PRCTICA 11

REACCIONES DE CARBOHIDRATOS

OBJETIVOS
Realizar diferentes pruebas de oxidacin para la determinacin de azcares reductores. Formacin de osazonas de algunos monosacridos.

MATERIAL
Tubos de ensayo Resistencia elctrica Vaso de pp de 250 ml Pinzas para tubo de ensayo Esptula Vidrio de reloj Embudo Bchner c/alargadera Matraz Erlenmeyer 125 ml Matraz Kitazato 250 ml con manguera Microscopio Pinzas de tres dedos c/nuez Portaobjetos 8 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1

SUSTANCIAS
Sol. de AgNO3 al 2.5% Sol. de NaOH 5% Glucosa al 5% Hidrxido de amonio 5% Fructosa al 5% Reactivo A de Fehling Manosa al 5% Reactivo B de Fehling Sacarosa al 5 % 10ml cido Ntrico conc. 5 ml Reactivo de Fenilhidrazina Reactivo de Benedict 5 ml 5 ml 10 ml 10 ml 1 ml 10ml 10 ml 10ml
10 ml

15 ml

INFORMACIN
Los azcares o carbohidratos pueden ser monosacridos, disacridos, trisacridos, oligosacridos y polisacridos. Los monosacridos reaccionan de acuerdo a los grupos hidroxilo y carbonilo que poseen. Los disacridos y los polisacridos se pueden hidrolizar para producir monosacridos. Los azcares que dan resultados positivos con las soluciones de Tollens, Benedict Fehling se conocen como azcares reductores, y todos los az[ucares que contienen un grupo hemiacetal dan pruebas positivas. Los carbohidratos que solo contienen grupos acetal no dan pruebas positivas con estas soluciones y se llaman azcares no reductores.

 La solucin de Benedict se utiliza en la determinacin cuantitativa de glucosa en la sangre. Las osazonas de los mono y disacridos son compuestos amarillos, que cristalizan en formas caractersticas de la solucin en que se producen. Tienen puntos de fusin caractersticos. Todos los azcares epmeros, que difieren en la configuracin del C-2, forman la misma osazona. Los monosacridos forman precipitados en caliente y los disacridos no. La glucosazona precipita en 2-3 minutos. En una suspensin del producto de reaccin se observan con el microscopio haces de cristales amarillos. El campo de la xilosazona se ve como cristales largos amontonados. La arabinosazona se presenta como cristales amarillos agrupados en roseta.

PRUEBA DE TOLLENS.
Coloque en un tubo de ensayo limpio 1 ml de solucin de nitrato de plata al 2.5%, agregue una gota de hidrxido de sodio al 5% y despus gota a gota y con agitacin una solucin de hidrxido de amonio al 5% justo hasta que se disuelva el xido de plata que precipit, evitando cualquier exceso de NH4OH. Este reactivo debe usarse recin preparado y debe destruirse con un exceso de cido ntrico al terminar de utilizarlo, ya que forma compuestos explosivos.

 Agregue al reactivo recin preparado 5 a 10 gotas de solucin del azcar, agite y caliente brevemente en bao mara, sin dejar de agitar durante el calentamiento. La aparicin de un espejo de plata indica prueba positiva para azcar reductor. Una vez terminada la prueba el tubo de ensayo se deber limpiar con cido ntrico para destruir el espejo de plata.

PRUEBA DE FEHLING.

Procedimiento
Mezcle 1 ml de solucin A y 1 ml de solucin B, agregue dos o tres gotas de la solucin del azcar, caliente a ebullicin. La formacin de un precipitado rojo y la decoloracin de la solucin indica prueba positiva para azcar reductor.

PRUEBA DE BENEDICT.

Procedimiento.
Procedimiento. Coloque en un tubo de ensayo 1 ml del reactivo de Benedict y cuatro o cinco gotas de la solucin del azcar. Caliente a ebullicin y deje enfriar a temperatura ambiente. Un precipitado cuya coloracin vara desde amarillo hasta rojo, con decoloracin de la solucin, indica prueba positiva.

Anote los resultados en el siguiente cuadro

FORMACIN DE OSAZONAS.

Procedimiento
Coloque en un tubo de ensayo limpio 10 gotas de la solucin del azcar y agregue 1.5 ml de la solucin de fenilhidrazina. Caliente la mezcla en bao de agua durante 10-20 minutos. Filtre los cristales, obsrvelos en un microscopio de bajo poder y determine su punto de fusin. El tiempo de formacin de la osazona y la apariencia de los cristales ser diferente para los distintos azcares, excepto para los epmeros en C-2

Anote los resultados en el siguiente cuadro

ANTECEDENTES
a) Estructuras de los principales monosacridos. b) Reacciones de oxidacin de los monosacridos. c) Reaccin de los monosacridos con fenilhidrazina (osazonas) d) Caracterizacin indirecta de azcares a travs de la formacin de osazonas. e) Q ue se entiende por epmero ? f) Propiedades fsicas, qumicas y toxicidad de reactivos y productos.

CUESTIONARIO
Por qu se considera reductor a un azcar? En que consisten las pruebas que nos permiten saber si un azcar es reductor? Escriba la reaccin de cada una de las pruebas efectuadas en la prctica. Se puede desechar libremente en el drenaje los efluentes lquidos obtenidos en cada prueba? Diga que tratamiento se les deber dar en cada caso para desecharlos al drenaje. Porqu no se debe tirar las sales de plata al drenaje? Asigne las bandas principales presentes en los espectros de I.R. a los grupos funcionales de reactivos y productos

ESPECTROS DE I.R. glucosa

Fructuosa

Manosa