ADN

Nora Contreras B. Biol, MSc Escuela de Medicina y ciencias de la Salud Universidad del Rosario

ACIDOS NUCLEICOS
GENERALIDADES ADN -ESTRUCTURA

PRUEBAS DE LA NATURALEZA DEL ADN

MODELO DE WATSON Y CRICK

REPLICACION - MODELOS

Trascripcin inversa

Duplicacin

Trascripcin

Traduccin

D O G M A C E N T R A L
RNAm

DNA

D E L A
RNAt

Transcripcin

RNAr Ribosoma

Traduccin Protena

G E N E T I C A

Pueden ser de dos tipos: ADN, cido desoxirribonucleico y ARN, cido ribonucleico

ADN
Doble cadena Nuclear (Mitocondria) Azcar desoxirribosa Bases Nitrogenadas: A, T, C y G

ARN
Cadena sencilla Citoplasmtico Azcar ribosa A,U, C y G ARNm, ARNt, ARNr, ARNhn.

Caractersticas del Material Gentico:

Almacenaje de informacin
Replicacin Expresin de la informacin Variacin

El material gentico almacena informacin gentica

* Todas las instrucciones para todos los rasgos y funciones de un organismo

Replicacin fiel: Fase del ciclo celular

Propiedad fundamental de todo ser vivo.

Despus de replicado el ADN debe repartirse en forma equitativa en clulas hijas. (Mitosis y meiosis)

Expresin de la informacin gentica: Proceso complejo y la base para el concepto de flujo de la informacin gentica

Parte de la transcripcin del ADN a ARNm, r, t.

Sntesis de protenas.

Variacin Diferentes especies tienen su propia dotacin gentica Miembros de una misma especie diferente dotacin

El ADN debe ser muy estable ya que la mayor parte de las alteraciones de la informacin gentica son perjudiciales (mutaciones)

ADN
Friederick Miescher en 1.868 lo observ por primera vez. Demostr que la Nuclena contena gran cantidad de Fsforo pero no de Azufre, que lo diferenciaban de las protenas.

Cuando las tcnicas analticas mejoraron se observan los nucletidos. (4)

Phoebus A. Levene (1.910) propuso teora de los tetranucletidos 1:1:1:1

Erwin Chargaff teora de Leven.

(1.940s)

rechaza

Solo hasta 1940 se demuestra que el ADN es el material gentico ya que las protenas eran el mejor candidato pata transmitir la informacin gentica debido a varias razones entre otras: Son muy abundantes en las clulas y constituyen ms del 50% del peso celular. Estas contenan 20 a.a. mientras que el ADN solo 4 bases nitrogenadas

La estructura qumica de las protenas es ms compleja que la de los a. nucleicos ya que los nucletidos estn unidos por enlaces covalente, no mostrando suficiente variedad qumica que esperaban para el material gentico.
Entre 1910 y 1930 se hacen varias propuestas pero todas declinaron a favor de la teora del tetranucletido.

1940 Erwin Charaagaff refut y demostr que la teora de Levene era incorrecta.

NATURALEZA DEL ADN- PRUEBAS

* El Experimento de la Transformacin:
1928 Friederick Griffin * Infeccin de Bacterias por Bacterifagos: 1.952 Alfred Hershey y Martha Chase

* Experimentos de Transfeccin:
1.957 John Spizizen y Dean Fraser 1.960 George Guthrie y Roabert Sinsheimer

* Pruebas indirectas a favor del ADN en Eucariotes:

-Distribucin del ADN.

Experimento de Griffin

DNA

1.944 AVERY, MAC LEOD Y MC CARTY, COMPLETARON EL EXPERIMENTO DE GRIFFIN Y CONCLUYERON QUE EL ADN PRODUCIA LA TRANSFORMACION

DNA

INFECCION DE BACTERIAS POR FAGOS

CHASE Y HERSHEY marcaron fagos con P 32 y otros con S35 para observar cual sera el comportamiento de estos istopos durante la infeccin de bacterias.

Experimentos de Transfeccin Esferoplastos: Bacterias desprovistas de Pared celular por accin enzimtica. Esferoplastos + DNA de fagos rotos puede darse la infeccin

lisozima

Prueba indirecta a favor del ADN en eucariontes.

Distribucin del ADN
En la dcada de los 50s se saba que el material gentico deba ser nuclear y formar parte de los cromosomas. Deba encontrarse en lugares donde se cumplen funciones genticas (ncleo, mitocondria, cloroplastos) Se compara la proporcin de material gentico en clulas diploides y haploides.

Contenido de ADN de Clulas Haploides versus clulas diploides de algunas especies. (pg) Organismo
Humano

n
3,25

2n
7,30

Pollo
Trucha

1,26
2,67

2,49
5,79

Carpa
Arenque

1,65
0,91

3,49
1,97

ESTRUCTURA DEL ADN

La unidad monomrica de los cidos nucleicos es el nucletido , el cual puede ser degradado hasta nuclesido. Son elementos del nucletido:
Base Nitrogenada

Azcar tipo pentosa

Grupo fosfato

A G

BASES NITROGENADAS

C
T U

NUCLEOTIDO
AZUCAR

RIBOSA

DESOXIRIBOSA GRUPO FOSFATO

O
C C O O
5

H N

C
9

C N

C NH2

CH2 O

O-

H
4

C
C C 2

OH

OH

GUANOSIN MONOFOSFATO

Base Nitrogenada
Nuclesido Azcar pentosa

G C

T
Ribosa

Desoxirribosa

O C

H N

C
H HOCH2 O C C C C 2
1

C C N N H NH2 C

GUANOSINA

OH

OH

Estructura del DNA

El nuclesido, est formado nicamente por la Base nitrogenada y el azcar. Las Bases nitrogenadas pueden ser de dos tipos:

Estructura del DNA

PURINAS

ADENINA GUANINA

A G C T U

CITOSINA PIRIMIDINAS TIMINA URACILO

Estructura del DNA

Purinas: Base nitrogenada formada por la fusin de un doble anillo heterocclico, a este grupo pertenecen la A y G.

H C 6 C5 1N

N 7 H C8 9 N H

C4
3 N

2C H

Anillo prico
O
C C H C C N N H NH2 C N N H N

NH2
C C N

C
C C H

Guanina

Adenina

Estructura del DNA

Las Pirimidinas: son bases nitrogenadas formadas por un solo anillo heterocclico, a ellas pertenecen : C, T y U.

H C 4 C3 5N

C2

6C 1 N

Anillo pirimdico
NH2 O H C C H N C C N O C CH3 C N

C H N H

C O H

C
N H

C
O H

C
N H

C
O

Citosina

Uracilo

Timina

Estructura del DNA

El azcar es una pentosa (5 carbonos)

y pueden ser:
Ribosa: Presente en el ARN Desoxirribosa: Presente en el DNA.

HOCH2 O
4

OH

HOCH2 O

OH

C C C 2

C C OH C H

OH

OH OH

RIBOSA

DESOXIRRIBOSA

El Grupo Fosfato, es derivado del cido fosfrico

OO O O

OH O

PP

OO

OH

OH

OH

Da el carcter de tri, di o mono nucletidos, dependiendo del nmero de fosfatos que contengan.

O
C C OO O O
5

N H C
9

H N

C N

C NH2

H OO

PP OH

OO

P OH

P OH

HOCH2 O
4

C
C C 2

OH

d- GUANOSIN TRIFOSFATO

O
C C O O
5

N H C
9

H N

C N

C NH2

CH2 O

O-

C
C C 2

OH

OH

GUANOSIN MONOFOSFATO

Base

Nuclesido Ribosa Monofosfato Desoxirribosa

Nucletido Difosfato trifosfato

Purinas Adenina Guanina Pirimidina Adenosina Desoxiadenosina Guanosina Desoxiguanosina AMP (adenilato) dAMP GMP (guanilato) dGMP CMP (citidilato) dCMP * TMP (timidilato) dTMP *UMP (uridilato) dUMP ADP dADP GDP dGDP CDP dCDP TDP dTDP UDP dUDP ATP dATP GTP dGTP CTP dCTP TTP dTTP UTP dUTP

Citosina
Timina Uracilo

Citidina

Desoxicitidina

Timidina Desoxicitidina Uridina

Desoxiuridina

H
CH3
C C

N
C C

N C

C
N C

N
C H N

Timina

Adenina

H
N H O N

C C
N

C C N

N
C

N
C N

N
H

CITOSINA

GUANINA

Dinucletido de ADN

Dinucletido de ARN

COMPOSICION DE BASES
Erwin Chargaff y col. (1.949 - 1.953) determinaron la composicin de bases de la molcula del ADN, por medio de cromatografa y concluyeron:

COMPOSICION DE BASES
La {A} = {T} La {G} = {C}

La {PURINAS} = {PIRIMIDINAS}
La {A + T} = {G + C}

La composicin de bases del DNA dentro de un organismo siempre es la misma. La composicin de bases dentro de un individuo no cambia con la edad, estado nutricional ni con el ambiente.

COMPOSICION DE BASES El ADN de especies relacionadas son muy parecidas en la composicin de B.N. La composicin de bases dentro de especies lejanas en la escala evolutiva, son muy diferentes .

Tomo la primer fotografa del ADN a partir de la cual poda deducirse la distribucin y la distancia entre los tomos que formaban parte del ADN.
Rosalind Franklin

http://www.argenbio.org/h/biotecnologia/03.php

Watson y Crick

MODELO DE WATSON Y CRICK Doble hebra Helicoidal de giro derecho

Dimetro constante 2nm

Eje imaginario

Complementariedad de hebras
Doble puente de H entre A y T

y triple enlace puente de H entre G y C

Bidireccionalidad
Antiparalelismo entre las hebras

Distancia constante entre bases adyacentes

0.34 nm

Distancia constante entre vuelta y vuelta

3.4 nm

DNA C Se produce a partir de soluciones de sales concentradas y etiln glicol (sal de litio Y6 % de humedad relativa). Esta forma exhibe 9.33 pb por vuelta. El dimetro de esta hlice es de 19 A aproximadamente. DNA A Cuando la humedad relativa se reduce al 75 %, sufre un cambio conformacional reversible hacia la llamada forma A, la cual posee 11 pb por vuelta.

DNA Z: 12 pb por vuelta, levgira, presenta dos surcos uno denominado mayor muy profundo y el otro menor casi imperceptible. Purinas en posicin sin y pirimidinas en posicin trans provocan que el esqueleto azcar-fosfato sea zigzagueante, de ah el nombre de DNA-Z.

En concentraciones de sales altas, poli d(GC), poli d(AT) y poli d(GT), adoptan esta conformacin
La metilacin de la citosina en C(5), modificacin biolgica comn, tambin promueve la formacin de DNA-Z debido a que un grupo hidrofbico en esta posicin esta menos expuesto al solvente que en el DNA-B.

DNA-Z DNA-A

H- DNA De triple cadena, forma inusual del AND, encontrada in-vivo. Posiblemente se forma durante procesos de recombinacin y re del AND. Dos de las tres hebras estn constituidas por pirimidinas y la tercera por purinas. Las tres hebras muestran un apareamiento especial conocido como Hooasteen base pairing. Algunas secuencias que pueden formar H-DNA son encontradas en regiones involucradas en regulacin de un nmero de genes en eucariotas.