INSTITUTO TECNOLGICO DE VERACRUZ

Anlisis Instrumental
Dr. scar Gonzlez Ros

Equipo 5

Castaeda Valle Edna Patricia Lendechy Lara Alexis Martnez Garca Valeria Mavil Pulido Warry Nelson Morales Martnez Laura Olivia Salas Banda Sandy Stefani

Historia
El botnico ruso Mijal Tsweet (Mikhail Semenovich Tsweet, 1872-1919) emple por primera vez en 1906 el trmino "cromatografa.

A comienzos del ao 1903, Mijail Tsweet us columnas de adsorcin de lquidos para separar pigmentos vegetales (por ejemplo clorofilas). Las disoluciones se hacan pasar a travs de una columna de vidrio rellena de carbonato de calcio, que finamente dividido de un material poroso que interacciona de forma diferente con los componentes de la mezcla, de forma que stos se separaban en distintas bandas coloreadas a lo largo de la columna.

Cromatografa de Adsorcin

Est basada en la diferente adsorcin y posterior desorcin de sustancias contenidas en un disolvente mvil (lquido o gas) sobre un slido estacionario. No se debe confundir la adsorcin que es un fenmeno de superficie que se manifiesta por el aumento de concentracin de la interfase que rodea al medio estacionario, con la absorcin que consiste en la penetracin de una sustancia en el seno de otra. Ejemplos de cromatografa de adsorcin son la cromatografa en columna de almina y de carbn activado, la placa de slica

gel.

Cromatografa Lquido-Slido (CLS)

La fase estacionaria est constituida por un slido polar poroso y que esta finamente granulado. La superficie especfica contiene centros polares aptos para la adsorcin de las molculas polares presentes en la fase mvil. Al disminuir el tamao de las partculas, el nmero de centros activos por unida es mayor, y la capacidad de adsorcin se incrementa. El adsorbente ms

utilizado es gel de slice aunque tambin se emplea almina activada. En el

caso del gel de slice la interaccin se establece entre los grupos Si-OH y Si-OSi, y los grupos funcionales polares de los compuestos orgnicos.

La fase mvil est constituida por un disolvente en el que los componentes de la mezcla deben ser al menos parcialmente solubles. La velocidad de elucin de un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la fase mvil y se

puede utilizar un gradiente de polaridad aumentando con el tiempo la

proporcin del disolvente ms polar.

Ejemplo: Cromatografa de Adsorcin en Columna (CC)

En la figura 1 se muestra esquemticamente una columna cromatogrfica. La fase estacionaria consiste en un slido adsorbente empaquetado en una columna de vidrio. La mezcla a separar (muestra) se deposita sobre la superficie superior de la fase estacionaria quedando adsorbida en ella. A continuacin, se permite el paso de la fase mvil (eluyente)a lo largo de la columna a travs de la fase estacionaria. Durante el proceso cromatogrfico los componentes de la muestra son arrastrados por la fase mvil a distintas velocidades efectundose la separacin. La velocidad de arrastre de cada componente depende de su grado de adsorcin en la fase estacionaria y de su afinidad por la fase mvil.

Para que la separacin de los componentes de la mezcla sea efectiva, su

velocidad de migracin a lo largo de la columna debe ser suficientemente diferente y la longitud de la columna adecuada. Algunos adsorbentes comnmente utilizados son: gel de slice, almina, sacarosa y almidn.

La fase mvil consiste en un disolvente o mezcla de disolventes, seleccionado en base a su polaridad con el fin de optimizar la separacin de los

componentes de la muestra en la columna. De forma orientativa se puede

establecer el siguiente orden de polaridades para los disolventes usados con mayor asiduidad:

ter de petrleo < ciclohexano < tetracloruro de carbono < benceno < cloroformo < cloruro de metileno < ter etlico < acetato de etilo < acetona < piridina < etanol < metanol < agua < cido actico

La fase mvil se desplaza a lo largo de la fase estacionaria debido a la fuerza de la gravedad. El proceso de cromatografa en columna consta de tres pasos: a) Preparacin de la columna: Empaquetamiento de la fase estacionaria en La columna. Se prepara una suspensin del adsorbente (fase estacionaria) en el eluyente (fase mvil) y se vierte en el interior de la columna. b) Siembra de la muestra: La muestra se deposita (siembra) en la superficie superior del adsorbente contenido en la columna con la ayuda de una pipeta. Si la muestra es lquida se puede sembrar directamente, si es slida se siembra una solucin concentrada de la misma en un disolvente adecuado (de baja polaridad). c) Desarrollo/Elucin de la columna: Una vez sembrada la muestra se permite el paso de la fase mvil a travs de la fase estacionaria y se van recogiendo fracciones consecutivas del eluyente, que sern examinadas posteriormente para determinar su composicin.