Campy Lob Acter

CAMPYLOBACTERACEAE
Bacteriologa
Curso de Bacteriologa
HISTORIA
THEODOR ESCHERICH
1886
Bacilos Gram negativos curvos en
DESCRIBE
deposiciones de 16/17 nios fallecidos por diarrea
OBSERVA
Bacilos semejantes en gatos jvenes con diarrea Vibrio felinus
Los primeros aislamientos de especies del gnero Campylobacter fueron realizados en el rea de la microbiologa veterinaria, en 1909 y 1913.
Sir McFadyean John (1853-1941) Royal Veterinary College London Veterinary pathology
Sir Stockman Stewart (1869-1926) Royal Veterinary College London
1918 Mac Fadyean y Stockmann y posteriormente Smith establecieron la participacin de una bacteria microaerfila en el aborto del ganado bovino y ovino, de morfologa similar al gnero Vibrio, por lo que se lo llam Vibrio fetus.
En 1931, Jones y Little aislaron a partir de bovinos con disturbios intestinales un vibrin microaerfilo, al que denominaron Vibrio jejuni. En 1944 Doyle describi un vibrin aislado del intestino de cerdos con diarrea y lo denomin Vibrio coli.
En 1957 E. King
Elizabeth King 1966 related Vibrio
Estudia las caractersticas de Vibrios aislados de diferentes fuentes. Estableci que no todos correspondan a Vibrio fetus . Determin dos grupos con caractersticas serolgicas y bioqumicas diferentes Algunos eran capaces de crecer a 25 y 37C Otros lo hacan a 42C, a estos los consider como Vibrios relacionados y se comprob que eran agentes causantes de diarrea aguda.
6
En 1972 Dekeyser y Butzler aislaron los microorganismos de las heces de pacientes con enteritis aguda usando una tcnica de filtracin que permita el pasaje de pequeos bastones curvos a travs de una membrana, pero retena microorganismos fecales ms grandes. Butzler y Skirrow, Bolton y Robertson, Blaser y col, desarrollaron medios selectivos que permitieron aislar estos microorganismos con relativa facilidad y establecer su participacin en diferentes cuadros infecciosos en el hombre.
Prof. J.-P. Butzler St. Pierre Hospital - VUB
La primera asociacin entre vibriones microaerfilos y diarrea en el hombre fue sugerida por Levy en 1946, el que realiz un estudio en un brote de gastroenteritis sobre 357 pacientes en un penal en Illinois, observando en exmenes directos la presencia de vibrios en el 20% de las muestras.
En 1963, Sbald y Veron proponen la
creacin
del gnero
Campylobacter.
Taxonoma

REINO DIVISION CLASE FAMILIA GENEROS
ESPECIE
Procaryotae Gracillicutes Proteobacteria Campylobacteraceae Campylobacter Arcobacter Sulfospirillum Bacteroides ureolyticus
PFEIFFER
1987
Describe: - hallazgos clnicos post-mortem en intestino grueso compatibles con enteritis por Campylobacter - bacterias espiraladas, de 2 a 3 vueltas regulares, mviles, no cultivables
10
Los primeros aislamientos de especies del gnero Campylobacter fueron realizados en el rea de la microbiologa veterinaria, en 1909 y 1913.
1909 -1919 fetos bovinos yovinos 1931 bovinos con diarrrea 1944 cerdos con diarrea 1957 gastroenteritis? 1958 vibriosis heptica 1963 DNA 1971 1972diarrea en humanos 1977 medio selectivo 1992 taxonoma
Vibrio fetus Vibrio jejuni Vibrio coli related vibrios Vibrio hepaticus Gn. Campylobacter C. fetus subsp. jejuni Fam. Campylobacteraceae
11
CAMPYLOBACTER : taxonoma y nomenclatura
V. jejuni V. coli V. hepaticus Related Vibrios V. fetus
C. fetus subsp. jejuni
C. fetus subsp. intestinalis
C. jejuni C. coli
C. fetus subsp. fetus

12
Gnero
Campylobacter
% G-C 29-35 44-50
Metabolismo
No Fermentativo
Vibrio
Fermentativo
13
Vandamme y col.
1992
TAXONOMA DE BACILOS GRAM NEGATIVOS CURVOS
Helicobacter, Campylobacter, Arcobacter y Wolinella

pertenecen a un grupo distinto de bacterias Superfamilia VI del rARN
14
Vandamme y col. Superfamilia VI del rARN
1992
Campylobacter Bacteroides ureolyticus Campylobacteraceae Arcobacter
Flexispira Wolinella rRNA superfamilias I a V
Helicobacter
Organismos Campylobacter-like de vida libre
15
Vandamme y col.
Cambios de Nomenclatura
1992
Campylobacter cinaedi C. fenneliae C. nitrofrigilis C. cryaerophila Wolinella recta W. curva
Helicobacter cinaedi H. feneliae Arcobacter nitrofrigilis A. cryaerophilus Campylobacter rectus C. curvus
16
Vandamme y col.
1992
FAMILIA CAMPYLOBACTERACEAE
GNERO BACTEROIDESUR GNERO GNERO CAMPYLOBACTER ARCOBACTER SULFUROSPIRILL EOLYTICUS UM
19especiesy subespecies 4especies 4especies
17
ESPECIES DEL GNERO ARCOBACTER

CARACTERSTICAS
bacilos gram negativos curvos
A. nitrofrigilis* A. cryaerophilus A. butzleri
cultivos viejos: formas cocoides y filamentos largos

monotricos: bipolar o monopolar oxidasa positivos crecen entre 15 y 37C (24C) aerobiosis y anaerobiosis G + C 27 a 31 mol% menaquinona - 6
A. skirrowii
18
ESPECIES DEL GNERO SULFUROSPIRILLUM
S. deleyianum*
S. archaconense S. arsenophilum S. barnesii
CARACTERSTICAS bacilos gram negativos curvos

oxidasa positivos crecen entre 8 y 36C de difcil cultivo fastidiosos? G + C 32 a 42 mol% de vida libre asociados a presencia de metales
19
ESPECIE BACTEROIDES UREOLYTICUS
bacilo gram negativo curvo

inmvil crece a 36C microaerfilo + hidrgeno
metabolismo proteoltico asociados a infecciones de: - tejidos blandos,uretritis, - enfermedad periodontal

> nmero de cepas para clasificacin definitiva
20
Especies de Campylobacter con patogenicidad conocida

C. jejuni ssp. jejuni
C. coli
C. fetus subsp. fetus C. upsaliensis
C. lari
21
ESPECIES DE CAMPYLOBACTER
Campylobacter lari
ssp. lari (cepas clsicas NARTC)
ssp. ureasum (variedades atpicas -urea neg, AN S)
ssp. subantaricum (animales subantrticos)
11th International Workshop on Campylobacter, Helicobacter and related organisms, Freiburg, 2001
22
Especies de Campylobacter emergentes o con patogenicidad no bien establecida

C. jejuni ssp. doylei C. hyointestinalis (hyointestinalis, lawsonii) C. sputorum (sputorum, fecalis, ureolyticus) C. concisus C. mucosalis C. gracilis C. rectus C. curvus C. lenienae
23
Especies de Campylobacter no patgenos para el hombre
C. fetus subsp. venerealis C. showae C. helveticus
24
25
26
CEPA CONTROL POSITIVO: C. jejuni CEPA CONTROL NEGATIVO (DBIL): C. upsaliensis ATCC 43954
27
CEPA CONTROL POSITIVO: Campylobacter jejuni ssp jejuni CEPA CONTROL NEGATIVO: Escherichia coli
28
IDENTIFICACIN PRESUNTIVA
CARACTERSTICAS DE CRECIMIENTO
42C 48 h de incubacin Microaerofilia
MORFOLOGA DE LA COLONIA
(Colonia invasora)
MORFOLOGA MICROSCPICA
Gram (bacilo Gram curvo) Contraste de fase (bacilo curvo, mvil)
CATALASA (+) OXIDASA (+)
Nuestro aislamiento corresponde a Campylobacter sp.

29
IDENTIFICACIN DEFINITIVA (determina especie)

TEMPERATURAS DE CRECIMIENTO
crecimiento a 26 37 y 42C
SUSCEPTIBILIDAD A CEFALOTINA Y CIDO NALIDXICO PRUEBAS BIOQUMICAS

hidrlisis del hipurato hidrlisis del indoxil acetato
produccin de H2S reduccin de NO3y otras
Nuestro aislamiento corresponde a alguna de las especies del gnero Campylobacter

30
CAMPYLOBACTER: TEMPERATURAS DE CRECIMIENTO
ESPECIE C. jejuni ssp. jejuni C. jejuni ssp. doylei
26 C
-
37 C + +
42 C
+ + +
C. coli
C. lari C. upsaliensis C. fetus ssp. fetus
C. fetus ssp. venerealis
+
+ + + +
+ + Curso de Bacteriologa
+
v v
31
C. hyointestinalis
V = variable
ALGUNAS PRUEBAS DE IDENTIFICACIN DE CAMPYLOBACTER C. fetus C. jejuni C. jejuni C. coli C. lari C. upsafetus jejuni doylei liensis
Catalasa + + + + + d/-
Red. NO3
H2 S Hipurato
+
-
+
+/+
+
-
+
+ -
+
-
Indoxilacet.
Crecim. 25C Crecim. 37C Crecim. 42C Sens. c. Nal. Sens. Cefalot.
+ + R S
+
+ + S R
+
+ S S
+
+ + S R
+ + R R
+
+ V R V
32
Patogenicidad de Campylobacter
Pases desarrollados: Diarrea c/septicemia: Pacientes c/diarrea: Tratamiento antibitico:
Inoculacin Experimental:
Ms frecuente en pacientes con diarrea Hemocultivos positivos Altos ttulos de Ac. homlogos Eritromicina Monos- perros- polloscerdos- becerros
Diarrea experimental en humanos

33
Infeccin Intestinal
Trasmisin: oral-fecal
Dosis infectante 5x102 a 106

Mecanismos defensivos del husped
Factores de virulencia
34
Mecanismos de virulencia
ADHERENCIA INVASIN
ENTEROTOXINA
CITOTOXINAS
35
Adhesinas
Protenas de membrana externa

Lipopolisacrido Flagelo
36
37
Campylobacter: produccin de enterotoxina Demostrada utilizando: Perfusin intestinal en ratas

transporte de electrolitos al intestino
Asa ligada en intestino de rata

aumento de fluido intestinal
Cultivos celulares (CHO)

efecto citotnico (aumento de AMPc)
38
PERFUSIN EN ASA INTESTINAL DE RATA
Dr. Heriberto FernndezUniversidadAustral de Chile / Facultad de Medicina / Instituto De Microbiologia Clinica

39
ASA LIGADA DE RATA
Dr. Heriberto FernndezUniversidadAustral de Chile / Facultad de Medicina / Instituto De Microbiologia Clinica

40
Clula CHO normales
Clula CHO elongadas por efecto de la enterotoxina
41
CDT +
Clula VERO normales C. jejuni C. coli 74.2% 64.7%
42
BIOTIPIA Y SEROTIPIA DE
Campylobacter
43
BIOTIPIA DE Campylobacter
44
Esquemas propuestos para biotipia de Campylobacter

Hidrlisis del Hipurato y la Prueba Rpida para H2S.
M.B. Skirrow and J. Benjamin. 1980. Differenciation of enteropathogenic campylobacter. J. Clin. Path. 33:1122
Hidrlisis del Hipurato, Hidrlisis del DNA y Crecimiento en Agar
Extracto de Levadura y Carbn.
G.A. Hebert,
D.H. Hollis, R.E. Weaver, M.A. Lambert, M.J. Blaser and C.W.Moss 1982. 30 years of campylobacters: biochemical characteristics and a biotyping proposal for Campylobacter jejuni. J. Clin. Microbiol, 15: 1065 1073.
Prueba Rpida de Hidrlisis del Hipurato, Prueba Rpida de H2S
y la Prueba de Hidrlisis del DNA.

Lior, H. 1984. New extended Biotyping Scheme for Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, and Campylobacter laridis. J. Clin. Microbiol. 20:636-640
45
Esquema de Biotipia del Dr. Hermy Lior
46
BIOTIPIA DE Campylobacter
Para todas las pruebas de debe tener en
cuenta:
Utilizar cultivos que hayan crecido en Agar
Mueller Hinton Sangre. Incubadas a 37C o a 43C y Bajo condiciones de microaerofilia o con mezcla de gases recomendado para Campylobacters.
47
BIOTIPIA DE Campylobacter Esquema del Dr. H. Lior

PRUEBA RAPIDA DE HIDROLISIS DEL HIPURATO PRUEBA RAPIDA DE H2S
PRUEBA DE HIDROLISIS DEL DNA
48
PRUEBA RAPIDA DE HIDRLISIS DEL HURATO
49
Hidrlisis del Hipurato

H2O
cido hiprico
Hipuricasa (hidrolasa)
Benzoato de sodio + Glicina
Hidrlisis del cido Hiprico:

Deteccin del benzoato
Deteccin de glicina
Color prpura
cloruro frrico al 7% ninhidrina (oxidante)

CO2
ninhidrina residual + NH3
50
PRUEBA RAPIDA DE HIDROLISIS DEL HIPURATO

MATERIAL NECESARIO
Hipurato de sodio al 1% en H2O Ninhydrina al 3.5% en butanol acetona (1:1) preparacin fresca, cada semana.
Hipurato de sodio (0.1%)
Dispensar 0.4 mL de la solucin de hippurato
de sodio en tubos de 10 x 75 mm
Mantener los tubos tapados y congelados
(-20C) hasta su uso.
Los tubos Antes de ser usados, deben ser
descongelados y puestos a temperatura ambiente.

51

PROCEDIMIENTO
Colocar una pequea asada de cultivo de 24 a 48 Hrs. en el tubo con la solucin de hipurato de sodio.
Mezclar bien e incubar por 2 horas a 37C en bao mara. Luego, lentamente se agrega 0.2 mL del reactivo nynhidrina. NO SE DEBE MEZCLAR, reincubar por otros 10 minutos y leer. Un color prpura intenso (similar al cristal violeta) representa una reaccin positiva y la ausencia de color o un color prpura tenue indica una prueba de hidrlisis del hipurato negativa. Controles : + C. jejuni LIO 6; - C. coli LIO 8
Lior, H. 1984. New extended Biotyping Scheme for Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, and Campylobacter laridis J. Clin. Microbiol. 20:636-640
H. wang, M.N. 1975. Rapid hippurate hydrolysis method for presumptive identification of Group B Streptococci. J. Clin. Microbiol. 1:114-115
52

Hidrlisis del Hipurato positivo Hidrlisis del Hipurato negativo
53
54
PRUEBA RPIDA DE H2S
55
Prueba Rpida de H2S

MATERIAL NECESARIO El medio FBP Agar ha sido modificado como sigue A : Caldo Brucella (GIBCO) 2.9 g Na2HPO4 (anhidro) 0.118 g K H2PO4 (Anhidro) 0.023 g Agar (L28-Oxoid) 0.2 g H2O 97 mL Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 15 lb y dejar enfriar a 45C. Prepare separadamente las siguientes soluciones en agua destilada y esterilice con filtro: B Sulfato ferroso 7H2O 10% C Metabisulfito de sodio 10% D Piruvato de sodio 10%
56
Preparacin del Medio FBP Agar modificado

Mezcla B+C+D
1 mL sol B + 1 mL sol C 1 mL sol B
A Medio base Caldo Brucella (GIBCO) Na2HPO4 (anhidro) K H2PO4 (Anhidro) Agar (L28-Oxoid) H2O
1 mL sol B +
2.9 g 0.118 g 0.023 g 0.2 g 97 mL
1 mL sol B
1 mL sol B + 1 mL sol C
Mezclar bien
1 mL sol C + 1 mL sol D
Medio Base A
B Sulfato ferroso 7H2O C Metabisulfito de sodio D Piruvato de sodio 10% 10% 10%
1 mL sol B
1 mL sol C
1 mL sol D
Ajustar el pH a 7.3, dispensar asepticamente 3 mL en tubos estriles 13x100 con tapa rosca. Preparar medios frescos cada dos semanas.
57
Prueba Rpida de H2S

PROCEDIMIENTO
Coloque un inculo grande semejante a una bolilla (con un asa de 5 mm de dimetro) de un cultivo de 24 horas en el tercio superior del medio de cultivo. NO MEZCLE.
Incube en baomara a 37C por 2 horas.

El ennegrecimiento alrededor de la masa bacteriana representa una reaccin positiva, usualmente comienza aparecer entre los 30-45 minutos.
USE SOLO CULTIVOS DE 24 HORAS. La reproducividad con cultivos de 48 horas es muy pobre.
Controles : + C. jejuni LIO 6; - C. jejuni LIO 1
58
H2S negativo
H2S positivo
59
HIDRLISIS DEL DNA
60
DNasa cido Desoxyrribonucleico DNA depolimerizado
zonas claras alrededor de la siembra
61
Prueba de Hidrlisis del DNA

MATERIAL NECESARIO Agar DNA Azul de toluidina Modificado cido Desoxyrribonucleico (DIFCO DNA Cat#3321-12-1) 0.3 g 0.01 M Cloruro de Calcio 1 mL Cloruro de sodio 10.0 g 6.5 mL Agar Oxoid L 28 0.05M Buffer TRIS pH 9.0 * 1000 Ml
Coloque todos los ingredientes en un matraz y caliente hasta que el DNA y el agar estn completamente disueltos Enfre a 50C y agregue Azul de toluidina "O" al 3% 2.5 mL (Fisher Scientific Certified Stain CAT# T-161) Mezcle bien y distribuya en placas Petri 25 mL en cada una NO REQUIERE ESTERILIZACION.
62
Prueba de Hidrlisis del DNA

PROCEDIMIENTO En la placa de Agar DNA- Azul de Toluidina modificado* Se inocula con un asa de 3 mm de dimetro y en un rea circular pequea, a partir de cultivos de 24 - 48 horas. Incubar 43C bajo condiciones de atmsfera de mezcla de gases recomendado para Campylobacters por 24 a 48 horas. Una zona clara incolora o algo rosada alrededor del inoculo es considerado una reaccin positiva. En una placa se pueden probar varios cultivos y se debe incluir controles, positivo y negativo. Control Positivo = C. jejuni LIO 36
63
64
65
SEROTIPIA DE
Campylobacter
66
Esquemas de Serotipia de Campylobacter

Sistema Penner y Hennessy: detecta antgenos somticos
termoestables; puede identificar 60 serotipos de C. jejuni y C. coli.
Penner, J.L., Hennessy, J.N. 1980. Passive hemagglutination technique for serotyping Campylobacter fetus subsp. jejuni on the basis of soluble heat-stable antigens. J. Clin. Microbiol. 12: 732-737
Sistema Lauwers S., Vlaes L. and Butzler J.P.: detecta antgenos
somticos termoestables; puede identificar 42 serotipos de C. jejuni y C. coli.
Lauwers S., Vlaes L. and Butzler J.P. 1981 Campylobacter serotyping and epidemiology, Lancet, 1,158
Sistema Lyor: detecta antgenos flagelares termolbiles; puede
identificar ms de 100 serotipos de C. jejuni, C. coli y C. lari.
factors.
Lior, H.D. et al. 1982. Serotyping of Campylobacter jejuni by slide agglutination based on a heat-labile antigenic J. Clin. Microbiol. 15: 761-768.
67
68 Curso de Bacteriologa
SEROTIPIA DE Campylobacter jejuni y Campylobacter coli

MATERIAL NECESARIO DNasa (10 mg /vial DNasa Bovina pancretica Grade II N de Catalogo 104 159
(EC3.1.21.1)
Boehringer Mannheim, Alemania)
Solucin Stock DNasa PBS 0.1%

Agregar aspticamente 10 mL de PBS al vial, mezclar bien y
dispensar en tubos de tapa rosca alcuotas de 1 mL, mantener congelado a -20C.

Solucin de trabajo DNasa -PBS
Diluir 1 mL de la solucin stock con 4 mL de PBS Dispensar alcuotas de 0.5 mL en tubos con tapa rosca Los tubos que no estn en uso se deben mantener
congelados a -20C
69
MATERIAL NECESARIO Buffer Fosfato Saline 0.01M , pH 7.2 (PBS). PBS-Merthiolate 1:10,000 NaCl al 2% Lminas de vidrio (300 mm x 150 mm x 3 mm) Placas de Petri 90 x 15 mm Asas de siembra de 2 mm de dimetro Mezcla de gases 5% O2, 10% CO2, 85 % N2 (Skirrow) Medio de cultivo: Mueller Hinton con 5% de sangre de carnero en placas de Petri
70
PROCEDIMIENTO
Previamente antes de realizar la serotipia:
Los cultivos debern ser sembrados en placas de
Mueller Hinton sangre (frescas y hmedas) e incubadas a 37C por 48 horas en atmsfera de mezcla de gases recomendado para Campylobacters.
71
Campylobacter en Mueller Hinton sangre 5%
72
Campylobacter en Mueller Hinton sangre 5%
73
SEROTIPIA DE Campylobacter jejuni y C. coli POR AGLUTINACIN EN LMINA

1. Verificar que el cultivo no este rugoso
En una lmina colocar una gota pequea (10-20 mL) de DNasa y hacer una suspensin bacteriana con el cultivo. Agregar 1 gota (50 ml) de ClNa al 2% y chequear si autoaglutina o no. Si el cultivo esta rugoso, resembrar y volver a probar.
2. Si el cultivo esta liso se procede de la siguiente manera:

Colocar una gota pequea (10-20 ml) de DNasa-PBS en cada uno de 5 rectngulos en la lmina. Emulsificar una pequea asada del cultivo con DNasa-PBS. Agregar (50 ml) de cada pool (1-4) de antisueros y con un mondadiente o con el asa mezclar bien en sentido longitudinal. Mover lmina con movimientos de vaivn por 45 segundos. LEER LA PRUEBA DE INMEDIATO Los resultados obtenidos despus de 1 minuto o las reacciones dbiles, podran representar reacciones cruzadas. Si no se observa aglutinacin con los pools 1 a 4, repetir el procedimiento con los pools remanentes (5 a 16)
74
3. Lectura de Resultados
Utilizando iluminacin indirecta sobre un fondo negro, registre el grado de aglutinacin como sigue:
= ligera aglutinacin y el fluido turbio 1+ = cerca del 25% de clulas aglutinadas y el fluido turbio. 2+ = cerca del 50% de clulas aglutinadas y el fluido es moderadamente turbio. 3+ = aproximadamente el 75% de las clulas aglutinadas y el fluido es ligeramente turbio. 4+ = todas las clulas estn aglutinadas y el fluido es claro.
El ttulo del antisuero en los pools es usualmente definido como una dilucin menor que la dilucin ms alta que muestre 3+ o una aglutinacin ms fuerte en 1 minuto.
4. INTERPRETACION DE RESULTADOS

Los antisueros no absorbidos en los pools, contienen aglutininas para antgenos heterlogos de Campylobacter jejuni y C. coli. Podran producir reacciones de aglutinacin en ms de un pool. Los pools estan diseados solo para screening. Los serogrupos son identificados con antisueros monovalentes y confirmados por antisueros absorbidos. Los antisueros han sido agrupados en lo posible para reducir la ocurrencia de reacciones en varios pools. A veces las reacciones en ms de un pool podra deberse a la presencia de ms de un serotipo en el mismo cultivo. Esto se puede resolver haciendo la serotipia a partir de una clona de colonias individuales.
75
Esquema de la Serotipia de Campylobacter

Serotipo LIO 36
DNasa - PBS
DNasa - PBS
DNasa - PBS
DNasa DNasa - PBS - PBS
76

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CAMPYLOBACTERACEAE

Bacilos Gram negativos curvos en

deposiciones de 16/17 nios fallecidos por diarrea

Bacilos semejantes en gatos jvenes con diarrea Vibrio felinus

Sir Stockman Stewart (1869-1926) Royal Veterinary College London

Elizabeth King 1966 related Vibrio

Prof. J.-P. Butzler St. Pierre Hospital - VUB

REINO DIVISION CLASE FAMILIA GENEROS

Procaryotae Gracillicutes Proteobacteria Campylobacteraceae Campylobacter Arcobacter Sulfospirillum Bacteroides ureolyticus

CAMPYLOBACTER : taxonoma y nomenclatura

V. jejuni V. coli V. hepaticus Related Vibrios V. fetus

C. fetus subsp. jejuni

C. fetus subsp. intestinalis

C. fetus subsp. fetus

% G-C 29-35 44-50

TAXONOMA DE BACILOS GRAM NEGATIVOS CURVOS

Helicobacter, Campylobacter, Arcobacter y Wolinella

Vandamme y col. Superfamilia VI del rARN

Campylobacter Bacteroides ureolyticus Campylobacteraceae Arcobacter

Flexispira Wolinella rRNA superfamilias I a V

Campylobacter cinaedi C. fenneliae C. nitrofrigilis C. cryaerophila Wolinella recta W. curva

Helicobacter cinaedi H. feneliae Arcobacter nitrofrigilis A. cryaerophilus Campylobacter rectus C. curvus

ESPECIES DEL GNERO ARCOBACTER

A. nitrofrigilis* A. cryaerophilus A. butzleri

cultivos viejos: formas cocoides y filamentos largos

ESPECIES DEL GNERO SULFUROSPIRILLUM

CARACTERSTICAS bacilos gram negativos curvos

ESPECIE BACTEROIDES UREOLYTICUS

bacilo gram negativo curvo

metabolismo proteoltico asociados a infecciones de: - tejidos blandos,uretritis, - enfermedad periodontal

Especies de Campylobacter con patogenicidad conocida

Especies de Campylobacter emergentes o con patogenicidad no bien establecida

Especies de Campylobacter no patgenos para el hombre

C. fetus subsp. venerealis C. showae C. helveticus

CATALASA (+) OXIDASA (+)

Nuestro aislamiento corresponde a Campylobacter sp.

IDENTIFICACIN DEFINITIVA (determina especie)

SUSCEPTIBILIDAD A CEFALOTINA Y CIDO NALIDXICO PRUEBAS BIOQUMICAS

Nuestro aislamiento corresponde a alguna de las especies del gnero Campylobacter

CAMPYLOBACTER: TEMPERATURAS DE CRECIMIENTO

ESPECIE C. jejuni ssp. jejuni C. jejuni ssp. doylei

Diarrea experimental en humanos

Dosis infectante 5x102 a 106

Protenas de membrana externa

Campylobacter: produccin de enterotoxina Demostrada utilizando: Perfusin intestinal en ratas

Asa ligada en intestino de rata

Cultivos celulares (CHO)

PERFUSIN EN ASA INTESTINAL DE RATA

Dr. Heriberto FernndezUniversidadAustral de Chile / Facultad de Medicina / Instituto De Microbiologia Clinica

ASA LIGADA DE RATA

Dr. Heriberto FernndezUniversidadAustral de Chile / Facultad de Medicina / Instituto De Microbiologia Clinica

Clula CHO normales

Clula CHO elongadas por efecto de la enterotoxina

Esquemas propuestos para biotipia de Campylobacter

Hidrlisis del Hipurato, Hidrlisis del DNA y Crecimiento en Agar

Extracto de Levadura y Carbn.

Prueba Rpida de Hidrlisis del Hipurato, Prueba Rpida de H2S

y la Prueba de Hidrlisis del DNA.

Esquema de Biotipia del Dr. Hermy Lior

BIOTIPIA DE Campylobacter Esquema del Dr. H. Lior

PRUEBA DE HIDROLISIS DEL DNA

PRUEBA RAPIDA DE HIDRLISIS DEL HURATO

Hidrlisis del Hipurato

Benzoato de sodio + Glicina