INTRODUCCIN

OBJETIVOS
Lograr separar la mayor cantidad de pigmentos por medio de los mtodos de Microcolumna y capa delgada.

Comprender las diferencia entre los mtodos manejados y establecer las ventajas y desventajas entre ellos.
Establecer

la importancia de las polaridades de los solventes en la interaccin con los pigmentos al momento de la separacin de estos mismos. Obtener un extracto con las condiciones optimas para un anlisis cromatrogrfico.

EQUIPOS Y MATERIALES
Centrifugadora Pipetas Pasteur Peras Para Pipetas Pasteur Tubos de Ensayo Gradilla Pipetas (5ml) Frascos de Compota Icopor Slica gel para Microcolumna Algodn Bistur

REACTIVOS
Acetona

Etanol n-hexano Ciclohexano Metanol Diclorometano Cloroformo Propanol Benceno ter de Petrleo Acetato de etilo Tolueno Tetracloruro de carbono

PROCEDIMIENTO
Preparacin del extracto muestra.
Montaje de Microcolumna. Cromatografa de Microcolumna. Montaje de Capa Fina.

Cromatografa de Capa Fina.

PREPARACIN DEL EXTRACTO MUESTRA

Para la preparacin del extracto se macer las hojas de Acelgas con la prevencin de no incluir en ella la nervadura.

Para extraer de la Acelga los pigmentos se emple dos solventes con polaridades opuestas para cubrir los rangos polares y no polares.

Con el fin de obtener un extracto concentrado en pigmentos se realiz una prueba de solubilidad con solventes a polaridades diferentes.

Luego de la prueba de solubilidad se pudo concluir que los mejores solventes para extraer los pigmentos fue Etanol, Hexano y Acetona en proporcin 3:3:7. Para separar la fase lquida de la slida se centrifug y as obtuvimos nuestro extracto.

El montaje usado para garantizar la estabilidad de la columna fue:

CROMATOGRAFIA DE MICROCOLUMNA

Cromatografa con solventes polares.

Cromatografa con tendencia apolar-polar.

MONTAJE

PREPARACION DE LA FASE MOVIL: En esta prctica se utiliz como fase estacionaria una lmina de aluminio las cuales se cortaron con dimensiones de 2 X 7 cm.

A cada lamina previamente cortada se le hiso una lnea con lpiz a una distancia de 1 cm desde la base menor , para tomar como referencia. Para depositar la muestra en la fase mvil utilizamos un capilar el cual fue estirado previamente con ayuda de un mechero.

 La

muestra se deposit en la lnea de referencia hecha con ayuda del capilar contando el nmero de toques que hicimos. Cada lmina se deposito en un recipiente con tapa en el cual se haba depositado diferentes muestras de solventes previamente rotulados como muestra la siguiente imagen.

Montaje para cromatografa de capa delgada.

RESULTADOS

ANLISIS DE RESULTADOS

CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFA