Diagnstico Laboratorial da Sfilis

Agente Etiolgico: Causada pelo espiroqueta Treponema pallidum subespcie pallidum, Bactria no cultivvel in vitro.

Aspectos imunolgicos da infeco sifiltica

Imunidade humoral aps infeco pelo T. pallidum produo de anticorpos como IgM, IgG, IgA e IgE.

IgM - presente na sfilis recente, fase de latncia.

IgG - resposta secundria do hospedeiro ao processo infeccioso. Pode ser observada em todas as fases da doena. Detectadas durante toda a vida do paciente.

Diagnstico Imunolgico da Sfilis

Fase primria pesquisa direta do agente

Aps aparecimento do cancro Pesq Anticorpo - 5 a 10 dias positiva-se o FTA-Abs; - 10 a 20 dias positiva-se o ELISA e TPHA; - ao redor de 20 dias o VDRL.

Diagnstico da sfilis
Pesquisa direta do agente etiolgico Material das leses primrias e secundrias suspeitas Cutneo mucosa Bipsia Necrpsia Placenta Cordo umbilical

Diagnstico da sfilis Pesquisa direta do agente etiolgico

Microscopia ptica em campo escuro: exame do exsudato da leso, observando a fresco o espiroqueta. Sensibilidade -74 a 86 % Especificidade-at 97% Desvantagem: requer treinamento adequado do tcnico para analisar a motilidade e a morfologia do T. pallidum.

Diagnstico da sfilis

Pesquisa direta do agente etiolgico

Imunofluorescncia direta: Ac antiT.pallidum produzidos em coelhos e conjugados FITC, adicionado ao esfregao do exsudato da leso, fixado em lmina. Sensibilidade-73-100% Especificidade- 89-100%

Diagnstico da sfilis

Pesquisa direta do agente etiolgico

Sensibilidade- ir variar de acordo com a coleta das espcimes, condio da leso, tempo de evoluo- carga bacteriana- se tratamento especfico anterior.

Diagnstico da sfilis
Pesquisa direta do agente etiolgico Estudo histolgico PCR_ testes para amplificao de cidos nucleicos com reao em cadeia de polimerase Sensibilidade-91%

Diagnstico da Sfilis Deteco de anticorpos circulantes anti- T. pallidum Testes sorolgicos

Testes no treponmicos No so antgenos especficos. Importantes para monitoramento do tratamento e evoluo da doena. Ex: VDRL e RPR Testes treponmicos - Importantes para o diagnstico da doena - Aparecem mais precocemente e persistem por vrios anos- aps tratamento. Ex: FTA ABS; ELISA-QUIMIOL. e TPHA

Testes no Treponmicos
VDRL

(Veneral Disease Research Laboratory) RPR (Rapid Plasma Reagin) Detectam anticorpos da classe IgG e IgM Limitaes reaes falso-positivas- reaes cruzadas: tuberculose, hepatite, endocardite bacteriana, sarmpo, varicela, flilariose, Hansen,malria, lupus. reaes falso-negativas efeito de prozonaquantidade em excesso de anticorpo anticardiolipinainibi a floculao. Necessidade de efetuar diluio. Tcnica Manual e de interpretao subjetiva

Testes no Treponmicos
Reao de floculao

Utiliza como Ag cardiolipina, colesterol e lecitina

Ag Ac: forma grumos; Toda amostra reagente no teste qualitativo deve ser testada quantitativamente para determinar o ttulo de Acs.

Testes Treponmicos

Maior especificidade e sensibilidade quando comparados aos testes no treponmicos.

Testes classicamente utilizados: FTA-Abs (teste de imunofluorescncia indireta); TPHA (teste de hemaglutinao para T. pallidum); ELISA (ensaioimuoenzimtico) Quimioluminescncia

Testes Treponmicos

FTA-Abs Baseia-se na tcnica de imunofluorescncia indireta (IFI)humana Os anticorpos anti treponema presentes no soro ligam-se ao antigeno fixado na lmina e so revelados por uma antigamaglobulina humana marcada com isotiocianato de fluoresceina

Teste Treponmico

ELISA Emprega diferentes tipos de antgenos e conjugados Quimioluninescncia ( Anti-Trep ) um ELISA

Possibilita a deteco de anticorpos especficos das classes IgG e IgM
- Mtodo ELISA - Reagentes prontos para uso - Fcil procedimento tcnico - Fcil leitura de resultados - Realizao de diversas amostras em uma nica rotina Leitura objetiva

VANTAGENS

Testes Treponmicos
TPHA. Baseia-se na aglutinao dos Acs treponmicos do soro com hemcias de aves, previamente sensibilizadas com Ag de T.pallidum.

VANTAGENS

Possibilidade de execuo de grande nmero de amostras e facilidade de leitura visual

Percentual de positividade nos testes em relao as fases da doena Fases Primria Secundria 78%
(74-87%)

Latente 95% 100%

Terciria 71% 96%

Testes VDRL
FTA

100% 100%

(71-100%) (37-94%)

84%
(93-100%)

TPHA

84%
(84-100%)

100%

100%

96%

Fonte: Curso Bsico de Vigilncia Epidemiolgica. MS, PNDST/AIDS, 2006.

Critrios de Avaliao aps Tratamento

VDRL no reagente cerca de 6 a 12 meses

VDRL no reagente cerca de 12 a 18 meses em 90% a 95% dos casos

O ttulo pode cair ou permanecer estvel, ou at negativar

Sfilis secundria

Sfilis primria

Sfilis com mais de um ano de durao

Evoluo dos Ac nos testes Sorolgicos de acordo com o tratamento

Evoluo dos Ac nos testes Sorolgicos de acordo com o tratamento

Evoluo dos Ac nos testes Sorolgicos de acordo com o tratamento

Evoluo dos anticorpos em RN e na sfilis congnita

Evoluo dos anticorpos em RN e na sfilis congnita

Algoritmo de testes laboratoriais sfilis Portaria CCD 24/09/2010

-Recomenda o uso do algoritmo convencional de testes laboratoriais para o imunodiagnstico da sfilis em laboratrios com baixa demanda de exames para sfilis -Recomenda a introduo de um algoritmo alternativo de testes laboratoriais para o imunodiagnstico da sfilis em laboratrios com elevada demanda de exames para sfilis

-Revoga a Nota Tcnica CCD - 04/2007 -N238, Seo I, p.50, publicada

no D.O. em 19/12/2007 Portaria CCD -25- de 18/07/2011

ALGORITIMO CONVENCIONAL
Nota 1: Em caso de suspeita clnica e/ou epidemiolgica de infeco pelo TP, solicitar nova coleta de amostra aps21 (30)dias. Nota 2:Em caso de suspeita clnica e/ou epidemiolgica de infeco pelo TP, solicitar nova coleta de amostra em at21 (30)dias. -Teste treponmico (qual/is) indeterminado, se possvel realizar FTA-Abs

VDRL

TPHA

ALGORITIMO ALTERNATIVO
Nota 1: Em caso de suspeita clnica e/ou epidemiolgica de infeco pelo TP, solicitar nova coleta de amostra aps21(30) dias. Nota 2:Em caso de suspeita clnica e/ou epidemiolgica de infeco pelo TP, solicitar nova coleta de amostra em at21(30) dias. Nota 3: Pode se tratar de sfilis latente ou recente, onde os anticorpos anti-cardiolipina esto indetectveis. Investigar histria de tratamento anterior, pois tambm pode indicar infeco anterior.
-Teste treponmico indeterminado, se possvel realizar FTA-Abs

Anti-trep (quimiol.)

VDRL

TPHA

1 Etapa

Anti-Trep

ALGORITIMO ALTERNATIVO

Resultado No Reag. NO REAGENTE

Em caso de suspeita clnica e/ou epidemiolgica de infeco pelo TP, solicitar nova coleta de amostra em at 21 dias

Reagente VDRL 2 Etapa

Resultado Reagente REAGENTE

No Reag.

TPHA
Pode se tratar de sfilis latente ou recente, onde os anticorpos anti-cardiolipina esto indetectveis. Investigar histria de tratamento anterior, pois tambm pode indicar infeco anterior

3 Etapa

Resultado Reagente REAGENTE

Indeterminado

Resultado No Reag. NO REAG.

FTA-abs

Em caso de suspeita clnica e/ou epidemiolgica de infeco pelo TP, solicitar nova coleta de amostra aps 21 dias

Interpretao da Sorologia
ELISA/ TPHA/ FTA-Abs
+ +

VDRL/RPR
+ -

Interpretao
Ausncia de infeco ou perodo de incubao Sfilis recente ou prvia Sfilis primria ou latente. Previamente tratada ou no tratada
Em caso de suspeita clnica e/ou epidemiolgica de infeco pelo TP, solicitar nova coleta de amostra em at21 dias

Falso positivo. Em caso de

suspeita clnica e/ou epidemiolgica de infeco pelo TP, solicitar nova coleta de amostra em at21 dias

Interpretao Diagnstica ...

Clnica + Epidemiologia + Resultado sorolgico Resultados laboratoriais fornecem subsdios aos diagnsticos clnicos e epidemiolgicos

Agradecimentos...
Equipes:

Laboratrio Municipal da Regio Sudeste Instituto Adolfo Lutz CRT Estadual

Muito obrigada!!!
Multiplicadores Maria Aparecida Daher- Sudeste Glria Ribeiro- Norte- Leste Lourdes Kimico-Sul Maria Lcia Morita-Centro Oeste