CROMATOGRAFA

En 1850 el qumico alemn F.F.Runge, que trabajaba con tintas, descubre que los cationes orgnicos se podan separar por migracin cuando se colocaba una solucin que los contena sobre un material poroso, como papel . En 1906 el botnico ruso M. Tsvet utiliz la cromatografa de columna para separar extractos vegetales coloreados.

A partir de 1940 los mtodos cromatogrficos adquieren extensin mundial. En 1940 Tiselius divide los mtodos cromatogrficos en cromatografa por anlisis frontal, desarrollo por elusin y desarrollo por desplazamiento, obtuvo el premio Nbel por sus trabajos en 1948. Para el mismo tiempo la cromatografa comienza a aplicarse en el campo de la bioqumica.

Es un conjunto de tcnicas basadas en el principio de retencin selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.

Fase Mvil

Consiste en un liquido o gas que es arrastrado a travs de la fase estacionaria

Fase Estacionaria

Consiste en un solido o un liquido anclado a un soporte solido por donde el cual pasa la fase mvil

En Papel Plana En Capa Fina TIPOS DE CROMATOGRAFA Intercambio Inico

En Columna

Por Exclusin Molecular Por Afinidad

En Capa Fina:

Una fase mvil (normalmente un disolvente) y una fase estacionaria (la llamada capa fina que puede ser papel o gel de slice). Separar componentes puros. Se analizan mezclas de aminoacidos.

En Papel:
La fase estacionaria se representa por un papel filtro y la mvil por un disolvente. Anlisis cualitativos.

Intercambio Inico: En este tipo de cromatografa la fase estacionaria tiene grupos cargados que interaccionan electroestticamente con iones de signo contrario de la fase mvil.

Por Exclusin Molecular: Es un mtodo por el cual las molculas se separan en solucin segn su peso molecular. Separa protenas segn su tamao La fase solida consiste en pequeas perlas que contienen unos poros o cavidades de tamao calibrado. La protenas de mayor tamao no pueden entrar en las cavidades . Las protenas mas pequeas penetran en las cavidades.

Por Afinidad: Este mtodo permite la separacin de las mezclas proteicas por su afinidad o capacidad de unin a un determinado ligando

La cromatografa de lquidos de alta eficacia es la tcnica analtica de separacin mas ampliamente utilizada. Las razones de popularidad de esta tcnica son su sensibilidad, su fcil adaptacin a las determinaciones cuantitativas exactas, su idoneidad para la separacin de especies no voltiles o termolbiles.

Cromatografa de Participacin: Es una de las tcnicas que mas se emplea en HPLC. La fase estacionaria es un segundo liquido inmiscible con la fase mvil liquida. Este liquido se une a la superficie de un empaque solido finamente dividido mediante adsorcin o enlaces qumicos.

Se clasifica en dos tipos :

1. Cromatografa de particin de fase normal: se emplean fases estacionarias muy polares trietilenglicol o agua; la fase mvil es un disolvente no polar como el hexano o ter iproplico. En la fase normal sale primero el componente menos polar; en el incremento en la polaridad de la fase mvil disminuye, por tanto, el tiempo de elucin. Cromatografa de particin de fase reversible: utiliza una fase estacionaria no polar que por lo general es un hidrocarburo. La fase mvil es un disolvente polar como agua, metanol o acetonitrilo. En la fase reversa sale primero el componente mas polar; el tiempo de elucin aumenta a medida que aumenta la polaridad de la fase mvil.

2.

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