La cuantificacin de cidos grasos Omega-3 y Omega-6 cidos en los alimentos por HPLC y deteccin Aerosol Cargado

Los cidos grasos omega son un grupo de compuestos que incluyen cidos grasos esenciales n-3 (por ejemplo, omega-3, cido [ALA]), n-6 (omega-6, linoleico y acidos araquidnico), y no esenciales n-9, (omega-9, por ejemplo, oleico y erucico) en analitos. Los cidos grasos omega-3, que incluyen tambin el cido eicosapentanoico (EPA) y cido docosahexanoico (DHA), son necesarios para el normal crecimiento. Tradicionalmente, los cidos grasos omega se median usando la cromatografa de gases (GC). Este enfoque es tedioso, consume tiempo, y a altas temperaturas pueden afectar a la estabilidad de cidos grasos poliinsaturados. El Thermo Scientiic Dionex Corona detector de aerosol cargado proporciona un enfoque universal basado en la masa que es sensible, con un amplio rango dinmico, y tiene una ventaja principal en que todos los analitos no voltiles dan respuesta similar independiente de la estructura qumica. No se requiere derivacin, y a diferencia de la deteccin UV, el analito no necesita contener un cromforo

Aqu se muestra un mtodo de HPLC en fase-reversa para la determinacin de cidos grasos omega en muestras de aceite / alimentos utilizando un mtodo de doble gradiente y deteccin aerosol cargado. Esta combinacin permite la determinacin de muchos cidos grasos en un solo anlisis, y sin la derivacion de la muestra que se requiere para el anlisis de GC. Se analizaron diferentes cidos grasos, incluyendo seis cidos grasos omega-3 cidos grasos (cido estearidnico [SDA], eicosapentanoico [EPA], cido [ALA], cido docosahexaenoico [DHA], cido docosapentanoico [DPA], cido eicosatrienoico [ETA]), cinco cidos grasos omega-6 cidos grasos (-linolnico [GLA], cido araquidnico [Arach.], cido linoleico [LLA], cido adrnico, y el cido eicosadienico [EDA]), y dos cidos grasos omega-9 (cidos oleico y ercico). Un cido graso omega-7, cido linoleico conjugado 14Z-9E (CLA), tambin fue incluido por su importancia citado como un nutriente. Deteccin de aerosol cargado ha sido utilizada con xito para caracterizar los lpidos de su clasificacion, incluyendo los fosfolpidos (fase reversa 5 y fase normal 6,7), acilglicridos, fitoesteroles, cidos grasos libres de alcoholes. Este mtodo complementa el mtodo de los cidos grasos libres, con mayor especificad para estos analitos y Thermo Scientiic Acclaim C30 columna de fase inversa.

1.Liquido fluyente que entra en el sistema de HPLC 2.Nebulizacin neumtica que se produce 3.Las gotas pequeas entran en el tubo de secado 4.Gotas grandes de salida para drenar 5.Partculas secas entran en la cmara de mezcla 6.Corriente de gas pasa por aguja de la corona 7.Choca gas cargado con partculas y cobran transferencia 8.Se eliminan las especies de alta movilidad 9.El resto de las partculas cargadas medidas con un electrmetro muy sensible 10.La seal se transfiere al software de datos cromatogrfico

Sistema de HPLC:

Thermo Scientiic Dionex UltiMate 3000 RSLC Dual Gradient

Volumen de inyeccin:
Fase mvil A: Agua / cido frmico / fase mvil B (900:3.6:100) Acetona / acetonitrilo / tetrahidrofurano / cido frmico (675:225:100:4) Columna: Acclaim

2,00 l

Detector: Corona ultra RS cargada detector de aerosol Corona Filtro: Corona nebulizador Temp: Tiempo de Ejecucin Total:
Alto

Fase mvil B:

C30, 250 x 3 mm, 3 m

Temperatura de la columna: 30 C Caudal, Eluyente Bomba de Gradiente: 1 ml /min Caudal, Inverso Bomba de Gradiente: 1 ml /min Bomba de gradiente de Bomba de Gradiente eluyente inverso Tiempo (min) %B Tiempo (min) %B 0.00 1.00 13.00 22.00 24.00 24.00 29.00 0.0 60.0 70.0 95.0 95.0 0.0 0.0 0.00 1.10 2.10 14.10 23.10 25.10 25.10 30.10 100,0 100,0 40.0 30.0 5.0 5.0 100,0 100,0

15 C
30.1 min

Fig.2 Cromatograma HPLC de 14 cidos grasos omega-libres.

SDA : cido estearidnico EPA: cido eicosapentanoico ALA: cido alfa linoleico DHA: cido docosahexanoico LlA: cido linoleico DPA: cido docosapentanoico ETA: cido ecosatrieoico

Los aceites no hidrolizan bien en esta solucin. Se utilizo un intercambio de isopropanol para el etanol que proporciono un mayor rendimiento de los cidos grasos libres para la hidrolizacin de las muestras.

51 % cido Eurico 11% cido oleico 21% cido linoleico 13% cido alfa linoleico

Se detectaron un total de 38 picos . Doce muestras adicionales fueron hidrolizadas de manera similar. fig. 2

CUANTIFICACION DE ACIDOS GRASOS OMEGA 3 Y 6 PRESENTES EN LOS ALIMENTOS:

se presentaron sobre la base de la proporcin de cidos grasos omega 3 y omega 6 (mas alto a la mas baja).
El aceite del pescado tiene la proporcin mas alta, lo que explica su uso como un suplemento de aceite omega 3. Ganado alimentado con pasto fue determinado que tiene una relacin de 1 (cerca de los valore 0.3-0.7) El pollo se determino con una relacin de 0.62 diferente de los cidos grasos comercial 0.05.

El aceite de ricino se puso a prueba para evaluar el desempeo del mtodo con otros aceites. Se encontr un nico acido graso, aceite de ricino. Presenta un 83% de rea, similar al valor referencial de 90%.

El uso de este mtodo es posible obtener los anlisis cuantitativos de los diferentes cidos grasos (omega 3-6 y 9) Las muestras fueron hidrolizadas para separar los cidos grasos de su esqueleto de glicerol y se analizaron glicerol y se analizaron directamente usando HPLC con deteccin de aerosol cargada. Se analiz una amplia variedad de muestras, incluyendo los aceites de origen animal y de origen vegetal, en el mostrador suplementos, y grasas de carne. La fase mvil utilizada aqu es compatible con espectrometra de masas, lo que permite la posibilidad de la identificacin de cidos grasos libres desconocidos que pueden existir en una muestra.