Fosforilacin Oxidativa

La Fosforilacin Oxidativa es el proceso por el cual se sintetiza ATP como resultado de la transferencia de electrones desde el NADH o el FADH2 al O2 a travs de una serie de transportadores de electrones conocida como Cadena Respiratoria La Oxidacin y la Sntesis de ATP estn acopladas mediante el Flujo de Protones a travs de la membrana mitocondrial interna

E. Kennedy y A. Lehninger
(1948)

Produccin de ENERGIA qumica: ATP

Origen del NADH a partir de deshidrogenasas NAD dependientes

Piruvato Acetil CoA
GLUCOLISIS ETAPA AEROBICA

Isocitrato - Cet Glutarato Cet Glutarato- Succinil CoA Malato Oxal Acetato Glutamato - Cet Glutarato 3 Hidroxiacil CoA - Cetoacil CoA
OXIDACION ACIDOS GRASO

CAT

Principales Componentes Qumicos

Hierro Sulfo Protenas

Citocromos

Ubiquinona

CITOCROMOS David Keilin 1925

Protenas transferidoras de electrones, slo clulas aerbicas.

Son HEMOENZIMAS
Experimentan cambios reversibles de valencia Fe(II)/Fe(III)

durante su ciclo cataltico

Deben ser rpidos y especficos al paso de electrones a travs de complejos acoplados protena-protena y a distancias relativamente grandes (> 10) Otras hemoenzimas son Catalasas y Peroxidasas

protena

protena

Hemo en citocromo c

Hemo c

Grupo Prosttico HEMO: Hay tres tipos de grupos HEMO y son A,B y C dependiendo de los sustituyentes de las cadenas laterales. El HEMO C es el nico que es enlazado covalentemente a una protena por medio de residuos de Cisteina

Hemo en citocromo c

Citocromos

Citocromo c

HIERRO con 6 enlaces de coordinacin:

4 coordinan con los N del tetrapirrol 2 con los aa de la Protena (His 18 y Met 80)

HIERRO SULFO PROTEINAS

Protenas con Hierro no Hemnico Centros Hierro Azufre: Son grupos prostticos que contienen 1-4 tomos de hierro, acomplejados a una combinacin de Azufre y Cisteina-Azufre. Actan como transportadoras de electrones, experimentando transiciones reversibles Fe(II) Fe(III) Las protenas de transferencia de electrones pueden contener mltiples centros Fe-S.

Hierro 1 Fe Azufre Inorgnico Azufre de la Cistena

2 Fe 2 S

4 Fe 4 S

Centros Hierro-Azufre

Coenzima Q - Ubiquinona

DIAGRAMA DE CADENA RESPIRATORIA

Componentes de la Cadena de Transporte Electrnico Mitocondrial

Complejo I: Complejo II: NADH-Q reductasa NADH deshidrogenasa Succinato-Q reductasa Succinato deshidrogenasa Q- citocromo c oxidoreductasa Citocromo reductasa Cit c Citrocromo oxidasa

Complejo III:
Complejo IV:

Componentes de la Sntesis de ATP Complejo V: ATP sintasa

Cadena Respiratoria Fosforilacin Oxidativa

COMPLEJO I
Cataliza la oxidacin del NADH mediante una serie de etapas. En el hombre este complejo incluye incluye 43 protenas.
Transferencia Inicial de eNADH + H+ + FMN NAD+ + FMNH2

Reoxidacin en centros Fe-S

FMNH + (Fe-S)ox FMN + (Fe-S)red + H+

Los e- pasan a travs de una serie de centros Fe-S en el Complejo I, y son transferidos a la Coenzima Q. La coenzima Q acepta 2 e- y lleva 2 H+ para producir QH2

eFADH2

COMPLEJO II Este complejo enzimtico transfiere electrones del succinato a la coenzima Q. En esta etapa no se produce translocacin de protones a travs de la membrana. El FAD del complejo II es reducido a FADH2 durante la oxidacin de succinato a fumarato (ciclo de Krebs). FADH2 es re-oxidado por la transferencia de electrones a travs de centros Fe-S del complejo II a coenzima Q, produciendo QH2.
La coenzima Q acepta 2 e- y lleva 2 H+ para producir QH2

Otras Enzimas Flavn deshidrogenasas

Acil (graso) CoA trans Enoil CoA Glicerofosfato Fosfato de dihidroxiacetona

Complejo II
Succinato Q reductasa

COMPLEJO III
Cataliza la transferencia de electrones desde QH2 al citocromo c, bombeando Protones a travs de la membrana membrana mitocondrial interna.
El centro de hierro-azufre en una de las mitades del dmero interacta con la Coenzima QH2 enlazada y el hemo c1 en la otra mitad del dmero. Complejo III acta en el bombeo de H+

Antimicina A Inhibidor

Se muestran 4 centros redox fundamentales.

El citocromo b contiene 2 grupos Hemo bH y bL. La Hierro Sulfo Protena contiene un centro 2Fe-2S. El citocromo c1 contiene otro grupo Hemo

Cit c1
Fe-S Cit b1 Cit b2

Los grupos hemos b se sitan para proveer una va para la transferencia de electrones a travs de la membrana.
. El centro Fe-S extrae un e- desde la Co Q, y luego se acerca ms al hemo c1 (citocromo c1) al cual transfiere el e-. La protena del centro de hierro-azufre aparece en verde

Citocromo c
Hemo

COMPLEJO IV
Los 4 e- son transferidos de a uno a la vez dentro del complejo. Los dominios intermembrana del Complejo IV consiste principalmente de estructuras -helices.

Centros Metalicos
HIERRO en los Hemo A y Hemo A3. COBRE A (CuA, consistente de 2 atomos de cobre adyacentes) COBRE B MAGNESIO y ZINC. El O2 reacciona en un centro binuclear, compuesto de Hemo A3, COBRE B.

Cobre A

Hemos Hierro

Cobre B
Monxido carbono

O2 + 4 H+ + 4 e- 2 H2O

Componentes de la Sntesis de ATP

Complejo V: ATP sintasa, ATPasa

COMPLEJO V: ATP Sintetasa

F1 : la sub unidad cataltica, hecha de 5 tipos de cadenas

de pptidos con la estequiometra 3, 3, g, d , e.

Fo : un complejo de protenas integrales de membrana que media en el transporte de protones (canal de protones) El complejo F1Fo acopla la sntesis del ATP al transporte de H+ hacia la matriz mitocondrial.

Se requiere el transporte de por lo menos 3H+ por cada

ATP sintetizado.

Complejo V ATP asa

Conducto de Protones Espacio intermembrana

Matriz

Los componentes funcionales seran (1) un rotor anillo c y talloge (2) unidad esttica: el resto de la molcula

F1 ATPasa

La subunidad g rompe la simetra del hexmero 33. Cada subunidad interacciona diferente con g

La subunidad F0 contiene el Conducto de Protones. Est formado por un anillo c de 10-14 unidades
El flujo de protones a travs del canal proporciona la fuerza de rotacin de F1
F0Subunidad c

MECANISMO DE SINTESIS DE ATP

Las responsables son las 3 subunidades , que pueden estar en 3 estados conformacionales diferentes: T tenso, L relajado, O abierto.

La interconversin entre los 3 estados est dirigida por la rotacin de la subunidad g. L

El estado T contiene fuertemente el ATP recin sintetizado que no se puede liberar. El estado O puede desprender al ATP. El estado L tiene una gran afinidad por el ADP y Pi

La ATPasa est guiada por la Fuerza protomotriz

- gradiente de pH

- potencial de membrana Un potencial de membrana positivo favorece la sntesis de ATP al provocar una alta concentracin local de H+ en la regin entre F0 y F1 La translacin de 3 H+ a travs de la ATPasa origina la sntesis de un ATP

Actualmente la estimacin ms correcta de los H+ bombeados desde la matriz por cada par de ees:
NADH-Q reductasa

4 H+
2 H+ 4 H+

Citocromo reductasa Citocromo oxidasa

La sntesis de una molcula de ATP est guiada por el flujo de 3H+ a travs de la ATPasa.

El transporte de un ATP de la matriz al citosol supone un costo de un H+ adicional

Glucolisis: Glucosa Piruvato (citosol) [ 1 1 +2 +2] = +2 ATP +2 NADH Piruvato Acetil CoA (mitocondria)

+2 NADH Ciclo de cidos Tricarboxlicos

+ 2 ATP (GTP)

+6 NADH
+2 FADH2
(+10 x 2.5) (+2 x 1.5)

+ 4 ATP

+ 25ATP + 32 ATP

+3 ATP

Mecanismo de Lanzadera del glicerofosfato

Mecanismo de Lanzadera malato aspartato (corazn hgado)