Dra. Mara de los A.

Sagredo N Docente de Inmunologa UPEA

COMPETENCIA
Analizar las propiedades de los componentes del complemento y su participacin en la respuesta inmune, as como la relacin de su deficiencia con la enfermedad, para elegir las pruebas de laboratorio tiles en la cuantificacin y evaluacin de su funcin

CONTENIDO
Introduccin Componentes del Complemento Vas de Activacin Actividades biolgicas del complemento Dao Tisular mediado por complemento El papel del complemento en la infeccin Mecanismos de regulacin del complemento Enfermedades causadas por deficiencias y activacin del C Cuantificacin de las protenas del C y su valoracin de su funcin

RESUMEN
Realiza importantes actividades biolgicas en la respuesta inmune: accin quimiotctica, opsonizante y ltica Participa en la eliminacin de complejos inmunes Cuando existe deficiencia de sus componentes o de sus protenas reguladoras, se producen enfermedades En el laboratorio contamos con pruebas que miden la concentracin de sus componentes y evalan su funcin

HISTORIA

INTRODUCCIN
Conejos se enferman de Antrax pero los perros no Suero de conejos destruye bacilo de antrax pero el suero de perros no

Experimentos contradictorios:

HISTORIA
En el siglo XIX Butchner y Pfeiffer reportan que el suero de animales infectados con Vibrio cholerae tenia la actividad de lisar al microorganismo infectante, pero no el suero de animales sanos. Jules Bordet (1895) descubri que la propiedad litica del suero dependa de 2 factores un anticuerpo llamado alexina, y el otro factor denominado complemento; adems demostr que era termolbil ( no resiste al calentamiento de 56 en 30 min)

HISTORIA
Ferrata (1907), comenz a caracterizar algunos de los componentes (C1 y C2)
Erlich, utiliz el trmino complemento para designar la actividad del suero que complementa la capacidad antibacteriana de los anticuerpos

DEFINICION
Es un grupo de protenas inactivas en circulacin cuya concentracin en el plasma es de 3gr/L y constituye el 15% de la fraccin de globulina. Se activa por tres vas: Clsica, alterna, va de la manosa lectina Esta activacin resulta en la produccin de fragmentos quimiotcticos, la opsonizacin, la cual facilita la fagocitosis de microorganismos, o bien la lisis que da lugar a la eliminacin del patgeno Permite la eliminacin de complejos inmunes

 El complemento es un conjunto de ms de 20 protenas plasmticas solubles (globulinas) que forman un sistema enzimtico en cascada. Est siempre presentes de forma inactiva. Se activan secuencialmente ante la presencia de complejos Ag-Ac o directamente por Ag. Al activarse un componente se escinde en dos fragmentos: Uno grande (b) y otro pequeo (a). Estas protenas reciben el nombre de complemento porque ayudan y complementan los mecanismos de respuesta inmune.

COMPONENTES DE COMPLEMENTO
Son glicopreotenas y se designan como componentes abreviados con la letra C y un nmero
C1 (C1q, C1r,C1s) 2 ltimos tienen actividad proteasa Varias protenas son divididas durante la activacin, y son designadas con sufijos: C3 : C3a y C3 b; C4,C2,C5 Finalmente participan C6, C7, C8 y C9

Clsica

COMPONENTES DEL COMPLEMENTO

Muchos de ellos con proenzimas (zimgenos) o enzimas inactivas que requieren de la rotura proteoltica para convertirse en enzimas activas

Tambin se requiere de un sistema inhibidor que regule la activacin, sin ste, el sistema estara activo permanentemente y se producira la muerte

COMPONENTES DEL COMPLEMENTO

Alterna Va de las lectinas FINAL

Factores B, , H y F

Protena de unin a manosa (MBP) Serin proteasa asociada a manosa 1 y 2 ( MASP)

Formacin de un complejo de ataque a la membrana (MAC) compuesto por C6, C7, C8 y C9, el cual construye un complejo lipoflico en la membrana celular, formando poros y causando lisis

COMPONENTES DEL COMPLEMENTO

Componentes : C1q, C1r, C1s, C4, C2, C3, C5, C6, C7, C8, C9, Properdina, Factor B, Factor D. Inhibidores : C1q esterasa, DAF, CR1 (CD35), MCP, Factor H, Factor I, CD59

COMPONENTES DEL COMPLEMENTO

C3,C6,C9,C1,I NH P

C6,C8

C1

C1-C5,B,D,P,H eI

C3 - C9

SITIOS DE PRODUCCION DE LOS FACTORES DEL C

Nomenclatura
Zimgeno : Enzima que se activa al ser separada (descubrir el sitio activo) Componentes a y b : a = fragmento pequeo y b = fragmento grande (excepto C2) (Roitt / Abbas) Subrayado : Enzima activa (antes = unin de varios componentes) Asterisco (*) : inestable

Zimgeno

Inestable..Estable

b*

VIAS DE ACTIVACION

Clsica

Alterna De la lectina de unin a manosa

VIA CLASICA
Activada por complejos inmunes
Unin de Ig y Ag
Ag

Inmunoglobulinas :
IgG (2 molculas : IgG1,IgG2 3) IgM

Ag

Fc

C1q
C1r (2) C1s

(2)

VIA CLASICA

IgG4 IgE IgA IgD

VIA CLASICA

Convertasa del C3

VIA CLASICA
C3 a :
Amplifica la respuesta inflamatoria
Incrementa la permeabilidad capilar Contrae la musculatura lisa Induce la liberacin de histamina por parte de los mastocitos

ANAFILOTOXINA

VIA CLASICA

C4b2a3b

VIA CLASICA
C4b2a3b activa a C5 formando C5a y C5b C5a = ms potente anafilotoxina C5b se estabiliza con C6 y C7 (unin a membrana) C5b67 se unen a cadena beta de C8 Se activa a C9, que permite la formacin de una estructura tubular, capaz de producir dao permanente en la membrana celular
MAC = Complejo de ataque a membrana Canal transmembrana permeable a Na y H20

Explosin y muerte celular

VIA CLASICA

VIA ALTERNA O DE LA PROPERDINA

Tambin suele ocurrir en ausencia de Ag-Ac No participan los factores C1,C4,C2 El C3, los factores B,D,H,I y la properdina son los que ejecutan las funciones de reconocimiento, iniciacin y amplificacin; esto culmina en la generacin de C3 y C5 convertasa Activadores:
Lipopolisacridos Levaduras Inulina Virus Bacterias Hongos Protozoarios

VIA ALTERNA O DE LA PROPERDINA

Vida corta Se estabiliza cuando Interacciona con P

C3bBbP

C3bBbPC3b

VIA ALTERNA O DE LA PROPERDINA

Las convertasas de C3 y C5 son controladas por CR1, DAF, MCP, y por el factor H. A nivel de la activacin de C3 convergen las vas clsicas y alternas

VIA DE LA LECTINA DE UNION A MANOSA (MBL)

La lectina que se une a la manosa (MBL) se parece estructural y funcionalmente al subcomponente C1q MASP-1 y MASP-2 (Proteinasa de serina asociada a MBL), son similares a C1r y C1s MBL es un miembro de la familia de las lectinas calcio dependientes (colectinas) y se enlazan a otros polisacridos neutros como manosa, N acteilglucosamina, N acetilmanosamina, fructuosa, maltosa y glucosa, a travs del dominio carboxiterminal.

VIA DE LA LECTINA DE UNION A MANOSA (MBL)

MBL se une a los CHO bacterianos (equivale a C1q) Al unirse a los CHO activa a MASP y MASP2 (funcionan como C1r y C1s) MASP activa a C4 y C2

CHO-CHO-CHO-CHO

MASP1

MBL
MASP2

Anafilotoxina

MASP

C4a C4b *

Opsonina

C2b

MASP
C2a

C4b

Convertasa de C3

Anafilotoxina

C3a C3b *

C4b

C2a

Opsonina

Anafilotoxina

C5a C5b

C4b

C2a

C3b

C6

C7

C8

C5b

C9n

C9

ACTIVIDADES BIOLOGICAS DEL COMPLEMENTO

Incremento de la permeabilidad vascular.- C3a y C5a,

interactan con sus receptores presentes en las clulas cebadas y basfilos, induciendo desgranulacin y provocando que las sustancias vasoactivas se liberen

Quimiotaxis.- C3a yC5a poseen actividad quimioatractante sobre neutrfilos,, basfilos, eosinfilos y monocitos a travs de la interaccin con sus receptores de membrana C3aR y C5aR. Esta unin estimula el movimiento de las clulas, as como el metabolismo osxidativo y la liberacin de enzimas hidrolticas

Opsonizacin
Principales opsoninas

C3b

iC3b
receptores

Neutrfilos y Macrfagos

CR1

CR3
Mac-1

CR4
Facilita adherencia de los microorganismos a los leucocitos Estimular exocitosis de grnulos Ayudan a la transduccin de seales para estimular la capacidad fagoctica.

C4b

Via Clsica

Lisis Celular
MAC
Bacterias Gram Parsitos Virus encapsulados Eritrocitos Clulas nucleadas

Eliminacin de complejos inmunes

Los complejos Ag-Ac que circulan solubles en sangre son potencialmente peligrosos, ya que pueden depositarse en algn tejido causando la activacin del C. Estos complejos se unen a los eritrocitos a travs del receptor CR1, y por otro lado, al factor C3b, de modo que cuando los GR atraviesan hgado o bazo son fagocitados por los macrfagos a travs de sus receptores para C3b( Cr1, Cr2, CR3b) o Fc de las Igs

Accin reguladora de la respuesta inmune

C3b son reguladores de la respuesta inmune Cuando estn unidos a la membrana, facilita la cooperacin entre las clulas inmunes y actan en la estimulacin de LT y LB, debido a su capacidad de promover la adhesin clula- clula. El macrfago cuenta con receptores del C, lo que permite su unin con el Ag

Actividades biolgicas del complemento

C3a y C5a C3a y C5a C3b MAC C3b C3b

Aumento de la permeabilidad vascular

Quimiotaxis
Opsonizacin
Lisis celular Eliminacin de complejos inmunes

Accin reguladora, facilita la cooperacin celular

DAO TISULAR MEDIADO POR C

Inf. Agudas, Crnicas, Enf Autoinmune

Estimula la formacin de Ac
Ac Ac ----- Activa C Endotelio vascular Glomrulos renales Plexos coroideos Articulaciones

Dao tisular

Mecanismo de regulacin del sistema del C

Es regulado por diversos mecanismos y molculas, cuyo objeto es evitar la lisis de clulas autlogas.
Baja concentracin y labilidad de muchos de los factores del C
Inhibidor de la C1 esterasa (C1 INH) Inhibidor de C4
Inhibe la formacin de C3b convertasa Edema angioneurtico hereditario

Factor C4BP, Factor I (FI)

Inhibidor de C3

Factor H (FH)

Glomerulonefritis membranosa tipo II

Mecanismo de regulacin del sistema del C

Inhibe la formacin del MAC Capacidad del MAC de lisar clulas

Protena S (vitronectina), CD59, Factor de restriccin HRF

Protena Sp 40,40

El papel del complemento en la infeccin

Puede realizar funciones de defensa contra infecciones
Cubren a los microorganismos para que stos puedan ser ingeridos con mayor facilidad por los fagocitos Mandan seales quimiotcticas para atraer a los fagocitos al los lugares de la infeccin Lisis celular en la superficie de los microorganismos
Cuando existe deficiencia de la actividad de opsonizacin, De la actividad ltica o de la va de activacin de la MBL, Se incrementa la susceptibilidad a las infecciones pigenas

El papel del complemento en la infeccin

Deficiencia en la actividad de opsonizacin C3b, C3bi: Son opsoninas importantes en la defensa contra bacterias ( Haemophilus Influenzae, Streptococcus pneumoniae Deficiencia en la actividad ltica La deficiencia del MAC predispone la infeccin por Neisseria Meningitidis. (Est relacionada con brotes epidmicos de meningistis)

El papel del complemento en la infeccin

Deficiencia de la MBL Existe un solo gen que codifica para la protena MBL y se localiza en el cromosoma 10; se han descrito algunos polimorfismos en la regin del promotor y del mismo gen, as como tres mutaciones puntuales. Estas variaciones se asocian con defectos en la expresin y por consecuencia en la activacin del C

Enfermedades causadas por deficiencia y activacin del C

La evidencia clnica y experimental seala que el C juega un papel importante en enfermedades por inmunodeficiencia del C Y en la patognesis de numerosas enfermedades inflamatorias

DEFICIENCIAS HEREDITARIAS DE COMPLEMENTO

DEFICIENCIA DE INHIBIDORES DEL COMPLEMENTO

ANGIOEDEMA HEREDITARIO Deficiencia de C1 INH Autosmica dominante Tipo I y II Dx: cuadro clnico Cuantificacin de C1 inhibidor,C4 (disminuidos) y C3 (normal)

DEFICIENCIA DE INHIBIDORES DEL COMPLEMENTO

GLOMERULONEFRITIS MEMBRANOPROLIFERATIVA Deficiencia o disfuncin del Factor H ( tipoII) Consumo exagerado de la va alterna. Niveles bajos de CH50 y C3

DEFICIENCIA DE INHIBIDORES DEL COMPLEMENTO

HEMOGLOBINURIA PAROXISTICA NOCTURNA Deficiencia del factor regulador CD59 Ej: consecuencia de la incapacidad de regular la formacin de MAC Hemlisis intravascular, hemoglobinuria y tendencia a la trombosis vascular Dx: lisis cida o anlisis por citometra de flujo (DAF y CD59)

Enfermedades causadas por activacin del C

Se asocia a activacin del complemento, donde participan mecanismos efectores de dao tisular despus de una respuesta inflamatoria
SIRS SDOM Sindrome de isquemia por reperfusin Angioedema Sindrome de escape capilar Rechazo agudo o hieragudo Vasculitis, nefritis Enfermedades autoinmunes Incompatibilidad al biomaterial

Cuantificacin de C3 y C4
Inmunodifusin radial Tcnicas de nefelometra Tcnicas inmunoenzimticas (ELISA) (cantidades, pero no funcin) Funcin del complemento Va clsica CH50 Funcin del complemento Va alterna AH50