Vous êtes sur la page 1sur 76

CAMPYLOBACTERACEAE

Bacteriologa

Curso de Bacteriologa

HISTORIA

Curso de Bacteriologa

THEODOR ESCHERICH

1886

Bacilos Gram negativos curvos en

DESCRIBE

deposiciones de 16/17 nios fallecidos por diarrea

OBSERVA

Bacilos semejantes en gatos jvenes con diarrea Vibrio felinus

Los primeros aislamientos de especies del gnero Campylobacter fueron realizados en el rea de la microbiologa veterinaria, en 1909 y 1913.

Sir McFadyean John (1853-1941) Royal Veterinary College London Veterinary pathology

Sir Stockman Stewart (1869-1926) Royal Veterinary College London

1918 Mac Fadyean y Stockmann y posteriormente Smith establecieron la participacin de una bacteria microaerfila en el aborto del ganado bovino y ovino, de morfologa similar al gnero Vibrio, por lo que se lo llam Vibrio fetus.
Curso de Bacteriologa

En 1931, Jones y Little aislaron a partir de bovinos con disturbios intestinales un vibrin microaerfilo, al que denominaron Vibrio jejuni. En 1944 Doyle describi un vibrin aislado del intestino de cerdos con diarrea y lo denomin Vibrio coli.

Curso de Bacteriologa

En 1957 E. King

Elizabeth King 1966 related Vibrio

Estudia las caractersticas de Vibrios aislados de diferentes fuentes. Estableci que no todos correspondan a Vibrio fetus . Determin dos grupos con caractersticas serolgicas y bioqumicas diferentes Algunos eran capaces de crecer a 25 y 37C Otros lo hacan a 42C, a estos los consider como Vibrios relacionados y se comprob que eran agentes causantes de diarrea aguda.
6

Curso de Bacteriologa

En 1972 Dekeyser y Butzler aislaron los microorganismos de las heces de pacientes con enteritis aguda usando una tcnica de filtracin que permita el pasaje de pequeos bastones curvos a travs de una membrana, pero retena microorganismos fecales ms grandes. Butzler y Skirrow, Bolton y Robertson, Blaser y col, desarrollaron medios selectivos que permitieron aislar estos microorganismos con relativa facilidad y establecer su participacin en diferentes cuadros infecciosos en el hombre.

Prof. J.-P. Butzler St. Pierre Hospital - VUB

Curso de Bacteriologa

La primera asociacin entre vibriones microaerfilos y diarrea en el hombre fue sugerida por Levy en 1946, el que realiz un estudio en un brote de gastroenteritis sobre 357 pacientes en un penal en Illinois, observando en exmenes directos la presencia de vibrios en el 20% de las muestras.
En 1963, Sbald y Veron proponen la

creacin

del gnero

Campylobacter.

Curso de Bacteriologa

Taxonoma

REINO DIVISION CLASE FAMILIA GENEROS

ESPECIE

Procaryotae Gracillicutes Proteobacteria Campylobacteraceae Campylobacter Arcobacter Sulfospirillum Bacteroides ureolyticus

Curso de Bacteriologa

PFEIFFER

1987

Describe: - hallazgos clnicos post-mortem en intestino grueso compatibles con enteritis por Campylobacter - bacterias espiraladas, de 2 a 3 vueltas regulares, mviles, no cultivables

Curso de Bacteriologa

10

Los primeros aislamientos de especies del gnero Campylobacter fueron realizados en el rea de la microbiologa veterinaria, en 1909 y 1913.

1909 -1919 fetos bovinos yovinos 1931 bovinos con diarrrea 1944 cerdos con diarrea 1957 gastroenteritis? 1958 vibriosis heptica 1963 DNA 1971 1972diarrea en humanos 1977 medio selectivo 1992 taxonoma

Vibrio fetus Vibrio jejuni Vibrio coli related vibrios Vibrio hepaticus Gn. Campylobacter C. fetus subsp. jejuni Fam. Campylobacteraceae

Curso de Bacteriologa

11

CAMPYLOBACTER : taxonoma y nomenclatura

V. jejuni V. coli V. hepaticus Related Vibrios V. fetus

C. fetus subsp. jejuni

C. fetus subsp. intestinalis

C. jejuni C. coli
Curso de Bacteriologa

C. fetus subsp. fetus


12

Gnero
Campylobacter

% G-C 29-35 44-50

Metabolismo
No Fermentativo

Vibrio

Fermentativo

Curso de Bacteriologa

13

Vandamme y col.

1992

TAXONOMA DE BACILOS GRAM NEGATIVOS CURVOS

Helicobacter, Campylobacter, Arcobacter y Wolinella


pertenecen a un grupo distinto de bacterias Superfamilia VI del rARN

Curso de Bacteriologa

14

Vandamme y col. Superfamilia VI del rARN

1992

Campylobacter Bacteroides ureolyticus Campylobacteraceae Arcobacter

Flexispira Wolinella rRNA superfamilias I a V

Helicobacter
Organismos Campylobacter-like de vida libre
15

Curso de Bacteriologa

Vandamme y col.
Cambios de Nomenclatura

1992

Campylobacter cinaedi C. fenneliae C. nitrofrigilis C. cryaerophila Wolinella recta W. curva

Helicobacter cinaedi H. feneliae Arcobacter nitrofrigilis A. cryaerophilus Campylobacter rectus C. curvus

Curso de Bacteriologa

16

Vandamme y col.

1992

FAMILIA CAMPYLOBACTERACEAE
GNERO BACTEROIDESUR GNERO GNERO CAMPYLOBACTER ARCOBACTER SULFUROSPIRILL EOLYTICUS UM
19especiesy subespecies 4especies 4especies

Curso de Bacteriologa

17

ESPECIES DEL GNERO ARCOBACTER


CARACTERSTICAS
bacilos gram negativos curvos

A. nitrofrigilis* A. cryaerophilus A. butzleri

cultivos viejos: formas cocoides y filamentos largos


monotricos: bipolar o monopolar oxidasa positivos crecen entre 15 y 37C (24C) aerobiosis y anaerobiosis G + C 27 a 31 mol% menaquinona - 6
Curso de Bacteriologa

A. skirrowii

18

ESPECIES DEL GNERO SULFUROSPIRILLUM

S. deleyianum*
S. archaconense S. arsenophilum S. barnesii

CARACTERSTICAS bacilos gram negativos curvos


oxidasa positivos crecen entre 8 y 36C de difcil cultivo fastidiosos? G + C 32 a 42 mol% de vida libre asociados a presencia de metales
19

Curso de Bacteriologa

ESPECIE BACTEROIDES UREOLYTICUS

bacilo gram negativo curvo


inmvil crece a 36C microaerfilo + hidrgeno

metabolismo proteoltico asociados a infecciones de: - tejidos blandos,uretritis, - enfermedad periodontal


> nmero de cepas para clasificacin definitiva
Curso de Bacteriologa

20

Especies de Campylobacter con patogenicidad conocida


C. jejuni ssp. jejuni

C. coli
C. fetus subsp. fetus C. upsaliensis

C. lari

Curso de Bacteriologa

21

ESPECIES DE CAMPYLOBACTER

Campylobacter lari
ssp. lari (cepas clsicas NARTC)
ssp. ureasum (variedades atpicas -urea neg, AN S)
ssp. subantaricum (animales subantrticos)

11th International Workshop on Campylobacter, Helicobacter and related organisms, Freiburg, 2001
Curso de Bacteriologa

22

Especies de Campylobacter emergentes o con patogenicidad no bien establecida


C. jejuni ssp. doylei C. hyointestinalis (hyointestinalis, lawsonii) C. sputorum (sputorum, fecalis, ureolyticus) C. concisus C. mucosalis C. gracilis C. rectus C. curvus C. lenienae
Curso de Bacteriologa

23

Especies de Campylobacter no patgenos para el hombre

C. fetus subsp. venerealis C. showae C. helveticus

Curso de Bacteriologa

24

Curso de Bacteriologa

25

Curso de Bacteriologa

26

CEPA CONTROL POSITIVO: C. jejuni CEPA CONTROL NEGATIVO (DBIL): C. upsaliensis ATCC 43954

Curso de Bacteriologa

27

CEPA CONTROL POSITIVO: Campylobacter jejuni ssp jejuni CEPA CONTROL NEGATIVO: Escherichia coli

Curso de Bacteriologa

28

IDENTIFICACIN PRESUNTIVA
CARACTERSTICAS DE CRECIMIENTO
42C 48 h de incubacin Microaerofilia

MORFOLOGA DE LA COLONIA
(Colonia invasora)

MORFOLOGA MICROSCPICA
Gram (bacilo Gram curvo) Contraste de fase (bacilo curvo, mvil)

CATALASA (+) OXIDASA (+)

Nuestro aislamiento corresponde a Campylobacter sp.


Curso de Bacteriologa

29

IDENTIFICACIN DEFINITIVA (determina especie)


TEMPERATURAS DE CRECIMIENTO
crecimiento a 26 37 y 42C

SUSCEPTIBILIDAD A CEFALOTINA Y CIDO NALIDXICO PRUEBAS BIOQUMICAS


hidrlisis del hipurato hidrlisis del indoxil acetato
produccin de H2S reduccin de NO3y otras

Nuestro aislamiento corresponde a alguna de las especies del gnero Campylobacter


Curso de Bacteriologa

30

CAMPYLOBACTER: TEMPERATURAS DE CRECIMIENTO

ESPECIE C. jejuni ssp. jejuni C. jejuni ssp. doylei

26 C
-

37 C + +

42 C
+ + +

C. coli
C. lari C. upsaliensis C. fetus ssp. fetus
C. fetus ssp. venerealis

+
+ + + +

+ + Curso de Bacteriologa

+
v v
31

C. hyointestinalis

V = variable

ALGUNAS PRUEBAS DE IDENTIFICACIN DE CAMPYLOBACTER C. fetus C. jejuni C. jejuni C. coli C. lari C. upsafetus jejuni doylei liensis
Catalasa + + + + + d/-

Red. NO3
H2 S Hipurato

+
-

+
+/+

+
-

+
+ -

+
-

Indoxilacet.
Crecim. 25C Crecim. 37C Crecim. 42C Sens. c. Nal. Sens. Cefalot.

+ + R S

+
+ + S R

+
+ S S
Curso de Bacteriologa

+
+ + S R

+ + R R

+
+ V R V
32

Patogenicidad de Campylobacter
Pases desarrollados: Diarrea c/septicemia: Pacientes c/diarrea: Tratamiento antibitico:
Inoculacin Experimental:

Ms frecuente en pacientes con diarrea Hemocultivos positivos Altos ttulos de Ac. homlogos Eritromicina Monos- perros- polloscerdos- becerros

Diarrea experimental en humanos


Curso de Bacteriologa

33

Infeccin Intestinal

Trasmisin: oral-fecal

Dosis infectante 5x102 a 106


Mecanismos defensivos del husped

Factores de virulencia

Curso de Bacteriologa

34

Mecanismos de virulencia

ADHERENCIA INVASIN

ENTEROTOXINA
CITOTOXINAS

Curso de Bacteriologa

35

Adhesinas

Protenas de membrana externa


Lipopolisacrido Flagelo

Curso de Bacteriologa

36

Curso de Bacteriologa

37

Campylobacter: produccin de enterotoxina Demostrada utilizando: Perfusin intestinal en ratas


transporte de electrolitos al intestino

Asa ligada en intestino de rata


aumento de fluido intestinal

Cultivos celulares (CHO)


efecto citotnico (aumento de AMPc)
Curso de Bacteriologa

38

PERFUSIN EN ASA INTESTINAL DE RATA

Dr. Heriberto FernndezUniversidadAustral de Chile / Facultad de Medicina / Instituto De Microbiologia Clinica


Curso de Bacteriologa

39

ASA LIGADA DE RATA

Dr. Heriberto FernndezUniversidadAustral de Chile / Facultad de Medicina / Instituto De Microbiologia Clinica


Curso de Bacteriologa

40

Clula CHO normales

Clula CHO elongadas por efecto de la enterotoxina

Curso de Bacteriologa

41

CDT +
Clula VERO normales C. jejuni C. coli 74.2% 64.7%

Curso de Bacteriologa

42

BIOTIPIA Y SEROTIPIA DE

Campylobacter

Curso de Bacteriologa

43

BIOTIPIA DE Campylobacter

Curso de Bacteriologa

44

Esquemas propuestos para biotipia de Campylobacter


Hidrlisis del Hipurato y la Prueba Rpida para H2S.
M.B. Skirrow and J. Benjamin. 1980. Differenciation of enteropathogenic campylobacter. J. Clin. Path. 33:1122

Hidrlisis del Hipurato, Hidrlisis del DNA y Crecimiento en Agar

Extracto de Levadura y Carbn.

G.A. Hebert,

D.H. Hollis, R.E. Weaver, M.A. Lambert, M.J. Blaser and C.W.Moss 1982. 30 years of campylobacters: biochemical characteristics and a biotyping proposal for Campylobacter jejuni. J. Clin. Microbiol, 15: 1065 1073.

Prueba Rpida de Hidrlisis del Hipurato, Prueba Rpida de H2S

y la Prueba de Hidrlisis del DNA.


Lior, H. 1984. New extended Biotyping Scheme for Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, and Campylobacter laridis. J. Clin. Microbiol. 20:636-640

Curso de Bacteriologa

45

Esquema de Biotipia del Dr. Hermy Lior

Lior, H. 1984. New extended Biotyping Scheme for Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, and Campylobacter laridis. J. Clin. Microbiol. 20:636-640
46

Curso de Bacteriologa

BIOTIPIA DE Campylobacter
Para todas las pruebas de debe tener en

cuenta:
Utilizar cultivos que hayan crecido en Agar

Mueller Hinton Sangre. Incubadas a 37C o a 43C y Bajo condiciones de microaerofilia o con mezcla de gases recomendado para Campylobacters.

Curso de Bacteriologa

47

BIOTIPIA DE Campylobacter Esquema del Dr. H. Lior


PRUEBA RAPIDA DE HIDROLISIS DEL HIPURATO PRUEBA RAPIDA DE H2S

PRUEBA DE HIDROLISIS DEL DNA

Curso de Bacteriologa

48

PRUEBA RAPIDA DE HIDRLISIS DEL HURATO

Curso de Bacteriologa

49

Hidrlisis del Hipurato


H2O

cido hiprico
Hipuricasa (hidrolasa)

Benzoato de sodio + Glicina

Hidrlisis del cido Hiprico:


Deteccin del benzoato
Deteccin de glicina
Color prpura

cloruro frrico al 7% ninhidrina (oxidante)


CO2

ninhidrina residual + NH3

Curso de Bacteriologa

50

PRUEBA RAPIDA DE HIDROLISIS DEL HIPURATO


MATERIAL NECESARIO

Hipurato de sodio al 1% en H2O Ninhydrina al 3.5% en butanol acetona (1:1) preparacin fresca, cada semana.
Hipurato de sodio (0.1%)

Dispensar 0.4 mL de la solucin de hippurato

de sodio en tubos de 10 x 75 mm
Mantener los tubos tapados y congelados

(-20C) hasta su uso.

Los tubos Antes de ser usados, deben ser

descongelados y puestos a temperatura ambiente.


Curso de Bacteriologa

51

PRUEBA RAPIDA DE HIDROLISIS DEL HIPURATO


PROCEDIMIENTO

Colocar una pequea asada de cultivo de 24 a 48 Hrs. en el tubo con la solucin de hipurato de sodio.
Mezclar bien e incubar por 2 horas a 37C en bao mara. Luego, lentamente se agrega 0.2 mL del reactivo nynhidrina. NO SE DEBE MEZCLAR, reincubar por otros 10 minutos y leer. Un color prpura intenso (similar al cristal violeta) representa una reaccin positiva y la ausencia de color o un color prpura tenue indica una prueba de hidrlisis del hipurato negativa. Controles : + C. jejuni LIO 6; - C. coli LIO 8

Lior, H. 1984. New extended Biotyping Scheme for Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, and Campylobacter laridis J. Clin. Microbiol. 20:636-640

H. wang, M.N. 1975. Rapid hippurate hydrolysis method for presumptive identification of Group B Streptococci. J. Clin. Microbiol. 1:114-115

52

Curso de Bacteriologa

PRUEBA RAPIDA DE HIDROLISIS DEL HIPURATO


Hidrlisis del Hipurato positivo Hidrlisis del Hipurato negativo

Curso de Bacteriologa

53

Curso de Bacteriologa

54

PRUEBA RPIDA DE H2S

Curso de Bacteriologa

55

Prueba Rpida de H2S


MATERIAL NECESARIO El medio FBP Agar ha sido modificado como sigue A : Caldo Brucella (GIBCO) 2.9 g Na2HPO4 (anhidro) 0.118 g K H2PO4 (Anhidro) 0.023 g Agar (L28-Oxoid) 0.2 g H2O 97 mL Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 15 lb y dejar enfriar a 45C. Prepare separadamente las siguientes soluciones en agua destilada y esterilice con filtro: B Sulfato ferroso 7H2O 10% C Metabisulfito de sodio 10% D Piruvato de sodio 10%

Curso de Bacteriologa

56

Preparacin del Medio FBP Agar modificado


Mezcla B+C+D
1 mL sol B + 1 mL sol C 1 mL sol B

A Medio base Caldo Brucella (GIBCO) Na2HPO4 (anhidro) K H2PO4 (Anhidro) Agar (L28-Oxoid) H2O
1 mL sol B +

2.9 g 0.118 g 0.023 g 0.2 g 97 mL

1 mL sol B

1 mL sol B + 1 mL sol C

Mezclar bien

1 mL sol C + 1 mL sol D

Medio Base A
B Sulfato ferroso 7H2O C Metabisulfito de sodio D Piruvato de sodio 10% 10% 10%

1 mL sol B

1 mL sol C

1 mL sol D
Ajustar el pH a 7.3, dispensar asepticamente 3 mL en tubos estriles 13x100 con tapa rosca. Preparar medios frescos cada dos semanas.
Curso de Bacteriologa

57

Prueba Rpida de H2S


PROCEDIMIENTO

Coloque un inculo grande semejante a una bolilla (con un asa de 5 mm de dimetro) de un cultivo de 24 horas en el tercio superior del medio de cultivo. NO MEZCLE.

Incube en baomara a 37C por 2 horas.


El ennegrecimiento alrededor de la masa bacteriana representa una reaccin positiva, usualmente comienza aparecer entre los 30-45 minutos.

USE SOLO CULTIVOS DE 24 HORAS. La reproducividad con cultivos de 48 horas es muy pobre.
Controles : + C. jejuni LIO 6; - C. jejuni LIO 1

Lior, H. 1984. New extended Biotyping Scheme for Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, and Campylobacter laridis. J. Clin. Microbiol. 20:636-640

Curso de Bacteriologa

58

H2S negativo

H2S positivo

Curso de Bacteriologa

59

HIDRLISIS DEL DNA

Curso de Bacteriologa

60

DNasa cido Desoxyrribonucleico DNA depolimerizado

zonas claras alrededor de la siembra

Curso de Bacteriologa

61

Prueba de Hidrlisis del DNA


MATERIAL NECESARIO Agar DNA Azul de toluidina Modificado cido Desoxyrribonucleico (DIFCO DNA Cat#3321-12-1) 0.3 g 0.01 M Cloruro de Calcio 1 mL Cloruro de sodio 10.0 g 6.5 mL Agar Oxoid L 28 0.05M Buffer TRIS pH 9.0 * 1000 Ml

Coloque todos los ingredientes en un matraz y caliente hasta que el DNA y el agar estn completamente disueltos Enfre a 50C y agregue Azul de toluidina "O" al 3% 2.5 mL (Fisher Scientific Certified Stain CAT# T-161) Mezcle bien y distribuya en placas Petri 25 mL en cada una NO REQUIERE ESTERILIZACION.

Curso de Bacteriologa

62

Prueba de Hidrlisis del DNA


PROCEDIMIENTO En la placa de Agar DNA- Azul de Toluidina modificado* Se inocula con un asa de 3 mm de dimetro y en un rea circular pequea, a partir de cultivos de 24 - 48 horas. Incubar 43C bajo condiciones de atmsfera de mezcla de gases recomendado para Campylobacters por 24 a 48 horas. Una zona clara incolora o algo rosada alrededor del inoculo es considerado una reaccin positiva. En una placa se pueden probar varios cultivos y se debe incluir controles, positivo y negativo. Control Positivo = C. jejuni LIO 36

Curso de Bacteriologa

63

Curso de Bacteriologa

64

Curso de Bacteriologa

65

SEROTIPIA DE

Campylobacter

Curso de Bacteriologa

66

Esquemas de Serotipia de Campylobacter


Sistema Penner y Hennessy: detecta antgenos somticos

termoestables; puede identificar 60 serotipos de C. jejuni y C. coli.

Penner, J.L., Hennessy, J.N. 1980. Passive hemagglutination technique for serotyping Campylobacter fetus subsp. jejuni on the basis of soluble heat-stable antigens. J. Clin. Microbiol. 12: 732-737

Sistema Lauwers S., Vlaes L. and Butzler J.P.: detecta antgenos

somticos termoestables; puede identificar 42 serotipos de C. jejuni y C. coli.

Lauwers S., Vlaes L. and Butzler J.P. 1981 Campylobacter serotyping and epidemiology, Lancet, 1,158

Sistema Lyor: detecta antgenos flagelares termolbiles; puede

identificar ms de 100 serotipos de C. jejuni, C. coli y C. lari.

factors.

Lior, H.D. et al. 1982. Serotyping of Campylobacter jejuni by slide agglutination based on a heat-labile antigenic J. Clin. Microbiol. 15: 761-768.

Curso de Bacteriologa

67

68 Curso de Bacteriologa

SEROTIPIA DE Campylobacter jejuni y Campylobacter coli


MATERIAL NECESARIO DNasa (10 mg /vial DNasa Bovina pancretica Grade II N de Catalogo 104 159
(EC3.1.21.1)

Boehringer Mannheim, Alemania)

Solucin Stock DNasa PBS 0.1%


Agregar aspticamente 10 mL de PBS al vial, mezclar bien y

dispensar en tubos de tapa rosca alcuotas de 1 mL, mantener congelado a -20C.


Solucin de trabajo DNasa -PBS
Diluir 1 mL de la solucin stock con 4 mL de PBS Dispensar alcuotas de 0.5 mL en tubos con tapa rosca Los tubos que no estn en uso se deben mantener

congelados a -20C
Curso de Bacteriologa

69

MATERIAL NECESARIO Buffer Fosfato Saline 0.01M , pH 7.2 (PBS). PBS-Merthiolate 1:10,000 NaCl al 2% Lminas de vidrio (300 mm x 150 mm x 3 mm) Placas de Petri 90 x 15 mm Asas de siembra de 2 mm de dimetro Mezcla de gases 5% O2, 10% CO2, 85 % N2 (Skirrow) Medio de cultivo: Mueller Hinton con 5% de sangre de carnero en placas de Petri

Curso de Bacteriologa

70

PROCEDIMIENTO
Previamente antes de realizar la serotipia:
Los cultivos debern ser sembrados en placas de

Mueller Hinton sangre (frescas y hmedas) e incubadas a 37C por 48 horas en atmsfera de mezcla de gases recomendado para Campylobacters.

Curso de Bacteriologa

71

Campylobacter en Mueller Hinton sangre 5%

Curso de Bacteriologa

72

Campylobacter en Mueller Hinton sangre 5%

Curso de Bacteriologa

73

SEROTIPIA DE Campylobacter jejuni y C. coli POR AGLUTINACIN EN LMINA


1. Verificar que el cultivo no este rugoso
En una lmina colocar una gota pequea (10-20 mL) de DNasa y hacer una suspensin bacteriana con el cultivo. Agregar 1 gota (50 ml) de ClNa al 2% y chequear si autoaglutina o no. Si el cultivo esta rugoso, resembrar y volver a probar.

2. Si el cultivo esta liso se procede de la siguiente manera:


Colocar una gota pequea (10-20 ml) de DNasa-PBS en cada uno de 5 rectngulos en la lmina. Emulsificar una pequea asada del cultivo con DNasa-PBS. Agregar (50 ml) de cada pool (1-4) de antisueros y con un mondadiente o con el asa mezclar bien en sentido longitudinal. Mover lmina con movimientos de vaivn por 45 segundos. LEER LA PRUEBA DE INMEDIATO Los resultados obtenidos despus de 1 minuto o las reacciones dbiles, podran representar reacciones cruzadas. Si no se observa aglutinacin con los pools 1 a 4, repetir el procedimiento con los pools remanentes (5 a 16)

Curso de Bacteriologa

74

3. Lectura de Resultados
Utilizando iluminacin indirecta sobre un fondo negro, registre el grado de aglutinacin como sigue:
= ligera aglutinacin y el fluido turbio 1+ = cerca del 25% de clulas aglutinadas y el fluido turbio. 2+ = cerca del 50% de clulas aglutinadas y el fluido es moderadamente turbio. 3+ = aproximadamente el 75% de las clulas aglutinadas y el fluido es ligeramente turbio. 4+ = todas las clulas estn aglutinadas y el fluido es claro.

El ttulo del antisuero en los pools es usualmente definido como una dilucin menor que la dilucin ms alta que muestre 3+ o una aglutinacin ms fuerte en 1 minuto.

4. INTERPRETACION DE RESULTADOS

Los antisueros no absorbidos en los pools, contienen aglutininas para antgenos heterlogos de Campylobacter jejuni y C. coli. Podran producir reacciones de aglutinacin en ms de un pool. Los pools estan diseados solo para screening. Los serogrupos son identificados con antisueros monovalentes y confirmados por antisueros absorbidos. Los antisueros han sido agrupados en lo posible para reducir la ocurrencia de reacciones en varios pools. A veces las reacciones en ms de un pool podra deberse a la presencia de ms de un serotipo en el mismo cultivo. Esto se puede resolver haciendo la serotipia a partir de una clona de colonias individuales.

Curso de Bacteriologa

75

Esquema de la Serotipia de Campylobacter


Serotipo LIO 36

DNasa - PBS

DNasa - PBS

DNasa - PBS

DNasa DNasa - PBS - PBS

Curso de Bacteriologa

76