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LA GALERIE API 20E (travail de R.

FERRY CANNES)
1- Prsentation de la galerie Galerie de 20 microtubes prts lemploi permettant de raliser 23 tests biochimiques afin didentifier des bacilles Gram appartenant la famille des ENTEROBACTERIACEAE. cupule

microtube contenant le milieu dshydrat La suspension bactrienne introduite dans le tube dissout les substrats dshydrats.

LA GALERIE API 20E


2- Prparation de linoculum

1 seule colonie sur GO

isolement

Prlvement dune souche pure sur GNI

5 mL deau distille strile

Souche pure sur GNI

LA GALERIE API 20E

3- Ensemencement de la galerie API 20 E

Introduire la suspension bactrienne dans chaque tube laide dune pipette Pasteur strile ouverte, pointe appuye lintrieur et sur le ct pour viter la formation de bulles

Pour certains caractres:

Remplir de suspension le tube et la cupule Pour les tests : CIT VP GEL

Remplir le tube de suspension puis recouvrir dhuile de paraffine Pour les tests : ADH, LDC, ODC, H2S, URE

LA GALERIE API 20E


4- Lecture de la galerie API 20 E

Aprs 24h dincubation 37C, dans quelles cupules doit-on rajouter des ractifs ?

Chlorure de fer III Napht-1-ol Naphtyl-1amine

LA GALERIE API 20E


4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 premiers tests

Tests ngatifs

+ Ractif + Ractif + Ractifs TDA Kovacs VP 1 et 2

Tests positifs

+ Ractif + Ractif + Ractifs TDA Kovacs VP 1 et 2

LA GALERIE API 20E


4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 derniers tests

Tests ngatifs

Tests positifs

Aprs ajout des ractifs Nit 1 et Nit 2 : lecture de la NR (ici NR +)

TABLEAU DE LECTURE DE LA GALERIE MINIATURISE API 20E


Microtube Substrat : ONPG = OrthoNitro-PhnylGalactoside Arginine Lysine Ornithine Caractre recherch : Rvlateur Lecture directe ou indirecte Test (si ncessaire) Rsultat Rsultat +

ONPG

Beta galactosidase Arginine Dihydrolase Rouge Lysine Dcarboxylase de Ornithine Dcarboxylase Phnol

Lecture directe

ADH LDC ODC

Lecture directe

CIT

Citrate
Thiosulfate de sodium Ure

Utilisation du citrate

BBT

Lecture directe

H2S

Production dH2S
Urase Tryptophane dsaminase Tryptophanase ou production dindole production dactone (hydroxy-3-butanone glatinase

Lecture directe Rouge de Phnol


Lecture directe Lecture indirecte Ajouter une goutte de ractif chlorure de fer III Lecture indirecte Ajouter une goutte de ractif Kovacs Lecture indirecte Ajouter 1 goutte de VP1 et VP2 Attendre 10 minutes

UR

TDA

Tryptophane

IND

Tryptophane Pyruvate de sodium Glatine Substrat carbon (glucide)

VP

GEL GLU ARA


= zymogramme

Lecture directe

Utilisation de substrats carbons (glucides)

BBT

Lecture directe Lecture indirecte Ajouter 1 goutte de NIT1 et NIT2 et zinc ventuellement

NO2- / N2

Nitrates (NO3)

Nitrate rductase

LA GALERIE API 20E


5- Identification de la souche Rsultats de la galerie :

Rsultats reports sur la fiche didentification


Code n: 5 215 773 (55)

Se rfrer au catalogue pour identifier la souche laide du code