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É uma técnica que permite comparar duas populações de mRNA e obter
clones de genes que estão a ser expressos diferencialmente em dois
tecidos.
www.pac.dfo-mpo.gc.ca/.../pages/pmdoy_e.htm
Aumentar a abundância de cDNAs diferencialmente expressos e simplificar a
análise dos cDNAs subtraídos da biblioteca.
www.rbej.com/content/4/1/12
RNA mensageiro
cDNA
Digestão com
RsaI
Ligação dos
adaptadores
Subtracção
Exemplos:
Isolamento de genes diferencialmente expressos em vários tipos de
cancro (Bangur et al., 2002).
Identificação de genes induzidos na resposta à infecção de plantas
por patógenos (Santos et al.,2003).
Identificação e isolamento de genes induzidos pelo stresse biótico e
abiótico (Mahalingam et al.,2003).
Detecção das diferenças no conteúdo gênico entre membros de
uma espécie bacteriana (Akopyants et al.,1998).
Permite a detecção de transcritos pouco abundantes.
www.btinfo.blogspot.com
Akopyants N, Fradkov A, Diatchenko L, Hill JE, Siebert PD, Lukyanov SA, Sverdlov ED & Berg
DE. PCR-based subtractive hybridization and differences in gene content among strains of
Helycobacter pylore. Proceeding of National Academy of Sciences of the United States of
America, v.95, p. 13108-13113, 1998.
Bangur CS, Switzer A, Fan L, Marton MJ, Meyer MR, Wang T. (2002). Identification of genes
over-expressed in small cell lung carcinoma using suppression subtractive hybridization and
cDNA microarray expression analysis. Oncogene. 21:3814-3825.
Diatchenko, L.,. Lau Y.-F. C, Campbell A. P., Chenchik A., Mogadam F., Huang B., Lukyanov
S., Lukyanov K., Gurskaya N., Sverdlov E. D. and Siebert P. D.. 1996. Suppression subtractive
hybridization: a method for generating differentially regulated or tissue-specific cDNA probes
and libraries. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:6025–6030
Gurskaya, N. G., Diatchenko L., Chenchik A., Siebert P. D., Khaspekov G. L., Lukyanov K. A.,
Vagner L. L., Ermolaeva O. D, Lukyanov S. A., and Sverdlov E. D.. 1996. Equalizing cDNA
subtraction based on selective suppression of polymerase chain reaction: cloning of Jurkat cell
transcripts induced by phytohemaglutinin and phorbol 12-myristate 13-acetate. Anal. Biochem.
240:90–97.
Mahalingam R, Gomez-Buitrago A, Eckardt N, Shah N, Guevara-Garcia A, Day P,
Raina R & Fedoroff NV. Caracterization the stress/defence transcriptome of
Arabidopsis. Genome Biology, v.4, n.3, p. 1-14, 2003.
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