Q. F. B.

: Guadalupe Salom

ANTIBIOGRAMA :
CONCEPTO
Es la tcnica actualmente utilizada para la determinacin de la sensibilidad a los antimicrobianos frente a un microorganismo en cuestin.

PRINCIPIO
La cantidad constante de antimicrobiano en un reservorio(disco de papel) aplicado sobre la superficie del Agar en el cual se ha cultivado un microorganismo. Se formara as por difusin, un gradiente de concentracin del antimicrobiano y la sensibilidad del microorganismo estar indicada por tamao el tamao de la zona de inhibicin del crecimiento.

 El dimetro obtenido depender no slo de la sensibilidad del microorganismo y la carga del disco, sino tambin del espesor de la capa de agar, su pH. y su composicin, de la capacidad de difusin de la droga en este medio, la temperatura, la velocidad de duplicacin bacteriana, y el tamao y fase de crecimiento del inculo.

Mtodos de Antibiograma
Existen 2 mtodos :
A. POR DIFUSION : - Met.. Disco Placa ( Kirby Bauer) - Met. Epsilon Test B. POR DILUCION : - Met. Dilucin en Agar.

- Met. Dilucin en Caldo

MET. POR DIFUSION:

1. MET.DISCO PLACA O KIRBY-BAUER :

Consiste en depositar una cantidad constante de antimicrobiano en un reservorio sobre una superficie previamente inoculada y tan pronto como el disco impregnado de Atb toma contacto con el agar, este difunde en forma radial.

 AGAR MUELLER HINTON : Medio que no posee inhibidores y donde crece la mayora de patgenos.

- Libre de iones y concentracin regulada de iones divalente Ca, Mg y Zn.

- Posee alta reproducibilidad lote a lote. - Bajo nivel de Timina y Timidina.

Caractersticas del Medio : . pH : 7.2 7.4 . Humedad . 4 mm de espesor en placas de 100 ml. . Controlar la esterilidad 24 h a 37C.

 El inculo: El inculo estandarizado, se puede preparar resuspendiendo colonias en solucin salina estril hasta alcanzar la turbidez de 0,5 de McFarland. Esta suspensin contiene 1-2x108 UFC/ml.

 Los Discos de ATB : Mantenerlos refrigerados a 8C Los discos que pertenecen a la familia de los betalactmicos pierden su potencia al estar frente al calor. Antes de colocar los discos deben de atemperarse y evitar su desecacin.

 Lectura de placas e interpretacin : Despus de 16 a 18 horas de incubacin examinar cada placa y medir los dimetros de las zonas de inhibicin.

En medios suplementados con sangre, se deber medir la zona de inhibicin del crecimiento, no la zona de inhibicin de la hemlisis.

Factores tcnicos que influyen en el tamao de la zona :

Densidad del inculo. Momento en que se colocan los discos. Temperatura y Tiempo de incubacin. Espesor del medio y separacin de discos. Potencia de los discos de Antibiticos.

MET. POR DIFUSION :

2. EPSILON- TEST :
Es una tcnica cuantitativa para la demostracin de la susceptibilidad antimicrobiana que es capaz de inhibir el desarrollo bacteriano. Las consideraciones de la prueba incluyen demostrar la eficacia clnica de un frmaco y resistencia.

2. EPSILN TEST

B.

MET. DE DILUCION

Mtodo que se basan en la determinacin del crecimiento del microorganismo en presencia de concentraciones crecientes del antimicrobiano que se encuentra diluido en el medio de cultivo. Estos mtodos se vienen usando para la determinacin de la CIM y la concentracin mnima bactericida.

Interpretacin de los resultados :

El clnico debe interpretar los resultados y seleccionar racionalmente los antibiticos ms apropiados para su paciente, conociendo la farmacocintica del antibitico, su vida media y datos de aislamientos bacterianos similares.

CONTROL DE CALIDAD : Cepas Control

E.coli ATCC 25922 S.aureus ATCC 29223 P.aeruginosa ATCC 27853

E.faecalis ATCC 29212

E.coli ATCC 35218 N.gonorrheae ATCC 49226

H.influenzae ATCC 49766

K.pneumoniae 700603

Antibiograma de Staphylococcus spp.

Antibiticos a incluir :
-Oxacilina -Eritromicina -Clindamicina -Vancomicina -Gentamicina -Ciprofloxacina

Antibiograma de Enterococcus spp

Antibiticos a incluir : -Ampicilina -Gentamicina(disco de 120 ug) -Estreptomicina(disco de 300 ug) -Vancomicina -Nitrofurantona

Antibiograma de Pseudomona aeruginosa

Antibiticos a incluir : -Ceftazidima -Cefoperazona/Sulbactam -Imipenem y/o Meropenem -Amikacina -Norfloxacina -Ciprofloxacina

Antibiograma de Enterobacterias
Antibiticos a incluir : -Ampicilina -Amoxicilina/Ac.clavulnico -Aztreonam -Amikacina -Ac.Nalidxico -Nitrofurantona

Antibiograma de Streptococcus pneumoniae

Antibiticos a incluir : -Oxacilina -Eritromicina -Cotrimoxazol -Levofloxacina -Vancomicina -Rifampicina

Antibiograma de Haemophilus sp
Antibiticos a incluir : -Ampicilina -Ampicilina/Sulbactam -Creftriaxona -Cotrimoxasol -Cloranfenicol -Cefepime

Antibiograma de Vibrio cholerae

Antibiticos a incluir : -Ampicilina -Cloranfenicol -Ciprofloxacina -Furazolidona -Tetraciclinina -Eritromicina

MICROORGANISMOS PROBLEMAS :
1.Deteccin de Resistencia en Staphylococcus.
- Resistencia a meticilina u oxacilina
- Sensibilidad reducida a vancomicina

2.Deteccin de Resistencia en Enterococcus.

- Resistencia a penicilina/ampicilina - Resistencia a vancomicina - Alto nivel de resistencia a aminoglucsidos.

3.Bacilos gram negativos productores de BLEEs.

4.Deteccin de Resistencia de St.pneumoniae 5.Deteccin de Resistencia de N.meningitidis

6.Deteccin de Resistencia de Haemophylus

7.Deteccin
de Resistencia no fermentadores. de microorganismos