Filial Norte

Metabolismo de protenas y aminocidos

Mg. Helda C. Del Castillo C.

TRANSPORTE Hemoglobina E CATALIZADORA Enzimas RESERVAA Albmina

FUNCIONES
CONTRACTIBILIDAD :Actina miosina

HORMONAL Insulina

INMUNOLGICA Anticuerpos

ESTRUCTURAL Colgeno -queratina

Colgeno
El colgeno es la protena ms abundante en los seres vivos. Se estima que sus fibras componen entre el 25% y 35% de la masa total de protenas del cuerpo humano, por lo que se le considera el elemento estructural ms importante. En la piel, el colgeno representa el 80% del tejido conectivo y compone la mayor parte de la dermis. Se encarga de brindarle a la piel la consistencia y elasticidad caractersticas del rgano.

IMPORTANCIA DE LOS AMINOCIDOS

Las protenas suministran los bloques estructurales (a.a.) necesarios para la sntesis de nuevas protenas constituyentes del organismo, y por ello, se dice que tienen una funcin plstica o estructural La calidad o valor biolgico de las protenas de la dieta, depende de su contenido en aminocidos esenciales

Digestin y Absorcin de Protenas

Generalidades
Fuente de protenas para digestin y absorcin: - 70-100 g/da de dieta - 20-30 g/da de secrecin endgena - 20-30 g/da de descamacin intestinal La protena dietaria es la nica fuente de aminocidos esenciales y necesaria para el mantenimiento del balance nitrogenado La digestin es muy eficiente y ocurre a nivel de estmago e intestino delgado. Slo se pierden por las heces entre 6 y 12 g de protenas o sus productos, correspondientes a 1-2 g de N2..

Fases: Gstrica-Pancretica-Intestinal

Proteasas
Son enzimas que rompen los enlaces peptdicos de los pptidos y protenas Son hidrolasas dado que usan una molcula de agua Pueden romper enlaces peptdicos especficos = Protelisis limitada En el caso de la digestin y la degradacin proteica esto es inespecfico y el resultado final buscado es la degradacin total

Cuatro tipos de proteasas (segn su mecanismo de proteolisis)

SERINPROTEASAS Tripsina Quimotripssina Elastasa Trombina Plasmina Activdor del plasmingeno tisular (tPA) Subtilisina CISTEINPROTEASAS Caspasas Catepsina B Calpainas Papaina

METALOPROTEASAS Carboxipeptidasa A y B Aminopeptidasas Metaloproteasas de matriz Termolisina

ASPARTILPROTEASAS Pepsina Renina Catepsina D Proteasa HIV

Funciones de la peptidasas Recambio proteico Digestin Coagulacin sangunea y fibrinlisis Apoptosis Procesamiento de hormonas peptdicas Procesamiento de antgenos

Clasificacin de peptidasas
Segn el sitio de corte Endopeptidasas Exopeptidasas Segn el mecanismo cataltico Catlisis cido-base Peptidasas de Asp Metalopeptidasas Catlisis covalente Peptidasas de Ser Peptidasas de Cys Peptidasas de Thr

Digestin de las protenas de la dieta

A diferencia de los hidratos de carbono y lpidos una parte significativa de la digestin de protenas tiene lugar en el estmago.

TRANSPORTE MEDIADO ACTIVO

Principales enzimas proteolticos del tubo digestivo

Enzima

Proenzima

Activador Aminocido

Carboxil peptidasas Pepsina A

Serin Proteasas Tripsina Quimotripsina Elastasa Zinc peptidasas Carboxipeptidasa A Carboxipeptidasa B Procarboxipeptidas Tripsina aA Procarboxipeptidas Tripsina aB Val, Leu, Ile, Ala Arg, Lys Tripsinogeno Quimotripsinogeno Proelastasa Enteropeptidas Arg, Lys a Tripsina Tripsina Tripsina Tyr, Trp, Phe, Met, Leu Ala, Gly, Ser

Pepsinogeno A

Autoactivacin Tyr, Phe, Leu Pepsina

Digestin de Protenas I) En el estmago

Clulas Parietales

HCl

GASTRINA Clulas Principales

Pepsingeno

Pepsingeno
Proenzima

H Cl

Pepsina + resto de 42 Aa.

NH2 -NH2

pH 1,5-2,5 Enzima activa

-NH2

Digestin I de Protenas por Accin de Pepsina

NH2 NH2
Tyr Tyr

CarboxiPeptidasa B

NH2 Tyr

COOH

AA Bsicos

NH2
COOH
Oligopptidos

COOH NH2

Phe

pepsina
Phe

NH2
CarboxiPeptidasa A

Trp

COOH NH2

COOH
NH2 Phe COOH NH2 Trp COOH

COOH

Trp

AA Neutros

COOH

Activacin de Tripsingeno
Son secretadas en forma inactiva y se activan por cascada proteoltica iniciada por enteroquinasa
Tripsingeno Enteroquinasa Tripsina
ENDOPEPTIDASAS Tripsingeno Quimotripsingeno Proelastasa ECTOPEPTIDASAS Procarboxipeptidasa A Procarboxipeptidasa B Tripsina Quimotripsina Elastasa

Carboxipeptidasa A Carboxipeptidasa B

Digestin Intraluminal de Protenas por Accin de Proteasas Pancreticas

NH2 NH2
Arg

Tripsina

Arg

CarboxiPeptidasa B

NH2 Arg

COOH

AA Bsicos

NH2
COOH
Oligopptidos

COOH NH2
Quimotripsina

Phe Phe Ala

COOH NH2
Elastasa
CarboxiPeptidasa A

NH2 Ala

COOH

COOH

Ala

AA Neutros

COOH

Digestin Intestinal de Protenas

La digestin gstrica y la pancretica generan un 60% de oligopptidos entre 2 y 8 aminocidos.

La superficie intestinal es rica en:

Proteasas asociadas a membrana celular Ms de 20 peptidasas diferentes: endopeptidasas, aminopeptidasas, carboxipeptidasas, dipeptidasas (prolina-dipeptidasa) Digieren oligopptidos luminales a aminocidos libres, dipptidos y tripptidos Proteasas intracelulares

Amino di- y tripeptidasa, prolina-dipeptidasa.

Absorcin de aminocidos y dipptidos

El intestino absorbe aminocidos libres y pequeos pptidos. Aunque la gradiente de concentracin es favorable, se requiere un transportador (se demuestra por discriminacin D y L, gasto de energa y dependencia de temperatura). Los transportadores son sodio dependientes. Existen hasta siete transportadores por grupos de aminocidos : neutros, aromticos, iminocidos, etc.

Transporte de aminocidos: Cotransportadores aminocidosodio

Especificidad de AA Ejemplos

Absorcin de aminocidos no esenciales

Se absorben entre 60 y 100 g de aminocidos cada da. Aproximadamente el 40% son no esenciales, de ellos 12 g corresponden a cido glutmico.

RECAMBIO PROTEICO: DEGRADACIN DE PROTEINAS EN LA CLULA. VIDA MEDIA DE LAS PROTENAS. SISTEMA DE UBIQUITINACIN Y PROTEASOMA.

Recambio proteico
En el ser humano, la principal fuente de sustancias nitrogenadas son las protenas de la dieta. Como estos compuestos, a diferencia de carbohidratos y grasas, no se almacenan como reserva, los niveles en las clulas se regulan por el equilibrio entre anabolismo y catabolismo, es decir un balance entre biosntesis y degradacin de protenas, a lo que tambin se conoce como recambio normal de protenas.

 La mayora de las protenas se degradan dentro de la clula por proteasas citoslicas. Adems de proteasas lisosomales (catepsinas) existen proteasas en otras localizaciones subcelulares. En citosol existen calpainas (que se activan por calcio).

Caractersticas cuantitativas del intercambio proteico. Los aminocidos de la dieta diaria suponen slo el 25% aproximado de todos los que se utilizan en la sntesis proteica. Una persona de unos 70 Kg de peso viene a ingerir entre 60- 100 g de protenas diarios y se calcula que sintetiza del orden de 400 g al da. De estos 300 ,provienen de la degradacin de protenas del propio organismo (recambio proteico).

El pool de aminocidos est en equilibrio con las protenas tisulares

Importancia del intercambio proteico.

Reciclaje de aminocidos. Sistema de control de calidad evitando la perpetuacin y daos causados por posibles defectos de sntesis o alteracin qumica de las protenas. Tambin constituye un elemento importante de regulacin de las funciones celulares. Finalmente, numerosos procesos fisiolgicos dependen tanto de las reacciones de degradacin oportunas como de las de sntesis.

Las protenas tienen vidas medias muy variables La vida media (t1/2) vara de minutos a meses dependiendo del tipo de protena Hemoglobina humana (t1/2 =120 das) Factores de la coagulacin y hormonas polipeptdicas (t1/2= minutos a horas) t1/2 de muchas enzimas vara con las condiciones metablicas de la clulas

SEALES DE RECAMBIO
1. UBIQUITINIZACIN. La ubiquitina es una protena que al unirse a otras proteinas las marca para su degradacin en el proteasoma. 2. OXIDACIN DE RESIDUOS. La oxidacin de ciertos residuos ms proclives a la oxidacin como lisina , arginina o prolina parece promover la degradacin de las protenas por proteasas citoslicas. 3. SECUENCIAS PEST (secuencias con abundancia de prolina, glutamato, serina y treonina). NATURALEZA DELOS RESIDUOS N TERMINALES.(residuos terminales con phe, leu,tyr, trp, lys o arg parecen imprimir vidas cortas inferiores)

Bioqumica del proteasoma

El proteasoma es un gran complejo citoplsmico (26S) encargado de degradar protenasUbq Tiene al menos dos copias de 36 subunidades (=64) Requiere ATP (seis subunidades son ATPasas) Produce pptidos cortos Hay unos 30.000 proteosomas en la clula, tanto en ncleo como citosol

UBIQUITINA Y UBIQUITINACIN DE PROTENAS

LA UBIQUITINACIN MARCA A LA PROTEINA PARA SU DEGRADACIN.

LA UBIQUITINIZACIN EST MEDIADA POR ENZIMAS QUE TRANSFIEREN LA UBIQUITINA A LAS PROTEINAS DIANA EN LA UBIQUINITIZACIN INFLUYEN FACTORES COMO: SECUENCIAS PEST OXIDACIN DE RESIDUOS AMINOACIDOS N TERMINALES

LA DEGRADACIN D EPROTEINAS EN EL PROTEASOMA TERMINA LIBERANDO AMINOCIDOS.

DEGRADACIN DE AMINOCIDOS

Origen de los aminocidos de la clula

Protenas de la dieta Proteasas del tubo digestivo. Sistemas de transporte de aminocidos Degradacin de protenas celulares Proteasas celulares
Lisosomales Citoslicas Proteosoma

Biosntesis a partir de precursores Solamente sintetizamos aminocidos no esenciales.

DESTINO DE LOS AMINOACIDOS

Una vez absorbidos, los aminocidos tienen diferentes alternativas metablicas: a) b) c) Utilizacin (sin modificacin) en sntesis de nuevas protenas especificas. Transformacin en compuestos no proteicos de importancia fisiolgica. Degradacin con fines energticos.

Todos los aminocidos, cualquiera sea su procedencia, pasan a la sangre y se distribuyen a los tejidos, sin distincin de su origen.

Este conjunto de a.a. libres constituye un fondo comn o pool, al cual se recurre para la sntesis de nuevas protenas o compuestos derivados.

Distribucin de los aminocidos en el perodo postprandial

Glutamina y Asparagina: Intestino y rin

Aminocidos de cadena ramificada: Msculo y cerebro

La mayor parte de los aminocidos: Hgado

Visin general del catabolismo de aminocidos

CATABOLISMO DE AMINOACIDOS
La degradacin se inicia por procesos que separan el grupo aamino. Estos procesos pueden ser reacciones de:
o Transaminacin o Desaminacin y o Sintesis y transporte de glutamina y alanina.

Reaccines de Transaminacin.
Degradacin de la mayora de los Aminocidos. La reaccin de transaminacin comprende la transferencia de un grupo -amino de un -aminocido a un -cetocido. El aminocido se convierte en un -cetocido y el cetocido aceptor del grupo amina, en el -aminocido correspondiente.

Las transaminasas catalizan una reaccin bimolecular, donde el par aminocido/-cetocido, formado por el L-glutamato y el -ceto-glutarato constituyen un par obligado.
El piridoxal fosfato se localiza en el sitio activo de todas las transaminasas. Este es una coenzima derivada de la piridoxamina (vitamina B6), la cual cumple una importante funcin en el metabolismo de los aminocidos.

Hay dos transaminasas que informan de la salud del hgado y corazn

Transaminasas de inters clnico

Aspartato aminotransferasa (Transaminasa glutmica oxalactica) EC 2.6.1.1 (AST, TGO`,GOT)
COO+

COOC + O CH2 CH2 COO

-

COOC O
-

COO+

H3 N

CH CH2 COO
-

H3N CH CH2 CH2 COOGlutamato

CH2 COO

Aspartato

a-Cetoglutarato

Oxalacetato

La TGO se libera de clulas enfermas en el suero como SGOT Su nivel se eleva en el suero ante afecciones hepticas y despus del infarto al miocardio.

Alanina aminotransferasa (Transaminasa glutmicopirvica) EC 2.6.1.2 (ALT,TGP,GPT)

Enzima citoslica, de elevada concentracin en el parnquima heptico. La TGP tambin puede estar elevada despus del infarto al miocardio como SGPT Se considera casi especfica de lesin heptica.

Reaccin de desaminacin oxidativa

Teniendo en cuenta los componentes del `par obligado* todos los grupos -amino de los aminocidos son finalmente transferidos al -cetoglutarato mediante transaminacin, formando L-glutamato. A partir de este aminocido el grupo nitrogenado puede ser separado por un proceso denominado desaminacin oxidativa, una reaccin catalizada por la L-glutamato deshidrogenasa , una enzima presente en los tejidos de mamferos que utiliza como coenzima NAD+ o NADP+ como oxidante.

Desaminacin Oxidativa: Glutamato Deshidrogenasa

Mitocondrial

El glutamato libera amoniaco en el hgado

TRANSDESAMINACION
Aminocido + -cetoglutarato cetocidos + glutamato Glutamato+ NAD(P)++ H2O -cetoglutarato+ NAD(P)H + H+ + NH4+

Aminocido + NAD(P) ++ H2Ocetocido+ NAD(P)H + H + NH4+

Transaminacin y Desaminacin oxidativa del glutamato (GDH)

Toxicidad del amonaco.

El amonaco es txico y afecta principalmente al sistema nervioso central. La encefalopata asociada a defectos severos del ciclo de la urea se debe a aumento de amonaco en sangre y tejidos. Como el hgado es el principal rgano encargado de la eliminacin del amonaco, cuando hay una falla o insuficiencia heptica grave, la amonemia asciende y se produce un cuadro de intoxicacin, que puede llevar al coma e incluso la muerte.
Como se menciono anteriormente, al pH fisiolgico de los fluidos del organismo, la casi totalidad, alrededor del 99%, del amonaco que es una molcula neutra se convierte en in amonio, el cual no puede atravesar la membranas celulares.

Transporte del amonaco: glutamina

Segn vimos, el amonaco libre es txico, por lo que en la sangre es transportado preferentemente en forma de grupos amino o amida. El 50% de los aminocidos circulantes est constituido por glutamina, un transportador de amonaco, no txico.que puede atravesar con facilidad las membranas celulares por ser una molcula neutra. El grupo amida de la glutamina es importante como dador de nitrgeno para varias clases de molculas entre las que se encuentran las bases purnicas y el grupo amino de la citosina.

La reaccin es catalizada por una enzima mitocondrial, muy abundante en tejido renal, denominada GLUTAMINA SINTETASA la cual requiere energa en forma de ATP.

TRANSPORTE Y DESTINO DEL AMONACO

REACCION DE LA GLUTAMINA SINTETASA

ATP + NH4+

ADP + Pi

Glutamina sintetasa

Glutamato

Glutamina

Sntesis de Glutamina Todos los Tejidos, Msculo Esqueltico Enzima Citoslica :Glutamina Sintetasa

Eliminacin del grupo amida : es catalizada por la glutaminasa.

H 2O
Glutaminasa

NH4+

Glutamina

Glutamato

Degradacin de Glutamina por Glutaminasa

Hgado y Rin, Otros Tejidos: Mitocondrias

REACCIONES BSICAS DEL METABOLISMO DE AMINOCIDOS: almacenamiento y movilizacin

de grupos amonio

Eliminacin del in amonio: Ciclo de la urea.

CICLO DE LA UREA
Todo el NH3 originado por desaminacin, es convertido a UREA en el hgado.

El proceso consume 4 enlaces fosfato (ATP) por cada molcula de UREA.

SNTESIS DE UREA
Se lleva a cabo en los hepatocitos, en un mecanismo llamado ciclo de la urea, en el cual intervienen cinco enzimas y como alimentadores ingresan : NH3, CO2 y aspartato, el cual cede su grupo amino. Se denomina tambin ciclo de Krebs-Henseleit

CICLO DE LA UREA
Comprende las siguientes reacciones:
1. Sntesis de carbamoil fosfato 2. Sntesis de citrulina

3. Sntesis de argininsuccinato
4. Ruptura de argininsuccinato 5. Hidrlisis de arginina

Ciclo de la urea:generalidades
El ciclo de la urea y el de los cidos tricarboxlicos (TCA) fueron descubiertos por Sir Hans Krebs y colaboradores. De hecho, el ciclo de la urea fue descrito antes que el ciclo TCA. En los mamferos terrestres el ciclo de la urea es el mecanismo de eleccin para la excrecin del nitrgeno y se lleva a cabo exclusivamente en el higado. Los dos nitrgenos de cada molcula de urea provienen de dos fuentes, el amonaco libre y el grupo amino del aspartato. El ciclo se inicia y finaliza en el aminocido ornitina. A diferencia del ciclo TCA, en donde los carbonos del oxalacetato al principio son diferentes de los del final, los carbonos de la ornitina final son los mismos que posea la molcula inicialmente. Las reacciones del ciclo estn bicompartimentalizadas, algunas reacciones se llevan a cabo en la matriz mitocondrial, en tanto que otras ocurren en el citosol

Carbamoil fosfato sintetasa`I

OrnitinaTranscarbamoilasa

Arginasa
Argininosuccinato sintetasa

Argininosuccinato liasa

Ciclo de la urea:etapas
En forma esquemtica podemos enumerar las etapas de la biosntesis de urea de la siguiente manera: 1. Inicio de la biosntesis: Carbomoil fosfato sintetasa I. La biosntesis de urea comienza con la condensacin de bixido de carbono, (bajo la forma de HCO3 -)amonaco y 2 ATP, para formar carbamoil fosfato, reaccin catalizada por la carbamoil fosfato sintetasa I (CPSI). En los tejidos humanos existen dos formas de CPS. La carbamoil fosfato sintetasa I, de la sntesis de la urea, es una enzima mitocondrial heptica. La CPSI es la enzima limitante de la velocidad, del ciclo de la urea. Esta enzima reguladora es activa slo en presencia del activador alostrico Nacetilglutamato, cuya unin induce un cambio conformacional que aumenta la afinidad de la sintetasa por el ATP.

2. Formacin de citrulina.
La L-ornitina transcarbamoilasa cataliza la transferencia de la porcin carbamoil del carbamoil fosfato a un aminocido ornitina, formando citrulina y ortofosfato. Esta reaccin se lleva a cabo en la matriz mitocondrial; la formacin del sustrato ornitina y la metabolizacin subsecuente del producto, citrulina, se lleva a cabo en el citosol. Por tanto la entrada como la salida de ornitina y citrulina de la mitocondria implica la participacin de un sistema de transporte situado en la membrana interna de esta organela, formado por un contratransportador citrulina/ornitina.

3. Formacin de argininosuccinato.
La reaccin de la argininosuccinato sintetasa une aspartato y citrulina a travs del grupo amino del aspartato, y suministra el segundo nitrgeno de la urea. La reaccin requiere ATP para formar un intermediario citrulina-AMP y luego, desplazando el AMP por aspartato forma argininosuccinato.

4. Formacin de arginina y fumarato.

La escisin del argininosuccinato, catalizado por la argininosuccinasa o arginino succinato liasa, retiene nitrgeno en el producto arginina y libera el esqueleto del aspartato bajo la forma de fumarato.

5. Formacin de ornitina y urea.

La reaccin final del ciclo de la urea, la ruptura hidroltica de la arginina catalizada por la arginasa heptica, libera urea. El otro producto, ornitina, reingresa a la mitocondria heptica para ser utilizada nuevamente en el ciclo de la urea. Cantidades menores de arginasa tambin se encuentran en los tejidos renal, cerebral, mamario, testicular y en la piel. La ornitina y la lisina son inhibidores potentes de la arginasa, y por tanto, compiten con la arginina

REGULACION DEL CICLO DE LA UREA

Regulacin a corto plazo

Carbamil fosfato sintetasa I

(+) N-Acetil glutamato

Regulacin a largo plazo

Biosntesis de las enzimas del ciclo

(+) Aumento protenas de la dieta Aumento degradacin protenas endgenas (Inanicin )

GASTO ENERGETICO DEL CICLO DE LA UREA

Formacin de Carbamoil fosfato: 2 ATP

Ingreso de Aspartato: 1 ATP

AMP + PPi

2 Pi

EN TOTAL: 3 ATP

PROPIEDADES DE LA UREA
Molcula pequea, sin carga.

Difusible
Soluble Atxica

El 50% de su peso es nitrgeno.

Permite la eliminacin de 2 productos de desecho: CO2 y NH3

TRASTORNOS METABOLICOS DE LA SNTESIS DE UREA. Enfermedades mentales. Retraso en el desarrollo. Coma. Muerte por gran aumento de la [NH4+] en sangre.

Valores Normales: 25-30 gr de urea diarios o 20 a 40mg/dL

G R A CI A S