Gobierno Regional Hunuco

Treponema pallidium

SFILIS: PRUEBAS RPIDAS PARA MEJORAR EL ACCESO AL TAMIZAJE EN GESTANTES Y PREVENIR LA SFILIS CONGENITA EN LA REGIN DE SALUD HUNUCO
Mblg Gary Orlando Burgos Vela

PREVENCION DE LA SIFILIS CON EL USO DE LA PRUEBA RAPIDA

INTRODUCCION El Per es el 3 pas en Latinoamrica que tiene problema de sfilis; la cobertura de tamizaje en gestantes en su control prenatal no es el ptimo porque las pruebas diagnsticas demoran; y la baja cobertura del tratamiento para las positivas no hay informacin sobre el tratamiento de la pareja.

Ley 28243: Ley que amplia y modifica la Ley 26626 , tamizaje a todas las gestantes previa orientacin/consejera Seguro integral de salud (SIS), garantiza el acceso gratuito:
Atencin prenatal integral

Orientacin/Consejera
Diagnstico precoz (prueba rpida) Tratamiento profilctico Lactancia artificial

Objetivo General Determinar la exactitud diagnstica de las pruebas rpidas para sfilis, comparado con RPR, VDRL, TPHA. Objetivos especficos Implementar las PR, para el despistaje, por ser fciles de usar, rpidas, econmicas, no son especficas; comparadas con las pruebas de tamizaje (ELISA, RPR, VDRL) que demoran, son muy sensibles y las confirmatorias (TPPA, TPHA, FTA-Abs) que son muy especficas, son costosas, ms tiempo y complejas. Utilizar en los servicios de emergencia, en el parto, en el puerperio.

Pruebas de Diagnstico serolgico

Despistaje/ tamizaje
Rpidas Fcil Barato Muy sensible

ELISA VDRL RPR

La Prueba Rpida de sfilis es una prueba fcil, barata, sensible, especfica

Confirmatorias
Requieren mayor tiempo Costosas Complejas Especficas

Western Blot FTA-Abs TPPA TPHA

Ventajas de PRS / RPR -VDRL

Son simples, no requieren uso de equipos Puede usarse sangre total (sangre de pulpejo de dedo) Puede transportarse y guardarse a temperatura hasta 30C (no requiere refrigeracin)
SLO 1 HINCON: 2 PRUEBAS RPIDAS: Sifilis y VIH
- Entrega de resultados de PRS - Si PRS (+) Inicio de tratamiento

1er Contacto

No tienen falsos positivos, como el RPR en gestantes

No tienen efecto de prozona

PRs permiten tener resultados en 20 minutos e iniciar tratamiento el mismo da

Las PRS no distingue entre infeccin activa de sfilis o pasada tratada, por lo que se prefiere su uso en poblaciones de bajo riesgo como gestantes.

MATERIALES A UTILIZAR PR SIFILIS

PROCEDIMIENTOS DEL USO DE LA PR a) Colocar el instructivo plastificado sobre una superficie plana y limpia. b) Leer cuidadosamente el inserto de la prueba rpida para sfilis / VIH (volumen de la gota de sangre, vol. del diluyente y tiempo de lectura). c) Retirar los casset (PR) de su envoltura. d) Rotular el casset con plumn punta fina tinta indeleble, colocando el nombre y apellidos del paciente

d) TOMAR LA MUESTRA DEL PULPEJO DEL DEDO: desinfeccin y aplicar 01 slo hincn ( para las Prueba Rpida de Sfilis/VIH). e) Con una torunda de algodn seco retirar la gota de sangre del dedo. f) Para PR sfilis formar una primera gota de sangre y llenar el capilar hasta la marca indicada y colocarla en el pocillo del casset y enseguida formar una segunda gota de sangre para la prueba rpida de VIH siguiendo el instructivo.

g) En forma inmediata agregar las gotas del diluyente (buffer) segn inserto de las PR Sfilis/VIH. h) Cronometrar en el reloj 20 minutos para la lectura final ( colocar en el casset la hora de inicio y
hora final).

i) Leer los casset de las pruebas rpidas exactamente en el tiempo indicado. j) Usar la escala de intensidad de lnea de la prueba rpida para sfilis. k) Reportar y registrar los resultados.

l) Recuerde las medidas de bioseguridad y eliminacin de los residuos biocontaminados. ll) Interpretacin de los resultados: RESULTADO POSITIVO: se observa en el casset de las pruebas rpidas DOS LINEAS DE COLOR PURPURA lnea T (test) y lnea C (control) RESULTADO NEGATIVO : se observa en el casset una banda coloreada en la lnea C ( control ). RESULTADO INVALIDO : No aparece las lneas de color prpura en las bandas de control C. Se debe tomar nueva muestra del pulpejo del dedo.

INTERPRETACION DEL RESULTADO DE LA PRUEBA RAPIDA

R=POSITIVO
Lnea control C

R=NEGATIVO
Lnea control C

Lnea control T

Procedimientos para la Toma de Muestra

SELECCIN DEL DEDO (PULPEJO) DE LA MANO QUE MENOS SE UTILIZA

DESINFECCION DE LA ZONA ELEGIDA A PINCHAR ( Y DEJAR SECAR )

APLICAR EL PINCHAZO CON LA LANCETA EN LA ZONA ELEGIDA

DESCARTAR LAS 2 PRIMERAS GOTAS CON ALGODN SECO

1ra gota de sangre para SFILIS (Buena Gota)

2da gota de sangre para VIH (Buena Gota)

Casete de Sfilis

Casete de VIH

PRUEBA RPIDA DE SFILIS

PRUEBA RPIDA DE VIH

4
5

LEA EXACTAMENTE A LOS 20 MINUTOS

NOTA: DESPUES DE 20 MINUTOS PUEDE DAR FALSOS POSITIVOS

LEA Y REGISTRE S

Interpretacin de los Resultados

POSITIVO
Dos Lneas: lnea C lnea T

NEGATIVO
Solo la Lnea C

INVALIDO
No aparece la lnea C y puede aparecer la lnea T

Repetir la prueba

PRACTICA : PROFESIONALES DE LA SALUD QUE REALIZAN LOS PROCEDIMIENTOS PARA LA APLICACIN DE LAS PR PARA SIFILIS

1 MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD :

USO DE GUANTES

2 DESINFECCION DEL PULPEJO DEL DEDO ELEGIDO

3 Realizar la puncin para la extraccin de la gota de sangre (20 microlitros hasta la marca de la pipeta) y colocar en el pocillo del casett de la PR

4 colocar el diluyente (buffer) 4 gotas en el pocillo que contiene los 20 microlitros de sangre.

LECTURA E INTERPRETACION DE LA PR SIFILIS

TENER UNA BUENA AGUDEZA VISUAL

LA PRUEBA RAPIDA DEBE SER ROTULADA CON PLUMON PUNTA FINA TINTA INDELEBLE. LEER EXACTAMENTE EL TIEMPO DE HASTA 20 MINUTOS, INTERPRETAR Y DAR RESULTADO.

RECOMENDACIONES PARA EL ALMACENAMIENTO DE LAS PRUEBAS RAPIDAS

Almacenar el Kit en un rango de T de 2 a 30 C. Realizar la PR de inmediato luego de abrir la envoltura, porque es muy sensible a la humedad y al calor. No utilizar el Kit despus de la fecha de vencimiento.

CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS RAPIDAS DE SIFILIS

Objetivo
Dar a conocer la tcnica de la elaboracin del panel de muestras secas en tubo (Dried Tube Specimen o DTS ) Este panel ser usado como una prueba de suficiencia (proficency testing) para ayudar al monitoreo del control de calidad de las pruebas para el diagnstico de sfilis

Control de Calidad P.R

CONTROL DE CALIDAD INTERNO

CONTROL DE CALIDAD EXTERNO

Permite evaluar el Permite evaluar la procedimiento, lectura pruebas, en su correcto e interpretacin de los funcionamiento. resultados emitidos Si captan a los negativos por el personal de como negativos y a los salud que realiza la positivos como prueba positivos

CONTROL DE CALIDAD INTERNO Evala las pruebas rpidas Usa 2 DTS conocidos por el evaluador

CONTROL DE CALIDAD EXTERNO Evala procedimientos Usa 4 DTS desconocidos por el evaluado

Se usa un panel por cada lugar de almacenamiento Frecuencia: Se realiza cada 2 meses No se envan pruebas rpidas. Se usan las del establecimiento Se enva un DTS negativo y un DTS positivo 1:2

Se usa un panel por cada persona evaluada Frecuencia: Se realiza al menos 2 vez por ao Se enva una prueba rpida por cada DTS
Se enva un DTS Negativo, 1:2, 1:8, 1:32

Por que es tan importante el control

de calidad en las pruebas rpidas?

Para realizar el monitoreo, evaluacin y mejora. Proveer formas de prevenir, detectar y corregir problemas Reducir costos al evitar re-procesos Reducir errores en el proceso de las pruebas rpidas.

MATERIALES PARA EL CONTROL DE CALIDAD INTERNO

Materiales necesarios para el control de calidad de la PR

Azul de tripn (colorante) Bolsas de Buffer fosfato salino (PBS) Viales de 2.0 mL. Micropipetas de 0.5-10L , 20-200L y 200-1000L Puntas descartables de 10L, 200L y 1000L Sueros RPR positivos y negativos para sfilis

Pruebas para evaluar los DTS Kit de RPR Kit de TPPA o TPHA Tambin se puede usar otra prueba confirmatoria

Proceso de elaboracin de las muestras secas en tubo (DTS)

Procedimientos: Pre-Test
1) Preparacin del buffer del panel de DTS (Buffer PBS/Tween-20)

 Preparacin del azul de tripn

0.01g de azul de tripn X 10ml de buffer PT

3 Obtencin y anlisis de muestras(+ / -)

Realizar diluciones y aplicar reactivo de RPR

RPR 1:8

RPR 1:2

RPR 1:32

RPR -

RPR 1:8

RPR 1:2

RPR -

RPR 1:32

RPR -

RPR 1:2

RPR 1:8

RPR 1:32

RPR TPPA

Procedimiento: Test
Preparacin de viales DTS
1
Por cada 100 L de suero agregar 1 L de azul de tripn

2
Colocar 20 L de suero en la base de un tubo

3
Dejar secar el contenido del tubo a temperatura ambiente

4
Tapar el tubo y almacenar a 4C

 Control de calidad de los viales DTS preparados

5
Reconstituir el DTS

Incubar toda la noche y analizar con prueba rpida y/o TPPA

RECONSTITUCION DEL PANEL DE SUEROS DTS PARA EL CONTROL DE CALIDAD INTERNO DE LA PRUEBA RAPIDA DE SIFILIS

Panel de Suficiencia
1. 2. Un vial con Buffer PT y 2 viales con muestra (DTS) Asegurarse que hay un punto azul en el fondo del tubo DTS

2
3
1. 2. 3. 4.

Reconstitucin
Tomar el Buffer PT con un gotero y agregar 3 gotas a cada vial DTS

Incubacin
Luego de agregar el Buffer PT, tapar los tubos y mezclarlos con golpes suaves Dejar reposando a temperatura ambiente durante toda la noche Al da siguiente con un pequeo golpe, concentrar todo el liquido en la base del vial Seguir el procedimiento de la Prueba Rpida.

CONTROL DE CALIDAD EXTERNO

Materiales enviados con el panel
1 panel de sueros constituido por 4 viales DTS: A1 Negativo, A2 1:2, A3 1:8, A4 1:32 1 vial de Buffer PT (PBS / Tween) 1 pipeta descartable Guantes de ltex 4 casetes de la Prueba Rpida de Sfilis 4 capilares con marca para 20 L Instructivo sobre la Reconstitucin del Panel de Sueros para el Control de Calidad Externo de la Prueba Rpida de Sfilis . Registro de resultados Cartilla de la escala de intensidad de la lnea de PRS

RECONSTITUCIN DEL PANEL DE SUEROS DTS PARA EL CONTROL DE CALIDAD EXTERNO DE LA PRUEBA RPIDA DE SFILIS

Panel de Suficiencia
1. 2. Un vial con Buffer PT y 4 viales con muestra (DTS) Asegurarse que haya un punto azul en el fondo de los viales DTS

2
3
1. 2. 3. 4.

Reconstitucin
Tomar el Buffer PT y con un gotero agregar 3 gotas a cada vial DTS

Incubacin
Luego de agregar el Buffer PT, tapar los viales y mezclarlos con golpes suaves Dejar reposando a temperatura ambiente durante toda la noche Al da siguiente con un pequeo golpe, concentrar todo el liquido en la base del vial Seguir el procedimiento de la Prueba Rpida.

Material que se enviar para el Control de Calidad Interno

Material que se enviar para el Control de Calidad Externo

Procedimientos que debe realizar el personal de salud para aplicar el control de calidad

Procedimiento
1. Sacar el casete de su envoltorio y rotular

2. Tomar 20L del DTS reconstituido, con un capilar plstico

Procedimientos
3. Agregar 04 gotas del diluyente dentro del pozo de muestra 4. Leer exactamente a los 20 minutos (Nota: Mayor a 20 minutos puede dar falsos positivos). 5. Interpretacin tan igual cuando se aplica la PR.

EL PERSONAL DE LABORATORIO DE LA DIRESA, RED, MICRORED Cuntos DTS debo Preparar?

Cuntos DTS se debe Preparar?

CONTROL DE CALIDAD INTERNO : ejemplo CONTROL DE CALIDAD EXTERNO : ejemplo
N de personas que realizan la prueba rpida

N EESS 10 NEGATIVO 1:2 VOLUMEN TOTAL DTS 10 10

VOLUMEN TOTAL N EESS + 5 X 20 l 10+5x20= 300 10+5x20= 300 NEGATIVO 1:2 1:8 1:32
VOLUMEN TOTAL (VT) 800 800 500 500 VIALES VT 20 L 40 40 25 25

VOLUMEN TOTAL N de personas + 5 X 20 l 20+5x20=500 20+5x20=500 20+5x20=500 20+5x20=500

20
20 20 20 20

CCI NEGATIVO 1:2 1:8 1:32 300 300 -

CCE 500 500 500 500

RETO: NO TENER NIOS CON SIFILIS CONGENITA NI EXPUESTOS A VIH

Email: peruamado@yahoo.es