Mtodos de coleta, preservao e processamento de amostras fecais

A deteco e identificao dos parasitas intestinais est diretamente relacionada com a qualidade da amostra entregue no laboratrio.

Fatores considerados:

tipo de recipiente utilizado para colheita; idade da amostra; volume de material; utilizao de medicamentos interferentes.

Coleta das fezes

Fezes lquidas ou formadas A colheita deve ser realizada diretamente no frasco ou em papel limpo e transferida imediatamente para o frasco. A colheita no deve ser feita do vaso sanitrio ou do solo.

No contaminar com urina

Quantidade mnima de amostra por frasco Colher 3 amostras

Alguns parasitas apresentam intermitncia na eliminao das formas parasitrias. Ex. Giardia lamblia

As amostras encaminhadas ao laboratrio devem vir acompanhadas da requisio mdica e devem trazer informaes no frasco como:

nome do paciente nmero de identificao idade data e horrio da colheita nome do mdico (opcional)

Estabilidade das amostras:

A Lquidas: 30 minutos A Pastosas: 1hora aps a evacuao A Slidas: at 24 horas

Preservao das amostras:

A Refrigerao (3-5C):

preservao de ovos e cistos por vrios dias larvas de Strongyloides stercoralis e de ancilostomdeos podem sofrer alteraes morfolgicas, assim como trofozotas de protozorios.

Preservao das amostras:

A Utilizao de fixadores ou conservantes:

Formaldeido 5% MIF (mertiolato-iodo-formaldedo) SAF (acetato de sdio-cido actico-formaldedo) APV (lcool polivinlico) Schaudinn Para oocistos de coccdeos: formaldedo 10% ou bicromato de potssio

Exame de Fezes
Anlise Macroscpica
So analisadas caractersticas consistncia, cor e odor como

* Permite a observao de vermes adultos como Ascaris lumbricoides, Enterobius vermiculares, Trichuris trichiura e proglotes de Taenia sp.

Exame de Fezes - Procedimentos

I. Mtodo Direto
Observao de pequena amostra fecal misturada com soluo salina
* Procedimento eficaz apenas nas infestaes macias. um mtodo bastante econmico, mas requer bastante prtica por parte do examinador. Deve ser utilizado juntamente com outras tcnicas.

Leitura das lminas:

Objetivas menores para objetivas maiores

II. Mtodos de Enriquecimento

1. Mtodo de Sedimentao (Lutz, Hoffman, Pons e Janer)

Princpio: Sedimentao espontnea

Finalidade: Mtodo de escolha para a pesquisa de ovos pesados, sendo muito til tambm para a pesquisa de outros ovos e larvas de helmintos e cistos de protozorios.

II. Mtodos de Enriquecimento

2. Mtodo de Faust e colaboradores

Princpio: Concentrao baseado na centrifugo-flutuao em sulfato de zinco de densidade 1,180.

Finalidade: Tcnica especfica para cistos de protozorios e ovos de helmintos (ovos de Schistosoma mansoni e ovos infrteis de Ascaris lumbricoides podem no ser evidenciados por esse mtodo).

II. Mtodos de Enriquecimento

3. Mtodo de Ritchie e colaboradores
Tambm conhecido por mtodo de concentrao em formlter. Princpio: Centrfugo-sedimentao. Finalidade: recomendado para cistos de protozorios e ovos de helmintos, incluindo os ovos de Schistosoma mansoni. * O Mtodo de Blagg e colaboradores (MIFC) semelhante ao mtodo
de Ritchie partindo de amostra de fezes preservada em conservante MIF

II. Mtodos de Enriquecimento

4. Mtodo de Willis
Princpio: Flutuao em soluo saturada de NaCl. Fundamenta-se na dupla propriedade de certos ovos de helmintos de flutuar em soluo de alta densidade e aderir superfcie de vidro. Finalidade: Ideal para a pesquisa de ovos leves e semi-leves de helmintos.

III. Mtodos para deteco de larvas

1. Mtodo de Baermann-Moraes
Princpio: Termotropismo e hidrotropismo das larvas.

Finalidade: Utilizada originalmente para isolar larvas de nematides do solo. Adaptada para a extrao de larvas das fezes, principalmente as de Strongyloides stercoralis.
* Recomenda-se a utilizao de fezes recm-colhidas, sem conservantes.

III. Mtodos para deteco de larvas

2. Mtodo de Rugai e colaboradores
Princpio: termotropismo e hidrotropismo positivos. Modificao do mtodo de Baermann Finalidade: Deteco de larvas de Strongyloides stercoralis. uma tcnica econmica, higinica e simples. Oferece vantagens e tem sido largamente utilizada.

IV. Mtodos de Contagem

1. Mtodo de Stoll
utilizado para avaliar quantitativamente as infeces causadas por ancilostomdeos. O nmero de ovos de outros helmintos tambm pode ser avaliado por essa tcnica e a quantidade de vermes albergada pelos pacientes calculada, levando-se em conta a consistncia das fezes atravs de constantes previamente estabelecidas.

IV. Mtodos de Contagem

2. Mtodo de Kato-Katz
Esta tcnica uma adaptao do mtodo de Kato-Mira para torn-la quantitativa. simples e de fcil execuo, sendo o mtodo de escolha para a pesquisa de helmintos, sobretudo Schistosoma mansoni.
* No recomendado para contagem de ovos de ancilostomdeos e Hymenolepis nana (aps uma hora de preparo) ou para visualizao de protozorios e larvas de helmintos.

Protozorios intestinais

Amebase: Entamoeba coli: colite amebiana, constirpao e diarria, e perodos assintomticos. Trs tipos: Entamoeba coli, Entamoeba hartmanni e Entamoeba histolytica Contaminao: alimentos ou gua

Protozorios intestinais
Cisto de Entamoeba histolytica

Cisto de Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar (1000 X) corado pelo lugol, caracterizado pela presena de dois ncleos (1) com cariossoma central (2), cromatina perifrica regular e vacolo de glicognio (3) pouco corado e difuso. Presena de clulas leveduriformes (4).

Figura A mostrando cisto com corpo cromatide em forma de agulha(1) que caracteriza a Entamoeba coli e Figura B mostrando cisto com corpo cromatide em forma de basto(2) caracterstico de Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar

Cisto de Entamoeba histolytica corada c/ hematoxilina frrica

Entamoeba coli

Cisto de Entamoeba coli (400X) corado pelo lugol, caracterizado pela presena de mais de quatro ncleos.

Cisto de Entamoeba coli

Cisto de Entamoeba coli (1000X) corado pelo lugol, mostrando corpo cromatide(1) em forma de agulha.

Protozorios flagelados

Giardia lamblia: giardase infeco parasitria do duodeno e jejuno; Constipao; Desconforto abdominal; Sndrome da m absoro: trofozoto

Protozorios flagelados Cistos de Giardia lamblia

Cistos de Giardia lamblia (400X) corados pelo lugol.

Cistos de Giardia lamblia (1000 X) corados pelo lugol, mostrando a presena de ncleos (1), axonemas (2) e corpos parabasais (3), em forma de vrgula, cruzando os axonemas.

Trichomonas vaginalis

Vaginite Prostatite Uretrite DST

Trofozoto de Trichomonas vaginalis

Trofozoto deTrichomonas sp, mostrando o ncleo e a membrana ondulante.

Isospora belli

Isosporase Sndrome de m absoro Contaminao oral-fecal

Oocisto de Isospora belli

Oocisto de Isospora belli a fresco com 1 esporoblasto (400X).

Oocisto de Isospora belli a fresco com 2 esporocistos (400X).