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CROMATOGRAFIA PLANAR
Cromatografia Planar
Cromatografia planar
Tcnica simples e econmica; Aplicao qualitativa e quantitativa; Est baseada nas diferentes solubilidades relativas dos componentes da amostra.
Vantagens
Simples e econmica;
Aplicao da amostra
A amostra deve preferencialmente ser dissolvida num solvente voltil, aplicada com um capilar, num volume em L. As quantidades de amostras variam de 1 a 100 mg, e a mancha no papel deve ter um dimetro mximo de 0,5 cm.
Deteco da mancha
Mtodos qumicos;
Mtodos Fsicos.
Anlise qualitativa
Quando existe padro
aconselhvel, quando se realiza a anlise qualitativa e quantitativa de uma substncia ou mistura de substncias, trabalhar com padro e amostra em condies mais prximas possveis, evitando-se, dessa maneira os erros de anlise devido ao papel, fase mvel, temperatura e etc. Portanto deve-e executar a anlise cromatogrfica com amostra e padres colocados sempre na mesma folha de papel.
Quando no existe padro Eluir a mancha do papel com um solvente e identificar por outras tcnicas analticas.
Anlise Quantitativa
Diretamente no papel
Densitmetro; Comparao da intensidade das cores da mancha; Pela rea das manchas.
Tipos de desenvolvimentos
Ascendente Marca-se com um lpis o ponto de partida da amostra, a uns 2 cm de uma das bordas do papel, e marca-se a linha de chegada da fase mvel; possvel colocar vrias manchas do padro ou da amostra; No caso de misturas de substncias de componentes coloridos ou de misturas ou substncias incolores. Descendente Horizontal ( circular) Bidimensional
Confirmao da identidade
Identificao no conclusiva; Aplicao de outras tcnicas para confirmao da identidade. Co- cromatografia Recromatografar
Reaes especficas
Retirar a mancha do papel
Aplicaes
Aminocidos, peptdeos e protenas; Carboidratos; Vitaminas; cidos orgnicos,; Alcois Antocianinas; Compostos fenlicos; Flavorizantes naturais e artificiais; Corantes naturais e artificiais; Conservadores; Antioxidantes; Estabilizantes e emulsificantes; Resduos e pesticidas; Adulterantes em geral.
Vantagens
Fcil execuo; Rapidez; Versatilidade; Grande reprodutibilidade; Baixo custo
Tcnicas analticas
Processo de separao O processo que ocorre a adsoro, pois o soluto separado entre uma fase estacionria slida e uma fase mvel lquida. As tcnicas analticas utilizadas na separao em camada delgada so semelhantes s da cromatografia em papel.
Tipos de Fm e FE
Os adsorventes mais utilizados so: Slica, almina, celulose e poliamida
Na escolha da fase mvel deve-se considerar a natureza qumica da substancias a serem separadas e a polaridade da fase mvel.
Aplicao
CCD
20 cm x 20 cm
CCDAE
10 cm x 10 cm
1 L 5 L 7 10
0,1 L 0,2 L 10 - 20
3 mm 6 mm 10 cm 15 cm
30 min 200 min 20 m ~ 5 ng ~ 0,1 ng
1 mm 3 cm 6 cm
3 min 20 min 5 m ~ 0,5 ng ~ 0,01 ng
Obrigada !!!