CROMATOGRAFA

"Lis de Veracruz: Arte, Ciencia, Luz".

LABORATORIO DE ANLISIS INSTRUMENTAL

EQUIPO: 8

ARANDA VIVAS LEONARDO IVN

CEDILLO NARCISO DULCE MARA CASTRO MORAN ALICIA PATIO HERNANDEZ AXEL MAXIMILIANO

INTRODUCCIN
La cromatografa es una tcnica que permite la separacin de los componentes de una mezcla debido a la influencia de dos aspectos contrapuestos. Retencin: Efecto producido sobre los componentes de la mezcla por una fase estacionaria, que puede ser un slido o un lquido anclado a un soporte slido. Desplazamiento: Efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla por una fase mvil, que puede ser un lquido o un gas.

DESCUBRIMIENTO
En 1906, el botnico Ruso M. Tswett realiz un experimento que condujo al descubrimiento de lo que hoy conocemos como cromatografa. Coloc un extracto de pigmentos vegetales en la parte superior de una columna de vidrio rellena de carbonato de calcio (CaCO3). Al agregar ter, observ que la mezcla original se separaba en diversas bandas coloridas que descendan a travs de la columna a diferentes velocidades

TIPOS DE CROMATOGRAFA
Dependiendo de la naturaleza de la fase estacionaria y de la fase mvil se pueden distinguir distintos tipos de cromatografa Cromatografa slido-lquido. La fase estacionaria es un slido y la mvil un lquido. Cromatografa lquido-lquido. La fase estacionaria es un lquido anclado a un soporte slido. Cromatografa lquido-gas. La fase estacionaria es un lquido no voltil impregnado en un slido y la fase mvil es un gas. Cromatografa slido-gas. La fase estacionaria es un slido y la mvil un gas.

OBJETIVO
Aplicar los fundamentos de los mtodos ms usados en la separacin y purificacin de los compuestos orgnicos.

LA CROMATOGRAFA DE GASES
Es una tcnica cromatogrfica en la que la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna cromatogrfica. La elucin se produce por el flujo de una fase mvil gas inerte. A diferencia de los otros tipos cromatografa, la fase mvil no interacta con molculas del analito; su nica funcin es la transportar el analito a travs de la columna. de de las de

 Existen dos tipos de cromatografa de gases (GC): la cromatografa gas-slido (GSC) y la cromatografa gaslquido (GLC), siendo esta ltima la que se utiliza ms ampliamente, y que se puede llamar simplemente cromatografa de gases (GC). En la GSC la fase estacionaria es slida y la retencin de los analitos en ella se produce mediante el proceso de adsorcin. Precisamente este proceso de adsorcin, que no es lineal, es el que ha provocado que este tipo de cromatografa tenga aplicacin limitada, ya que la retencin del analito sobre la superficie es semipermanente y se obtienen picos de elucin con colas. Su nica aplicacin es la separacin de especies gaseosas de bajo peso molecular. La GLC utiliza como fase estacionaria molculas de lquido inmovilizadas sobre la superficie de un slido inerte.

 La GC se lleva a cabo en un cromatgrafo de lquidos. ste consta de diversos componentes como el gas portador, el sistema de inyeccin de muestra, la columna (generalmente dentro de un horno), y el detector.

Cromatografa lquida
Tambin conocida como Cromatografa de lquidos, es una tcnica de separacin y no debe confundirse con una tcnica cuantitativa o cualitativa de anlisis. Es una de las tcnicas analticas ampliamente utilizadas, la cual permite separar fsicamente los distintos componentes de una solucin por la adsorcin selectiva de los constituyentes de una mezcla. En toda cromatografa existe un contacto entre dos fases, una fija que suele llamarse fase estacionaria, y una mvil (fase mvil) que fluye permanente durante el anlisis, y que en este caso es un lquido o mezcla de varios lquidos. La fase estacionaria por su parte puede ser almina, slice o resinas de intercambio inico que se encuentran disponibles en el mercado.

 Los intercambiadores inicos son matrices slidas que contienen sitios activos (tambin llamados grupos ionognicos) con carga electrosttica (positiva o negativa). De esta forma, la muestra queda retenida sobre el soporte slido por afinidad electrosttica. Dependiendo de la relacin carga/tamao unos constituyentes de la mezcla sern retenidos con mayor fuerza sobre el soporte slido que otros, es decir sern adsorbidos, lo que provocar su separacin. Las sustancias que permanecen ms tiempo libres en la fase senil, avanzan ms rpidamente con el fluir de la misma y las que quedan ms unidas a la fase estacionaria o retenidas avanzan menos y por tanto tardarn ms en salir o fluir. Las columnas ms utilizadas son las de slice.

Cromatografa en papel

OBJETIVO
Separar mediante el mtodo de la Cromatografa en papel los componentes de diferentes tintas comerciales.

FUNDAMENTO
La cromatografa en papel es la tcnica de separacin e identificacin de sustancias qumicas mediante un disolvente que se mueve sobre hojas o tiras de papel filtro. Es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar anlisis cualitativos ya que pese a no ser una tcnica muy potente no requiere un tipo de equipamiento

La cromatografa en papel permite llevar a cabo la separacin e identificacin de iones, trabajando con cantidades mnimas de sustancia. Se fundamenta en que las soluciones problema pueden tener diferentes coeficientes de reparto en dos disolventes de inmiscibilidad limitada, uno permanece fijo en la superficie del papel fase estacionaria generalmente en agua, la fase mvil esta constituida por una mezcla de disolventes parcialmente miscibles en ella. Hay varios tipos de cromatografa, la ascendente, descendente, radial y de separacin de zonas y sectores.

Cromatografa en capa fina

En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeo espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascender, por capilaridad, por la placa y arrastrar los componentes a lo largo de sta produciendo "manchas" de los componentes.

 En la cromatografa en capa fina (ccf), el grado de elucin de las sustancias depende tanto de su propia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre un soporte rgido, qu pueden ser placas de vidrio, aluminio o polister. Los tamaos de la placa para ccf convencional son: 20 x 20; 10 x20 y 5x2 cm. Hay adsorbentes que contienen un indicador de fluorescencia para facilitar la identificacin de muestras. Si no se usa indicador y los componentes no son coloridos, se requerirn otras tcnicas de revelado.

ELUYENTES MS COMUNES PARA CROMATOGRAFA EN CAPA FINA

- ter de petrleo - n-hexano - ciclohexano - cloruro de metileno - acetato de etilo - acetona

' tolueno
- dietil-ter - t-butil-ter

- iso-propanol
- etanol - metanol

- Cloroformo

- cido actico

REVELADORES MS COMUNES PARA CROMATOGRAFA EN CAPA FINA

Las manchas de color son, por supuesto, inmediatamente visibles; las incoloras pueden revelarse mediante:
Luz UV: si la sustancia absorbe luz ultravioleta, se puede usar una fase estacionaria impregnada con un indicador fluorescente (F250 F366), el nmero que aparece como subndice nos indica la longitud de onda de excitacin del indicador utilizado" La introduccin de la placa en vapores de yodo El roco con una solucin de agua/HSO 1 :1 (dentro de un compartimiento especialmente protegido y bajo una campana de extraccin de gases). Despus calentar intensamente, por ejemplo, con un mechero. hasta carbonizar los compuestos.

ADSORBENTES MS COMUNES PARA CROMATOGRAFA EN CAPA FINA

Gel de slice (se utiliza en el 80% de las separaciones) Oxido de Aluminio o Almina (cida, neutra o bsica) Celulosa (Nativa o micro-cristalina) Poliamidas
Para la seleccin del adsorbente deber tomar las siguientes consideraciones:

Polaridad Tamao de partcula Dimetro

rea Superficial
Homogeneidad Pureza

FACTORES QUE INFLUYEN EN UNA SEPARACIN POR CROMATOGRAFA DE CAPA FINA

Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben ms en la fase estacionaria. La cromatografa debe llevarse a cabo en un rea sin corrientes de aire. Limpieza de las placas. Muchas placas estn contaminadas con grasa o agentes plastificantes o adhesivos. Para el trabajo a pequea escala, stas deben limpiarse corriendo primero una mezcla de cloroformo y metanol y despus dejar secar completamente antes de aplicar la muestra. Pureza de los disolventes.

Cromatografa en columna

 Es el mtodo ms utilizado para la separacin de compuestos orgnico a escala preparativa. La fase estacionaria se deposita en el interior de una columna de vidrio que termina con una placa porosa que impide su paso y en un estrechamiento con una llave. La mezcla se deposita sobre la parte superior de la fase estacionaria mientras que la fase mvil atraviesa el sistema. Los compuestos van saliendo por separado de la columna y se recogen en fracciones, los ms polares quedan ms retenidos y para que salgan generalmente hace falta aumentar la polaridad del disolvente. El tiempo necesario para eluir un compuesto de la columna se llama tiempo de retencin.

 El adsorbente ms utilizado para cromatografa de columna es gel de slice, aunque tambin se puede emplear almina y florisil. La elucin de la cromatografa puede realizarse por gravedad o mediante presin (Flash chromatography), la diferencia en ambos casos est en el tamao de las partculas de gel de slice (0,063-0,200 nm, slice de columna, 0,040-0,063 nm, slice flash). Debido a que la disminucin del tamao de las partculas de adsorbente conduce a una separacin ms eficaz, la cromatografa a media presin (flash) proporciona mejores resultados, adems de ser ms rpida.

 Las variables que ms influyen en la eficacia de la separacin en cromatografa de columna y utilizando gel de slice como adsorbente son las siguientes
Dimetro de la columna y cantidad de gel de slice. La altura del adsorbente est relacionada con la diferencia de Rf de los componentes de la mezcla. El dimetro de la columna con la cantidad de producto a separar. Eleccin del disolvente. El disolvente tienen que conducir a una buena separacin de los componentes de la mezcla en capa fina, utilizndose en muchos casos mezclas de disolventes y se realiza una elucin en gradiente. Una de las mezclas ms utilizadas es hexano/acetato de etilo.

El acetato de etilo es muy voltil y tiene un bajo punto de ebullicin.

Rf = Relacin de frentes o tambin conocido como factor de retencin. Se define como: Rf = distancia recorrida por el soluto / distancia recorrida por el solvente

FICHA BIBLIOGRFICA
Cromatografa en: http://ocw.uv.es/ocw-formacio-permanent/2011-1-35_Manual.pdf http://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia recuperado el 5 de mayo de 2013 Cromatografa en papel en http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf http://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r49995.PDF Recuperado el 8 de mayo de 2013 Cromatografa en capa fina en: www.slideshare.net/ivan_ordiozola/cromatografa-12608467

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Recuperado el 8 de mayo de 2013 Cromatografa en columna: http://www.docstoc.com/docs/113960714/CROMATOGRAF%EF%BF%BDA-EN-COLUMNA http://navarrof.orgfree.com/Docencia/Quimica/UT2/separacion_mezclas.htm

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