Laboratorio

Enzimas

Objetivos
Definir

qu es una enzima y cmo estas actan en reacciones dentro de la clula. diferentes factores que pueden afectar la actividad enzimtica. entre inhibicin competitiva y no competitiva.

Identificar

Diferenciar

Enzimas
!n su mayor"a prote"nas o #$% &riboenzimas' (atalizadores qu"micos que a)ilizan una reaccin qu"mica formacin o rompimiento de enlaces qu"micos %l finalizar la reaccin la enzima se libera y queda disponible para otra reaccin

Enzimas
$o se consumen en las reacciones y no se alteran *ueden ser reusadas y no se necesitan en )randes cantidades %ctan sobre un sustrato formando un comple+o enzima-sustrato al unirse en un lu)ar espec"fico del sustrato el sitio activo de la enzima Las enzimas son selectivas, pocas molculas pueden interactuar con el sitio activo y formar el comple+o

Reaccin con enzima

Reaccin con y sin enzima

(uando se forma esta interaccin ba+a la ener)"a de activacin necesaria para poder llevar a cabo la reaccin.
Sin enzima Con enzima

Energa de activacin

Curso de la reacc in

Enzimas en una reaccin

-uncionan me+or ba+o condiciones espec"ficas &optimas) que incluyen

.emperatura p/

Los cambios pueden alterar el desempe0o de la enzima, desactivarla o destruirla %l)unas enzimas necesitan activadores para poder formar el comple+o enzima sustrato

Cofactores e Inhibidores
%ctivadores &cofactores' cambia la forma de la enzima para formar el comple+o enzima sustrato pueden ser iones metlicos de ori)en or)nico se llaman coenzimas

Cofactores e Inhibidores
Inhibidores impiden la actividad de la enzima, puede ser de dos formas

bloquea el sitio activo competitiva altera la forma del sitio activo pe)andose a la enzima en otro lu)ar y cambia la forma de la enzima no competitiva

Inhibicin Competitiva

Inhibicin No Competitiva

Catalasa
se encuentra en casi todas las clulas aerbicas acta rompiendo el perxido de hidrgeno en a)ua y o1")eno que se produce en las clulas

catalasa

2 H2O2

2 H2O + O2

Procedimiento

*reparacin de homo)enados *ara preparar el homo)enado, a partir de pedazos de papa, h")ado, y espinaca por separado en una licuadora o mortero y moler con un poco de a)ua hasta diluir parte de la muestra. *oner cada homo)enado en un tubo de ensayo.

2.

3.

4. (on )otero, pon)a 5 )otas de cada homo)enado en las fosas de la placa de porcelana6 a0ada 4 )otas de per1ido de hidr)eno a cada muestra. 4. 7bserve y anote los resultados en la si)uiente tabla

Tabla de resultados
Tabla !" Resultados homo#enado con per$ido de hidr#eno
%omo#enado
%)ua *apas /")ado !spinaca

Reaccin al a&adir #otas del per$ido

Pre#untas
5. 89u ocurri al a0adir el per1ido: 6. 87curri lo mismo para todas las muestras: 7. 8*or qu se forman las burbu+as: 8. 89u otros or)anismos se podr"an probar:

Procedimiento
2. Identifique 5 tubos de ensayo. 3. *on)a 4 mL de cada homo)enado en los tubos como si)ue; % /")ado < *apa ( =etas D !spinaca ! %)ua 4. /a)a una marca hasta donde lle)a cada homo)enado.

Procedimiento
4.*on)a 4 mL de per1ido de hidr)eno en cada tubo de ensayo. 5.7bserve la reaccin por tubo y marque el cambio en l"quido. >..abule los resultados en la .abla si)uiente tabla

Procedimiento
Tabla !' Resultados homo#enado con per$ido de hidr#eno Tubo Cantidad de burbujas (Cu)nto homo#enado se consumi*

?. 89u or)anismos produ+o ms )as: @. 89u )as se est produciendo: A. 89u su)iere la evidencia o los resultados de los e1perimentos realizados: 8(ontienen catalasa:

Efecto de la temperatura
Influye en la actividad. !l punto ptimo representa el m1imo de actividad. % temperaturas ba+as, las enzimas se hallan Bmuy r")idasB y cuando se supera un valor considerable la actividad cae bruscamente porque, como prote"na, la enzima se desnaturaliza.

Procedimiento
2. #otular 5 tubos de ensayo, y calentar ba0o de /2C hasta @CD(, y otro hasta 4?D(. 3. %0adir 5 mL de h")ado homo)enado a cada uno. 4. (olocar los tubos en las si)uientes condiciones; .ubo 2 E @CD( &poner tubo por 5 minutos' .ubo 3 E 4?D( &poner tubo por 5 minutos' .ubo 4 E .emperatura ambiental .ubo 4 E !n hielo &de+ar por 4C minutos' .ubo 5 E !n con)elador F 4D( &de+ar por 4C minutos'

Procedimiento
4. %0ada 3 mL de per1ido al tubo 2. 7bserve los resultados y el tiempo que tarda en producirse las burbu+as. 5. .ome el tiempo inicial al a0adir el per1ido y el tiempo cuando empiece a producirse las burbu+as. >. #epetir con los dems tubos. ?. Grafique sus resultados &tiempo de reaccin vs. temperatura' en la si)uiente .abla

Efecto del p%
.odas las enzimas presentan un p/ ptimo de actividad. !l p/ puede afectar de varias maneras; !l centro activo puede contener aminocidos con )rupos ionizados que pueden variar con el p/.

!l sustrato puede verse afectado por las variaciones del p/.

%l)unas enzimas presentan variaciones peculiares. La pepsina del estma)o, presenta un ptimo a p/E3, y la fosfatasa alcalina del intestino un p/E 23

Procedimiento
2. #otular 4 tubos de ensayo A C. 3. %0ada 2 cm de homo)enado de h")ado a cada tubo. 4. %0ada 4 cm de /(L 4H al tubo % 4. %0ada 4 cm de $a7/ 4H al tubo < 5. %0ada 4 cm de a)ua al tubo ( a)ite suavemente hasta mezclar >. %0ada 4 cm de per1ido de hidr)eno a cada tubo. ?. 7bserve y anote las reacciones

Efecto de la T y el p%

Pre#untas para el pensamiento

8(ul es la relacin entre el p/ y la actividad enzimtica: Las enzimas del estma)o funcionan me+or con un p/ de 3. 8(mo afectar"a un p/ de 4 en el estma)o a la di)estin: 8De qu otras maneras se le ocurrir"a se podr"a probar el funcionamiento o no funcionamiento de las enzimas estudiadas en el laboratorio: 8*uede mencionar e+emplos de otras enzimas que acten en nuestro cuerpo: 89u efecto podr"a tener una fiebre alta prolon)ada sobre el funcionamiento de las enzimas: 8*uede mencionar al)una condicin mdica que se deba al malfuncionamiento o no funcionamiento de una enzima:

Pre#untas para el pensamiento

89u sucede cuando se pone per1ido de hidr)eno en una herida: 89u su)iere la evidencia: !1plique porque tantas especies producen la enzima catalasa. 8!n qu otras maneras las enzimas son importantes para nosotros: Hencione e+emplos de cosas en nuestro diario vivir que envuelven al)n uso de enzimas.