UNIVERSIDAD PERUANA UNION

TRABAJO DE INVESTIGACION: Determinacin De Coliformes Totales y Fecales En Aguas De Regado Mediante El Uso De Tubos Mltiples En Carapongo Lima
Por : Ruddy Lozano Hector Julca Brayan Barrientos Elvis Mendoza

INTRODUCCION

La calidad microbiolgica del agua de consumo humano es de gran importancia y el monitoreo de un indicador bacteriano tal como los coliformes totales y fecales debe drsele la ms alta prioridad dentro de la poltica del abastecedor de agua. (OMS, 1984). Es por ello que en el presente trabajo se desea determinar la presencia de coliformes totales y fecales mediante el uso de tubos mltiples en muestras de agua de regado en Carapongo, donde se utiliz la metodologa de Numero Ms Probable (NMP)

 Determinar la presencia de coliformes fecales y totales

mediante el uso de tubos mltiples en muestras de agua de regado tomados en Carapongo

Identificar los puntos de muestreo

Aplicar el mtodo de Nmero Ms Probable (NMP)

Determinar la presencia/ausencia de microorganismos

aerbicos Comparar los resultados obtenidos con los parmetros de Estndar de Calidad Ambiental (ECA) para agua de regado.

Las coliformes son una familia de bacterias que se encuentran comnmente en las plantas, el suelo y los animales, incluyendo a los humanos. La presencia de bacterias coliformes en el suministro de agua es un indicio de que el suministro de agua puede estar contaminado con aguas negras u otro tipo de desechos en descomposicin. Generalmente, las bacterias coliformes se encuentran en mayor abundancia en la capa superficial del agua o en los sedimentos del fondo y pueden ocasionar enfermedades. Es por ello que hemos optado por determinar la presencia de Coliformes Totales y Fecales en Carapongo a causa de que las personas presentan enfermedades cutneas como verrugas, manchas, etc. quienes, estas, usan el agua como un suministro para regar sus productos y de esa forma estos llegar al consumo humano.

Tubos de ensayo Pipetas Pipeteadores Gradillas Mechero Bunsen Vaso Precipitado Probeta Incubadora Frascos de muestreo Esterilizado Autoclave( para esterilizar los materiales) Balanza Analtica Tubos Dunlham

Se realizaron diluciones de la muestra (10-1,10-2 y 10-3), de la cuales se sembr 1 mL de cada una. Cada una de las muestras fue sembrada paralelamente mediante la Tcnica de Tubos Mltiples de Fermentacin empleando los medios de cultivo tradicionales (CL-CBVBEC) Se sigui el procedimiento establecido para la tcnica de tubos mltiple de fermentacin. Medios de cultivo empleados

Caldo Verde brillante Bilis Solucion Salina Peptonada

 TECNICA # 1 COLIFORMES FECALES Y TOTALES Prueba presuntiva. Prueba confirmativa.

 Clera.
Fiebre tifodea.

Hepatitis.
Poliomielitis

Gastroenteritis.

 Condiciones, material y equipo necesario.

1. Trabajar en medio esteril:

Mechero bunsen

2. Tubos con medio de cultivo esterilizado y verificado (sin burbuja)

3. Pipetas graduadas y pipetas pasteur estriles

4. Guantes estriles, cofia, cubrebocas y bata de laboratorio.

COLIFORMES FECALES

PARTE 1 Prueba presuntiva Consta de: 3 PASOS

PARTE 2 Prueba confirmativa

Consta de : 4 PASOS

COLIFORMES TOTALES

Prueba confirmativa Consta de: 4 PASOS

 PARTE 1 (Prueba presuntiva)

PASO 1
Agitar muestra

INICIO

Solucin salina Peptonada con NaCl

Inoculacin de la muestra

En cada dilucin, homogeneizar muestra 24 movimientos por 7 segundos

En cada dilucin, utlizar una pipeta estril diferente

Incubar 48 hrs / 35 C

PASO 2

Observar si existe presencia o ausencia de los coliformes

PASO 3
FIN

Prueba confirmativa de Coliformes totales

INICIO
Caldo V.B

PASO 2 PASO 1

Colocar en gradilla tubos conteniendo Caldo Verde Brillante (9ml de caldo Verde brillante Vilis)

Inoculacion al costado del mechero para que no ingresen otras bacterias en nuestras muestras

PASO 4

PASO 3

FIN
Esta prueba de Coliformes totales dura 4 das en total

Leer tubos positivos

Incubar 48 hrs / 35 C

RESULTADOS

Se observo que existe coliformes totales en el regado de Carapongo( canal de abastecimiento de agua) luego de ver que es positivo se procedi ah realizar la siembra de tubos mltiples con el caldo verde brillante Bilis (fig 4. Anexos) una vez sembrado se hizo el mismo procedimiento. Luego de 48 horas se procede a sacar la muestra de la incubadora; una vez afuera se observo que presentaba gas en los tubos Dulham(fig. 5 Anexo) dando como resultados finales que existen coliformes totales y fecales en el canal de abastecimiento de carapongo.