BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR

Dr. M.A. JAIME CH

La Biologa Celular, o Citologa, es la disciplina que estudia las propiedades, estructura, funciones y el ciclo vital de las clulas. Cualquier organismo exhibe un plan maestro de organizacin nico. El campo de estudio de la Biologa Celular y Molecular es este plan de organizacin. Es el anlisis de las molculas y clulas que constituyen los bloques con los que se construyen todas las formas de vida, es el tomo y la molcula como puntos de partida para explicar las funciones de la clula

El primer M.C. (de dos lentes), fue construido por Z. Jansen a fines del siglo XVI (1595). En 1665 ROBERT HOOKE, public el libro Micrographa, el relato de 50 observaciones microscpicas. Aqu aparece por primera vez la palabra clula Robert Hooke haba practicado finsimos cortes en el corcho y los examin en su M.C. percibiendo su apariencia porosa, llam a estos poros cellullae, celdillas por su parecido a las celdas de un monasterio. En realidad lo que Hooke haba observado eran las paredes vacas de un tejido vegetal muerto. Por esta razn a l se le atribuye el trmino clula. Fue miembro de la Royal Society de Londres

Al holands Anton Van Leewenhoeck (tallador de lentes y constructor de microscopios) se le atribuye las primeras observaciones de microorganismos vivos en distintas muestras: agua estancada, sarro dentario, semen, etc. En 1838, Mathas Schleiden, botnico y en 1939, Theodor Schwann, zologo publicaron un trabajo muy completo acerca de las bases celulares de la vida vegetal y animal, concluyendo que las clulas de las plantas y los animales eran estructuras semejantes y propusieron: La clula es la unidad estructural de la vida

Tambin se les atribuye a Schwann y Shleiden, entre otros, el segundo postulado de la Teora Celular: La clula es la unidad fisiolgica de todo ser vivo. Para1855, Rudolf Virchow, patlogo alemn, propuso una hiptesis para el tercer dogma de la teora celular: Las clulas solo pueden originarse por divisin de una clula preexistente.

PROPIEDADES DE LA CLULA

Las clulas muestran complejidad y organizacin elevadas Las clulas poseen un programa gentico y los recursos para aplicarlos
Las clulas tienen la capacidad para reproducirse a s mismas Las clulas captan y consumen energa

Las clulas efectan variadas reacciones qumicas Las clulas participan en numerosas actividades mecnicas
Las clulas responden a estmulos y tienen capacidad de autorregulacin

NIVELES DE ORGANIZACIN EN BIOLOGA Se puede ver un orden biolgico en cada organismo en el mundo: los niveles de organizacin; desde los tomos y molculas hasta alcanzar el mximo nivel, el de la bisfera. Los tomos y molculas se organizan para formar estructuras y stas a su vez forman clulas. La clula es el primer nivel bitico de la materia y es la base de los tejidos, rganos, aparatos y sistemas y, finalmente el ser vivo.

Los seres vivos son el objeto de estudio de la biologa, pero hasta el momento no se ha podido establecer un concepto unificador que logre una definicin apropiada de ellos. Se pueden establecer dos niveles generales de organizacin: el abitico y el bitico. El primero de ellos es considerado un nivel qumico y lo constituyen:

El tomo.-

Cada sub partcula del ncleo cuenta para obtener la masa atmica;para el nmero atmico debemos considerar slo la suma de protones de ese tomo. Por su lado, los electrones poseen una carga elctrica negativa.

La molcula.tomos de la misma clase (elemento) o de diferentes clases (compuestos) forman molculas; algunas molculas elementales son monoatmicas, es decir, estn formadas por un solo tomo y se representan poniendo el smbolo del elemento (Na, K, etc.). No obstante dos o ms tomos forman la mayora de las molculas elementales (O2, Al3, etc.).

Cuando tomos diferentes se combinan para formar molculas, stas son llamadas compuestos; ejemplo el agua -H2O-: formada por 2 tomos de hidrgeno y uno de oxgeno. Los compuestos pueden ser: orgnicos o inorgnicos

Las estructuras del ser vivo se construyen de compuestos orgnicos; carbohidratos, lpidos, protenas y cidos nucleicos se organizan para formar las estructuras celulares. Las molculas crecen en su nivel de organizacin; a partir de ellas se constituyen las macromolculas (almidn, glucgeno, glucolpidos, etc.), supramolculas (protenas complejas, cidos nucleicos, etc.) y finalmente las estructuras (membranas celulares,

Ninguno de los anteriormente mencionados tiene vida propia. Una vez que se organizan y se interrelacionan disean finalmente una clula y sta es ya un nivel diferente de organizacin: el celular. En el nivel celular, primer nivel bitico, las molculas se organizan para construir estructuras con funciones especficas, segn los materiales con que ellas son formadas.

No todas las clulas tienen el mismo grado de organizacin; las procariotas como las bacterias- estn precariamente organizadas, pues carecen de un verdadero ncleo y de sistemas endomembranosos, a diferencia de las eucariotas clulas de animales y vegetales- que tienen una carioteca y organelos con funciones especficas. El nivel pluricelular est constituido por seres formados por ms de una clula; surge de la diferenciacin y especializacin celular. Aqu encontramos distintos niveles de complejidad: tejidos, rganos, aparatos y sistemas.

CULTIVO CELULAR Es un trmino utilizado para denominar el crecimiento de clulas en condiciones de laboratorio in vitro-, incluyendo el cultivo de clulas aisladas. En estos tejidos las clulas no estn organizadas en verdaderos tejidos.

permiten el mantenimiento de clulas viables fuera del rgano o tejido al que pertenecen, manteniendo al mximo sus propiedades fisiolgicas, bioqumicas y genticas.

Tipos de cultivos: de rganos, explantes (tejido vivo separado de su rgano propio y trasferido a un medio artificial), primarios, secundarios Un cultivo primario es aquel iniciado a partir de clulas, tejidos u rganos tomados directamente de un organismo. Debe ser considerado como tal hasta que se cultive (o repique) con xito por primera vez; en este momento se considera ya una lnea celular.

El cultivo de tejidos se desarroll a partir de finales del siglo XIX (1885), cuando Wilhem Roux mantuvo clulas de embrin de pollo en solucin salina por unos das; pero es R.G. Harrison, en 1907, quien fue el primero que emple tcnicas in vitro para cultivar mdula espinal embrionaria de anfibios para observar el crecimiento de los axones del neuroblasto. El cultivo se realiz en una gota de linfa del mismo anfibio

La gran limitacin para cultivos in vitro era conseguir un medio adecuado; Burrows (1910) emple plasma de pollo para nutrir los explantes de tejidos embrionarios de pollo, con lo que consigui observar el crecimiento del tejido nervioso, cardico y de piel. Burrows y Carrell prolongaron la vida de los cultivos mediante los subcultivos.

Dentro de las ventajas podemos sealar: -Permitir el control del medio fisicoqumico: pH, temperatura, presin osmtica, tensin de O2 y CO2 - Permite el control de las condiciones fisiolgicas, que deben ser constantes. - Permite someter a las clulas en cultivo a una baja y definida concentracin de reactivos, asegurando un acceso directo a ellas, economizando un 90% de reactivos para lo mismo, pero in vivo. - Permiten el estudio del transporte y la utilizacin de los metabolitos.

De las desventajas, tenemos: - Se necesitan estrictas medidas de asepsia. - Para la mayora de clulas animales es necesario agregar a los medios algunos suplementos tales como: sueros, plasma y fluidos intersticiales, etc., a objeto de proveer a las clulas cultivadas de un medio lo ms semejante a su medio natural (Freshney, 1995). - Una gran limitacin en el cultivo de clulas es el gasto de esfuerzo y materiales para la produccin de de pequeas cantidades clulas o de tejidos.

Mtodo que utiliza la propiedad de sedimentacin de partculas con base en la masa de las molculas para su separacin dentro de una solucin. Obtenido el lisado u homogenado celular se ha de proceder a su fraccionamiento. La centrifugacin diferencial se basa en la existencia de diferentes partculas en la suspensin que difieren en su densidad de la del medio. Se pueden sedimentos que corresponden a fracciones de partculas de diferente tamao y/o densidad.

TCNICAS EN CITOLOGA.- LA CENTRIFUGACIN

Si se centrifuga por poco tiempo y poca fuerza de aceleracin, sedimentarn las partculas mayores y/o ms densas. Cuando el sobrenadante de la primera centrifugacin es centrifugado en mayor tiempo y mayor fuerza de aceleracin,sedimentan de nuevo las partculas ms densas presentes y as sucesivamente.

QUMICA DE LA MATERIA VIVA Es el estudio de la composicin y de los procesos qumicos que tienen lugar en los seres vivos; implican, necesariamente, transformaciones drsticas en las sustancias que intervienen en ellas, porque las que inician una reaccin no son las mismas en esencia y propiedades de las que se obtienen como productos finales.
C6 H12 O6 + O2 CO2 + H2O + Energa

La materia viva se organiza y constituye a partir de los bioelementos o elementos biogensicos. Se menciona que hasta un 70% de los elementos conocidos se encuentran en la materia viva, pero que slo el 20% se hallan en forma constante

Propiedades - Bajo peso atmico; se sabe que la estabilidad de las biomolculas y de las estructuras orgnicas estn en razn inversa al peso atmico de los elementos que los constituyen - Abundantes y accesibles; los bioelementos tienen que estar en nuestro entorno inmediato en cantidad suficientes y ser de fcil accesibilidad - Afinidad

LAS SALES MINERALES Las sales minerales son biomolculas inorgnicas de fcil ionizacin en presencia de agua, que aparecen en los seres vivos de forma precipitada, disuelta en forma de iones o asociada a otras molculas.

Las sales minerales disueltas en agua siempre estn ionizadas; es decir, manifiestan cargas elctricas positivas o negativas. Los cationes ms abundantes en la composicin de los seres vivos son: Na+, K+, Ca2+, Mg2+ . Los aniones ms representativos en la composicin de los seres vivos son: Cl-, PO43-, CO32-.

En este estado realizan las siguientes funciones: Mantener el grado de grado de salinidad. Amortiguar cambios de pH, mediante el efecto tampn. Controlar la contraccin muscular Producir gradientes electroqumicos Estabilizar dispersiones coloidales.

Asociadas a otras molculas Los iones pueden asociarse a molculas, permitiendo realizar funciones que, por s solos no podran, y que tampoco realizara la molcula a la que se asocia, si no tuviera el in. La hemoglobina, por ejemplo, es capaz de transportar O2 por la sangre porque est unida a un Fe++. Los citocromos actan como transportadores de electrones porque poseen Fe+++.

La clorofila captura energa luminosa en el proceso de fotosntesis por contener un in Mg++ en su estructura.

Los ribosomas se estructuran como unidad funcional si tienen Mg++ para sintetizar protenas.
Tambin actan como cofactores de muchas enzimas