron que el ADN es el material hereditario Los cientficos tratan de determinar su estructura 1953 - Watson & Crick proponen que el ADN es una doble hlice

Estructura de Nucletidos en el ADN

Cada nucletido consiste de:
Desoxirribosa (azcar en el carbono 5' ) Un grupo fosfato

Una base con un grupo nitrogenado

Hay cuatro bases

Adenina, Guanina, Timina, Citosina

Bases Nucleotdicas
adenina (A) Base con una estructura de doble anillo Azcar (desoxirribosa) timina (T) Una base con una estructura de un solo anillo

guanina (G) Una base con una estructura de un doble anillo

citosina (C) Una base con una estructura de un solo anillo

Composicin del ADN

Chargaff encontr que:
El promedio relativo de Adenina y Guanina difiere entre las especies
El promedio de Adenina es siempre igual al promedio de Timina y el promedio de Guanina igual al de Citosina

A=T y G=C

Regla de Chargaff (1949):

L a RELACIN 1:1 DE PURINAS (A y G) Y PIRIMIDINAS (C y T) se mantiene CONSTANTE Composicin del DNA en pares de bases: Especie Hombre Micobacteria Erizo de mar Adenina 30.3 15.1 32.8 Timina 30.3 14.6 32.1 Guanina 19.5 34.9 17.7 Citosina 19.9 35.4 18.4

Trabajo de Rosalind Franklin

Fue experta en cristalografa de rayos x Us esta tcnica para examinar las cadenas de ADN Concluy que el ADN es una doble hlice

Trabajo de Rosalind Franklin

Fotografa de difraccin de rayos X Estructura de la fibra de DNA es helicoidal

1953. Ao culminante:

Dos lneas de evidencia: Reglas de Chargaff

Fotografas de difraccin de rayos X

1953. Ao culminante:
Watson y yo hemos encontrado el secreto de la vida

Eagle Pub

J. Watson y F. Crick resuelven la estructura tridimensional del DNA (Nature 171: 737-738)

Primer boceto de Crick sobre la estructura del DNA

Modelo de Watson-Crick
El ADN consiste en dos cadenas de nucletidos
Las cadenas corren en direcciones opuestas Estas cadenas se unen entre s por enlaces de hidrgeno entre las bases

A se une a T y C con G
La molcula es una doble hlice

La estructura se mantiene gracias a enlaces de hidrgeno entre las bases nitrogenadas que se encuentran orientadas hacia el interior de las cadenas

Doble hlice, formada por cadenas orientadas en direcciones opuestas (antiparalelas).

Modelo de Watson-Crick
El modelo de WatsonCrick para la estructura del ADN es consistente con los datos bioqumicos y la difraccin de rayos x.

El patrn del apareamiento de bases (A solo con T, y G solo con C) es consistente con la conocida composicin del ADN (A = T, y G = C).

Abril 1953 = revista Nature publica 3 artculos cientficos sobre el DNA:

1.- Watson y Crick (sobre estructura del DNA)

2.- Wilkins, Stokes y Wilson (acidos nucleicos formados por desoxipentosas)

3.- Franklin y Gosling (configuracin molecular de la sal de DNA).

Premio Nobel de Medicina 1962 Maurice Wilkins Francis Crick James Watson

Estructura del DNA

*Doble hlice *Complementacin de bases. *Bases hacia adentro. *Fosfato y desoxiribosa hacia afuera. *Cadenas antiparalelas

ASPECTOS A RESALTAR DE LA ESTRUCTURA DEL DNA: *FORMADO POR UNION DE NUCLEOTIDOS DE FORMA REPETITIVA: POLIMERO *NUCLEOTIDOS: TRES COMPONENTES = FOSFATO, DESOXIRIBOSA Y BASE NITROGENADA

*COMPLEMENTARIEDAD DE BASES => ENLACES DE HIDROGENO ENTRE: TIMINA = ADENINA CITOSINA GUANINA

*CADA CADENA PRESENTA UNA POLARIDAD, Y SON ANTIPARALELAS *BASES NITROGENADAS: EN EL INTERIOR DE LA MOLECULA *GRUPOS FOSFATO: PARTE EXTERNA DE LA MOLECULA

Funciones del DNA: Almacenar la informacin gentica (secuencia de bases genes) ...AATCGGCATTAACGAAGTCCATGACT... Codificar para protenas y RNAs (cdigo gentico) Transmitir esa informacin correctamente (mecanismo eficiente de replicacin del DNA)

Esencial a la relacin ntima entre estructura molecular y funcin gentica del DNA es el concepto de molde
La complementariedad de las bases nitrogenadas permite que la secuencia de una cadena sencilla de DNA acte como un molde para la formacin de una copia complementaria de DNA (replicacin) o de mRNA (transcripcin)

25 de Abril 1953

It has not escaped our notice that the specific pairing we have postulated immediately suggests a possible copying mechanism for the genetic material.

La estructura del ADN ayuda a explicar como se duplica

El ADN son dos cadenas de nucletidos unidas entre s por enlaces de hidrgeno
Los enlaces de hidrgeno entre las dos cadenas se rompen muy fcil Cada cadena original sirve como molde para una nueva cadena

Replicacin del ADN

Cada

cadena molde permanece intacta molcula de

Cada

ADN es la mitad vieja y la otra mitad nueva

a Una molcula de ADN con las dos cadenas de pares de bases complementarias b Inicio de la replicacin; las dos cadenas de la doble hlice se desenrrollan y se separan en un sitio especfico de la molcula c Cada cadena vieja se utiliza como molde para la unin de nuevas bases, de acuerdo a las reglas del apareamiento d Las bases colocadas en cada cadena vieja se ensamblan juntas como una cadena "nueva". Cada molcula mitadvieja, mitad-nueva del ADN es idntica a la molcula original

Tema 6: Estructura y replicacin del material gentico

30

Enzimas en la Replicacin
Hay enzimas que desdoblan las dos cadenas La ADN polimerasa une los nucletidos complementarios La ADN ligasa repara los huecos

Hay enzimas que unen las dos bandas

Tema 6: Estructura y replicacin del material gentico

32

REPLICACIN Reproduccin exacta Base molecular de la transmisin de la vida Semiconservativa Requiere varias enzimas 1 Apertura de doble hlice 2 Horquilla de replicacin (Replicacin bidireccional y aimtrica) En eucariotas no se conocen con exactitud las enzimas que intervienen

Diferencias entre procariotas y eucariotas Longitud del cromosoma Empaquetamiento ADN

Replicacin del DNA

Origen de replicacin: Secuencia reconocida (Ori C en E. coli) por protenas iniciadoras. Varios orgenes en eucariotas La replicacin es bidireccional

Horquilla replicacin

Tema 6: Estructura y replicacin del material gentico

34

En el DNA nuclear de eucariotas hay muchos orgenes de replicacin (~500 en levaduras y 60000 en mamferos). Cada unidad de replicacin es un replicn. La replicacin es bidireccional

Tema 6: Estructura y replicacin del material gentico

35

Tipos de RNA RNA mensajero (RNAm) RNA de transferencia (RNAt) RNA ribosomal (RNAr)

TRANSCRIPCIN o SNTESIS DE ARN MENSAJERO

Sntesis de ARN tomando ADN como molde

Similar a la replicacin

ARN pol cataliza la reaccin 1 Reconoce y se une a secuencia especfica del ADN = promotor 2 La hlice se desenrolla y slo se transcribe una cadena, la que tiene el promotor
3 la transcripcin finaliza con secuencia o seal especfica de terminacin 4 ARN pol se desprende y se restablece la doble hlice

Transcripcin:

Iniciacin: Una ARN-polimerasa comienza la sntesis del precursor del ARN a partir de unas seales de iniciacin "secuencias de consenso " que se encuentran en el ADN.
ARNpolimerasa

T A C A U G

G A A C C U U

C G

G T T G G C A A

C A C A T C C G U G

Alargamiento: La sntesis de la cadena contina en direccin 5'3'. Despus de 30 nucletidos se le aade al ARN una cabeza (caperuza o lder) de metil-GTP en el extremo 5 con funcin protectora.

ARNpolimerasa

T A C A U G

G A A C C U U

C G

G T T G G C A A

C A C A T C C G U G

m-GTP

Finalizacin: Una vez que la enzima (ARN polimerasa) llega a la regin terminadora del gen finaliza la sntesis del ARN. Entonces, una poliA-polimerasa aade una serie de nucletidos con adenina, la cola poliA, y el ARN, llamado ahora ARNm precursor, se libera.

poliA-polimerasa

m-GTP

ARNm precursor

SINTESIS DE PROTEINAS: TRADUCCIN

Iniciacin: La subunidad pequea del ribosoma se une a la regin lder del ARNm y el ARNm se desplaza hasta llegar al codn AUG, que codifica el principio de la protena. Se les une entonces el complejo formado por el ARNt-metionina (Met). La unin se produce entre el codn del ARNm y el anticodn del ARNt que transporta la metionina (Met).
Subunidad menor del ribosoma

A
C GA UAG

AAAAAAAAAAA 3

A U G C AA U G C U U A

UAC

Codn

Anticodn

ARNt

ARNm

1er aminocido

Elongacin: A continuacin se une la subunidad mayor a la menor completndose el ribosoma. El complejo ARNt-aminocido2 , la glutamima (Gln) [ARNt-Gln] se sita enfrente del codn correspondiente (CAA). La regin del ribosoma a la que se une el complejo ARNt-Gln se le llama regin aminoacil (A).

Subunidad menor del ribosoma

5 A U G C AA U G C U U A UAC G U U C GA UAG

AAAAAAAAAAA 3

Elongacin: Se forma el enlace peptdico entre el grupo carboxilo de la metionina (Met) y el grupo amino del segundo aminocido, la glutamina (Gln).

P
5

ARNm

AAAAAAAAAAA 3

A U G C AA U G C U U A UAC G U U

C GA UAG

Elongacin: El ARNt del primer aminocido, la metionina (Met) se libera.

P
5

ARNm

AAAAAAAAAAA 3

A U G C AA U G C U U A GUU

C GA UAG

Elongacin: El ARNm se traslada, de tal manera que el complejo ARNt-GlnMet queda en la regin peptidil del ribosoma, quedando ahora la regin aminoacil (A) libre para la entrada del complejo ARNt-aa3

ARNm

5 A U G C AA U G C U U A GUU C GA UAG

AAAAAAAAAAA 3

Elongacin: Entrada en la posicin correspondiente a la regin aminoacil (A) del complejo ARNt-Cys, correspondiente al tercer aminocido, la cistena (Cys).

P
5

ARNm C GA UAG

AAAAAAAAAAA 3

A U G C AA U G C U U A GUU ACG

Elongacin: Unin del pptido Met-Gln (Metionina-Glutamina) a la cistena (Cys).

ARNm

5 A U G C AA U G C U U A GUU ACG C GA UAG

AAAAAAAAAAA 3

Elongacin: Se libera el ARNt correspondiente al segundo aminocido, la glutamina (Glu).

P
5

ARNm

AAAAAAAAAAA 3

A U G C AA U G C U U A ACG

C GA UAG

Elongacin: El ARNm corre hacia la otra posicin, quedando el complejo ARNt3-Cys-Glu-Met en la regin peptidil del ribosoma.

ARNm

5 A U G C AA U G C U U A ACG C GA UAG

AAAAAAAAAAA 3

Elongacin: Entrada del complejo ARNt-Leu correspondiente al 4 aminocido, la leucina.

ARNm

5 A U G C AA U G C U U A ACG C GA UAG AA U

AAAAAAAAAAA 3

Leu

Elongacin: Este se sita en la regin aminoacil (A).

P
5

ARNm

AAAAAAAAAAA 3

A U G C AA U G C U U A C G A U A G A C G AA U

Elongacin: Unin del pptido Met-Gln-Cys con el 4 aminocido, la leucina (Leu). Liberacin del ARNt de la leucina. El ARNm se desplaza a la 5 posicin

ARNm

AAAAAAAAAAA 3

A U G C AA U G C U U A C G A U A G AA U

Elongacin: Entrada del ARNt de la leucina, el 5 aminocido, la arginina (ARNt-Arg).

ARNm

AAAAAAAAAAA 3

A U G C AA U G C U U A C G A U A G AA U GCU

Elongacin: Unin del pptido Met-Gln-Cys-Leu con el 5 aminocido, la arginina (Arg). Liberacin del ARNt de la leucina (Leu). El ARNm se desplaza a la 6 posicin, se trata del un codn de finalizacin o de stop.

ARNm A U G C AA U G C U U A

AAAAAAAAAAA 3

C GA UAG GCU

Arg-Leu-Cys-GlnMet

Finalizacin: Liberacin del pptido o protena. Las subunidades del ribosoma se disocian y se separan del ARNm.

ARNm

5 A U G C AA U G C U U A C GA UAG GCU

AAAAAAAAAAA 3

Arg-Leu-Cys-GlnMet

Finalizacin: Despus unos minutos los ARNm son digeridos por las enzimas del citoplasma.

ARNm 5 AAAAAAAAAAA 3

A U G C A A U G C U U A C GA U A G

CDIGO GENTICO ARNm lleva mensaje en cdigo de 4 letras Clave para descifrar el cdigo = letras tomadas de a 3 (tripletes o codones) 43 = 64 tripletes para 20 aminocidos Caractersticas del cdigo Universal Lectura continua, sin solapamientos ni puntos degenerado o redundante : Codones sinnimos Seal de inicio = AUG Seales de terminacin = UAA, UAG, UGA

1953 -2003 Watson y Crick 50 aos despus