DNA e Sntese de Protenas

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So unidades estruturais e funcionais dos organismos. Utilizando o seu programa gentico, produzem molculas especficas que permitem o crescimento e a renovao celular.

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Entre a diversidade de molculas sintetizadas, as protenas, com as suas sequncias de aminocidos, so molculas essenciais vida.

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Quando se observa uma fotografia com vrios membros de uma famlia, provavelmente possvel identificar entre esses membros certas semelhanas ao nvel da estatura, cor dos olhos e caratersticas da face.

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H traos familiares que resultam de uma hereditariedade comum. Cada membro dessa famlia exibe caratersticas que o distinguem de todos os outros. Cada indivduo nico.

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A existncia de semelhanas e diferenas deve-se ao facto de cada organismo ter um programa gentico que herdado dos seus antepassados, mas que no repetido.

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O suporte fsico da informao necessria para o desenvolvimento de um ser vivo permaneceu desconhecido at meados do sculo XX. Durante as primeiras dcadas do sculo passado, considerava-se que a informao necessria para formar um ser vivo estaria contida nas protenas.

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Esta ideia resultava de, nessa poca, se conhecer uma impressionante diversidade de protenas, com estruturas bem complexas. Sabia-se que determinadas doenas hereditrias estavam associadas falta de determinadas enzimas.

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As investigaes que se foram realizando vieram mostrar que um outro grupo de molculas os cidos nucleicos era responsvel pelo armazenamento da informao gentica.

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A partir de clulas com grandes ncleos, isolou uma substncia de elevado peso molecular a nuclena. Anos mais tarde esta substncia foi chamada ADN.

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Este cido foi praticamente ignorado pelos bilogos durante quase um sculo. Considerava-se, de forma generalizada, que as protenas nucleares eram as macromolculas portadoras da informao gentica.

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O ADN comparado com a complexidade e diversidade das protenas, parecia muito simples para explicar as caratersticas especficas de cada organismo.

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Trabalhava com bactrias, conhecidas na poca como pneumococus e actualmente pertencentes espcie Streptococcus pneumoniae. Algumas estirpes de S. pneumoniae produzem uma cpsula de polissacardeos, enquanto que outras estirpes so desprovidas de cpsula.

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Quando cultivadas em caixas de Petri, as estirpes que produzem cpsula formam colnias com aspecto liso, enquanto que as estirpes no capsuladas crescem, originando colnias com aspecto rugoso.

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As estirpes capsuladas so designadas por tipo S (smooth, liso). As estirpes no produtoras de cpsula so chamadas tipo R (rough, rugoso). As estirpes lisas de S. pneumoniae so virulentas, podendo provocar pneumonia e outras infees em mamferos. Nos ratos estas infees so geralmente fatais.

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Verificou que as bactrias do tipo R no eram patognicas, enquanto que as do tipo S provocavam pneumonia que conduzia os ratos morte. Quando sujeitas ao calor, as bactrias do tipo S eram mortas, deixando de provocar pneumonia.

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Observou que ao inocular os ratos, com uma mistura de bactrias vivas do tipo R com bactrias do tipo S mortas pelo calor, os ratos contraam pneumonia e morriam.

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Verificou ainda que surgiam bactrias vivas do tipo S no sangue destes ltimos ratos. Este facto sugeria que as bactrias do tipo S conseguiam transmitir a sua virulncia s bactrias do tipo R (no virulentas), que se tornavam patognicas e capazes de provocar pneumonia.

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No conseguiu explicar o fenmeno. Uma possvel explicao era a de que as bactrias mortas do tipo S transmitiam alguma informao s bactrias do tipo R, de tal forma que estas eram capazes de produzir uma cpsula, tornando-se, assim, virulentas.

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Esta informao deveria ser transmitida por uma substncia qumica, o princpio transformante, pelo facto de transformar um tipo de bactrias noutro.

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Descoberta do princpio transformante. Suspeitavam que o DNA pudesse ser o princpio transformante. Ao tratarem o DNA proveniente das bactrias tipo S com proteases e RNAases, no conseguiram evitar a transformao das estirpes no virulentas em virulentas.

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Ao fazerem o tratamento com enzimas que degradam o DNA, a transformao foi impedida. Assim, os investigadores concluram que o DNA era o princpio transformante, que passa das bactrias do tipo S mortas para as bactrias do tipo R, dando-lhes a informao necessria para que estas produzam cpsulas e se tornem virulentas.

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Ao marcarem radioativamente as protenas e o DNA virais puderam seguir o trajeto destas molculas. Verificaram que as protenas presentes na cpsula no penetram na bactria, ao contrrio do DNA.

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No interior da bactria, o DNA viral toma o comando da clula bacteriana. A bactria passa a produzir cpias do DNA viral, bem como protenas que iro constituir a cpsula dos novos vrus.

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Ficou demonstrado que o DNA contm a informao necessria para a produo de novos vrus, sem interveno das protenas virais. Concluram que o DNA o suporte da informao gentica e no as protenas.

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Realizaram vrios estudos na interpretao de radiogramas da difrao dos raio X atravs de DNA cristalizado.

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Observaes realizadas com o microscpio electrnico revelaram que a espessura de uma molcula de DNA (2nm) dupla da de uma cadeia polinucleotdica (1nm).

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Sintetizaram num modelo nico e coerente o que se sabia at ao momento sobre a estrutura do DNA.

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A longa molcula de DNA, em forma de dupla hlice, assemelha-se a uma escada enrolada helicoidalmente. As bandas laterais da hlice so formadas por grupos fosfato, alternando com molculas de acar e os degraus centrais so pares de bases ligados entre si por pontes de hidrognio.

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As cadeias complementares da molcula de DNA so cadeias antiparalelas, ou seja extremidade 3 livre de uma cadeia corresponde a extremidade 5 da outra.

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A estrutura do DNA a mesma em todas as espcies.

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Cada organismo possui um patrimnio gentico que o torna nico. O DNA o suporte molecular da informao gentica. Coordena todas as atividades celulares e transmitida a todas as clulas-filhas no decurso do desenvolvimento.

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Contm a linguagem da vida. A identificao da composio e estrutura desta biomolcula constitui um marco importante na biologia molecular.

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Grupo fosfato confere molcula caratersticas cidas. Acar com 5 tomos de carbono (pentose) a desoxirribose/ribose. base azotada a timina e a citosina tm anel simples, a adenina e a guanina tm anel duplo.

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muito importante, pois nessas sequncias que est codificada a informao gentica que define as caratersticas de cada indivduo.

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Em cada espcie, os valores da adenina so muito prximos dos da timina e os valores da guanina so muito prximos dos da citosina.

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(A+G)/(T+C) aproximadamente igual a 1. Ou seja a quantidade de A+G sempre igual quantidade de T+C.

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Apresentam uma estrutura em anel simples. Ex citosina, timina e uracilo

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Apresentam um anel duplo. Ex adenina e guanina.

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Os carbonos da desoxirribose so numerados sequencialmente da direita para a esquerda. O primeiro carbono 1' (l-se como um linha), o segundo 2' (dois linha), e assim sucessivamente. A base azotada liga-se ao carbono 1', e o grupo fosfato ao carbono 5'. O nucletido abaixo ligado covalentemente ao carbono 3'.

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Isso significa que correm em sentidos opostos. Uma comea com 5' e termina com 3' enquanto a outra comea com 3' e termina com 5'. Por conveno a fita de sentido 5' --> 3 ' colocada na esquerda num desenho bidimensional.

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Por reaes de condensao, os nucletidos podem ligar-se sequencialmente e formar uma cadeia polinucleotdica.

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Cada novo nucletido liga-se pelo grupo fosfato ao carbono 3 da pentose do ltimo nucletido da cadeia, repetindo-se o processo na direo 5 3.

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Ao ltimo nucletido que tem o carbono 3 com o grupo OH livre, pode ligar-se um novo nucleotdo pelo grupo fosfato.

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Genes segmentos de DNA com uma sequncia nucleotdica prpria, que contm determinada informao. O n e a sequncia de nucletidos diferem de gene para gene. A ordem dos nucletidos num gene possui um significado preciso, pode codificar a expresso de um carter.

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Uma outra sucesso de nucletidos conduz expresso de uma outra caraterstica. a sequncia de nucletidos que transporta a mensagem gentica.

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Embora existam quatro nucletidos diferentes no DNA, cada um pode estar presente um grande nmero de vezes e podem existir diferentes sequncias desses nucletidos. Assim possvel uma grande diversidade de molculas de DNA.

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Cada indivduo nico, tem o seu prprio DNA. Pode falar-se em universalidade e variabilidade desta molcula.

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A totalidade de DNA contido numa clula.

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Antes de Watson e Crick apresentarem o seu modelo, nada tinha sido propsto relativamente replicao do DNA (modo como se duplica o DNA antes da diviso celular).

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Cada uma das cadeias formadas uma rplica das originais. As novas molculas de DNA so idnticas s molculas originais, sendo cada uma portadora de uma cadeia antiga e de uma cadeia recm-formada.

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A molcula progenitora mantinha-se ntegra (seria conservada), apenas servindo de molde nova molcula. Esta molcula seria sintetizada a partir dos nucletidos presentes nas clulas.

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Cada uma das cadeias da molcula-filha seria constituda por pores da molcula progenitora e por nucletidos sintetizados de novo.

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Em 1958 testaram a hiptese da replicao semiconservativa. O sucesso destas experincias foi devido utilizao de N 15, um istopo no radioativo que torna as molculas que contm mais densas do que as molculas quimicamente idnticas com o istopo N14.

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Cultivaram bactrias E.coli num meio de cultura que continha o istopo pesado de N15. As bactrias produziram bases azotadas contendo N15, que ficaram integradas no seu DNA.

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Depois de vrias geraes neste meio, as bactrias foram transferidas para um meio com azoto normal (N14). Deste meio foram retiradas algumas bactrias no tempo zero (Gerao 0), ao fim de 20 minutos (Gerao 1), ao fim de 40 minutos (Gerao 2) e ao fim de 60 minutos (Gerao 3).

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Em cada uma das situaes foi extrado e analisado o DNA, com os resultados seguintes:

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as bactrias da gerao zero, possuam um DNA mais denso, que migrava para prximo do fundo do tubo da centrfuga. Na gerao 1, cada molcula de DNA tem uma cadeia com N14 e outra com N15, apresenta uma densidade intermdia entre o DNA s com N15 e o DNA s com N14.

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Na gerao 2 obtm-se 50% de molculas de DNA com N15N14 e 50% de molculas de DNA N14N14. Na gerao 3 aparecem 75% de molculas de molculas de DNA com N14 e 25% de molculas com DNA de densidade intermdia.

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divises seguintes observa-se uma proporo crescente de molculas com DNA pouco denso relativamente s molculas com DNA de densidade intermdia. Estes resultados apoiam o modelo da replicao semiconservativa, que se processa segundo a regra da complementaridade de bases.

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Tem a capacidade de se replicar. Assegura a transmisso do patrimnio gentico prprio de cada espcie. Os mecanismos ligados duplicao da molcula so no essencial idnticos em todos os seres vivos.

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Verificam-se algumas diferenas entre procariontes e eucariontes, devido quantidade de DNA que constitui o genoma de cada espcie, quer da sua organizao e compartimentao dentro da clula.

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