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Medicin de colonias microbiolgicas en un alimento.

SAUL ANTONIO PEARANDA CANOSA QUIMICO _ MSc.

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MEDICIN DE COLONIAS MICROBIOLGICAS EN UNA BEBIDA.

Se tiene un caso que presenta una distribucin sesgada de la variable de salida (Cmo propone un DEE para estudiar esta FDP?). Se tiene un caso en el que se usa el mtodo de combinacin relativa.

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MEDICIN DE COLONIAS MICROBIOLGICAS EN UNA BEBIDA.

Este ejemplo describe la evaluacin de la incertidumbre de la medicin de concentracin de colonias de bacterias en una muestra de bebida alcohlica. Se presenta una medicin de una sola placa y sin dilucin de la muestra.

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PROCEDIMIENTO
El anlisis consiste en tomar una muestra de 10 ml y vaciarla en una placa que contiene un medio de cultivo. Se coloca la placa en un lugar asptico a una temperatura de 37 C 2 C durante 24 horas. Se identifica el tipo de bacteria y se cuentan el nmero de colonias (100 u). La medicin se realiza una sola vez, es decir es de una placa.

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Identificar las variables

Haciendo un anlisis del proceso de medicin se definen las siguientes variables aleatorias de entrada que estn involucradas en el proceso de medicin y que pueden afectar al resultado: 1. Falsos negativos de la respuesta, P.

2. Dispersin de las partculas, D.

3. Volumen de la muestra, V. 4. Incertidumbre de la lectura por el conteo del nmero de colonias, n.

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Modelo (DEE)

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De un estudio (proponga un DEE) de falsos negativos, se encontr un valor para P de 0,90 de eficiencia. Es decir de 100 presuntivos positivos se confirmaron 90.

Se supone (proponga un DEE) una suspensin homognea de las partculas.

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La relacin para calcular la concentracin, conforme el procedimiento es por lo tanto:

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INCERTIDUMBRE DE LAS MEDICIONES EN MICROBIOLOGA

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CALCULO DE LA INCERTIDUMBRE DE LAS MEDICIONES EN MICROBIOLOGA

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ECUACIN BSICA DE CALCULO EN LOS MTODOS MICROBIOLGICOS CUANTITATIVOS

COMPONENTES BSICOS
c = estimacin de la concentracin de bacterias en la muestra (ufc). F = factor de dilucin, es igual al reciproco de la dilucin. Z = conteo de colonias en la suspensin final (placa). V = volumen de la suspensin final usada para la cuantificacin de bacterias.

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RESULTADOS EN 1 CAJA DE PETRI

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Mtodo de la combinacin relativa

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INCERTIDUMBRE COMBINADA

Sobre la base de que no existe una correlacin entre las variables independientes, la incertidumbre combinada relativa es estimada como:

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INCERTIDUMBRE RELATIVA POR FALSO NEGATIVO, uP

De un estudio de falsos negativos, se encontr un valor para P de 0,90 de eficiencia. Es decir de 100 presuntivos positivos se confirmaron 90.

La incertidumbre de este valor se estima usando una funcin binomial:

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INCERTIDUMBRE RELATIVA POR DISPERSIN DE PARTCULAS, u

Suponiendo que existe una suspensin homognea. La incertidumbre por dispersin de las partculas se puede estimar asociando una funcin de Poisson; a la que se le asocian infinitos grados de libertad.

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INCERTIDUMBRE RELATIVA POR EL VOLUMEN DE LA MUESTRA, uV

Se toman 10 ml de muestra medidas con una pipeta volumtrica. La incertidumbre de la medicin del volumen se estima considerando los errores por la temperatura del agua y por los instrumentales del recipiente volumtrico.

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INCERTIDUMBRE RELATIVA POR EL VOLUMEN DE LA MUESTRA, uV

Para la medicin del volumen V, el certificado del fabricante del recipiente volumtrico indica que el error esperado en la medicin del volumen, si se usa a condiciones normales de 20 C, es de 0,02 ml. Considerando que esto es verdad, se le asocia un funcin de probabilidad simtrica uniforme con infinitos grados de libertad

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INCERTIDUMBRE RELATIVA POR EL VOLUMEN DE LA MUESTRA, uV

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INCERTIDUMBRE RELATIVA POR EL VOLUMEN DE LA MUESTRA, uV

El laboratorio se encuentra a condiciones ambientales de 20 C 5 C. La incertidumbre en el volumen por efecto en el vidrio no es apreciable. Sin embargo, el efecto de temperatura en el lquido si es de considerar. Este se evala considerando una funcin de probabilidad simtrica uniforme con infinitos grados de libertad.

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INCERTIDUMBRE RELATIVA POR EL VOLUMEN DE LA MUESTRA, uV

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La incertidumbre combinada de V por error instrumental y temperatura del lquido se estima como:

INCERTIDUMBRE RELATIVA POR EL VOLUMEN DE LA MUESTRA, uV

Para estimar esta incertidumbre de forma relativa, se divide la uv entre V.

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INCERTIDUMBRE RELATIVA POR EL VOLUMEN DE LA MUESTRA, uV

Se acepta una suma cuadrtica ya que la combinacin de dos distribuciones uniformes lleva a una distribucin gaussiana. Como en ambas variables se asignaron infinitos grados de libertad, se estima que los grados de libertad combinados son infinitos.

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INCERTIDUMBRE RELATIVA POR CONTEO, un

De un estudio de repetibilidad con muestras semejantes, se estima un valor de incertidumbre normal por conteo del 5 %. Se considera que la evaluacin es confiable. Por lo tanto, se le asignan infinitos grados de libertad.

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CLCULO DE LA INCERTIDUMBRE COMBINADA, uC

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CLCULO DE LA INCERTIDUMBRE RELATIVA EXPANDIDA ABSOLUTA, U.

Debido a que la funcin de densidad de probabilidad de este tipo de mediciones es sesgada, habra que resolver este caso por simulacin. Sin embargo, considerando que la principal fuente de incertidumbre es el problema de dispersin D, una opcin propuesta es utilizar una aproximacin emprica al 95 % de una distribucin binomial inversa.

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CLCULO DE LA INCERTIDUMBRE RELATIVA EXPANDIDA ABSOLUTA, U.

La incertidumbre corresponde a un intervalo sesgado.

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RESULTADO DE LA MEDICIN

La concentracin de colonias obtenida en la muestra es de:

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INCERTIDUMBRES EN LA MEDICION DE COLONIAS MICROBIOLOGICAS EN UNA BEBIDA

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RESULTADOS EN 2 CAJAS DE PETRI

Proponga un diseo de experimentos