INGENIERIA GENTICA

APLICACIN PRACTICA Y BIOTECNOLOGIA

16.5.2013

HOSPITAL MARINA BAIXA DE LA VILA JOIOSA C.S.I. LAlmssera de Tonda. Villajoyosa David Arjona Prez MIR. MFyC.Tutor: Dr. Antonio Snchez Requeno

GENETICA
RECORDAD ADN-> ARN-> CODIFICACION DE PROTEINAS

Genetica
La gentica (del griego antiguo , genetikos genetivo y este de gnesis, "origen" ) es el campo de la biologa que busca comprender la herencia biolgica que se transmite de generacin en generacin.

BIOTECNOLOGIA
Tecnologia aplicada a la utilizacion de los seres vivos, o partes de stos con fines practicos o industriales. Fue liderada por sector farmacutico y agroalimentario. Punto culminante 1982: Insulina humana recombinante en el mercado.

BIOTECNOLOGIA
1 Etapa: Biotecnologa tradicional, donde no se utilizan tcnicas de manipulacin del ADN. 2 Etapa: Biotecnologa moderna, desarrollada a partir del conocimiento de la estructura del ADN. En esta tcnica se manipula el ADN de los organismos utilizados.

BIOTECNOLOGIA Biotecnologa tradicional

Los individuos que se utilizan han sido seleccionados mediante tcnicas de seleccin artificial, el hombre ha potenciado el desarrollo de estos organismos por el beneficio que le proporcionan. Industria ganadera o agrcola. Seleccin de individuos para la mejora de la especie Industria alimentaria. Pan: se utilizan levaduras para producir la fermentacin de la harina. Yogur: utiliza bacterias para fermentar la leche. Queso: utiliza enzimas animales y microorganismos para cuajar y fermentar la leche. Embutidos: se utilizan microorganismos para fermentar la carne. Bebidas alcohlicas: se utilizan microorganismos para fermentar el zumo de fruta. Industria farmacutica.

Utilizacin de microorganismos para la obtencin de medicamentos y productos qumicos.

BIOTECNOLOGIA Biotecnologa moderna:

Consiste en la utilizacin de tcnicas de manipulacin del ADN para la obtencin de individuos que den lugar a productos de inters o a la mejora de la produccin.

La Biotecnologa moderna requiere tcnicas de ingeniera gentica.

Que es la ingenieria gentica?

Permite manipular artificial y deliberadamente el genoma de un ser vivo, mediante un conjunto de TCNICAS que reciben el nombre de tecnologa del ADN recombinante.
Los cambios pueden consistir en: introducir nuevos genes, eliminar alguno o modificarlos.

El material nuevo formado se llama RECOMBINANTE y tiene gran utilidad en distintos campos , desde la medicina hasta la agricultura.

Tecnicas de Ingenieria gentica

Combinadas de forma adecuada permiten seleccionar fragmentos de ADN, modificarlos e introducirlos en otros organismos.

recombinante e

Obtencin Obtencin de ADN de ADN recombinant

Clonacin Clonacin

de ADN

de ADN

PCR
PCR

Secuenciacin de ADN

Ingeniera gentica y Medicina

Obtencin de productos farmacuticos Medicina forense Diagnostico de enfermedades

Terapia gnica

Insulina

Huella gentica

Clonacin de genes

Ex vivo

Hormona de crecimiento

Marcadores genticos

Identificacin en el enfermo

In vivo

Factor VIII de coagulacin

Identificacin en portadores

In situ

Ingeniera gentica y Medicina

1. OBTENCIN DE PROTEINAS DE MAMFEROS Una serie de hormonas como la insulina, la hormona del crecimiento,factores de coagulacin, etc ... tienen un inters mdico y comercial muy grande. Antes, la obtencin de estas proteinas se realizaba mediante su extraccin directa a partir de tejidos o fluidos corporales. En la actualidad, gracias a la tecnologa del ADN recombinante, se clonan los genes de ciertas proteinas humanas en microorganismos adecuados para su fabricacin comercial. Un ejemplo tpico es la produccin de insulina que se obtiene a partir de la levadura Sacharomyces cerevisae, en la cual se clona el gen de la insulina humana.

Ingeniera gentica y Medicina

2. OBTENCIN DE VACUNAS RECOMBINANTES

El sistema tradicional de obtencin de vacunas a partir de microorganismos patgenos inactivos, puede comportar un riesgo potencial. Muchas vacunas, como la de la hepatitis B, se obtienen actualmente por ingeniera gentica. Como la mayora de los factores antignicos son proteinas lo que se hace es clonar el gen de la proteina correspondiente.

Ingeniera gentica y Medicina

3. DIAGNSTICO DE ENFERMEDADES DE ORIGEN GENTICO: Conociendo la secuencia de nucletidos de un gen responsable de una cierta anomala, se puede diagnosticar si este gen anmalo est presente en un determinado individuo. En el siguiente dibujo se explica brevemente la base del diagnstico. 4. OBTENCIN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES. Este proceso abre las puertas para luchar contra enfermedades como el cncer y diagnosticarlo incluso antes de que aparezcan los primeros sntomas.

Ingeniera gentica y Medicina

1.SECUENCIACIN ADN. PROYECTO GENOMA El Proyecto Genoma Humano (PGH) naci con el fin de localizar, identificar, conocer la HUMANO. secuencia de nucletidos y la funcin de los genes que componen el genoma humano.
En el ao 2003 se complet la secuencia de todo el genoma humano. Aunque no se conoce la funcin de todo l su estudio ha proporcionado cinco conclusiones bsicas: 1. No existe relacin entre la complejidad de un organismo y su nmero de genes. El nmero de genes de la especie humana es similar al de especies con genomas ms pequeos. 2. Compartimos genes con otros organismos, incluidas las bacterias. 3. El 99,99% de la informacin gentica es igual en todos los humanos. 4. Un gen puede dar lugar a varias protenas. 5. La mayor parte del ADN est constituida por secuencias repetitivas, interrumpidas o de las que se desconoce su funcin. Da informacion para compararnos (Transplantes), y para conocer Riesgo (%) de padecer una enfermedad genetica, o influenciada por la herencia (HTA)

Ingeniera gentica y Medicina

PROYECTO GENOMA HUMANO. MEDIDAS LEGISLATIVAS La Biotecnologa y la Ingeniera Gentica han proporcionado grandes beneficios
a la humanidad pero tambin pueden producir consecuencias negativas.
Por ello, se han elaborado una serie de normas ticas y legales, algunas de aplicacin a nivel mundial. En 1997 la UNESCO aprob la Declaracin Universal sobre el Genoma Humano y los Derechos Humanos. En su artculo 1 dice: El Genoma Humano es Patrimonio de la Humanidad. En el mismo ao el Consejo de Europa prohibi la Clonacin con fines reproductivos o experimentales en seres humanos.

En nuestro pas la Ley de Investigacin Biomdica regula la utilizacin de la Biotecnologa y la Ingeniera Gentica, prohibiendo de forma expresa la clonacin reproductiva y la creacin de embriones destinados a la investigacin.

TERAPIA GENICA

Si los genes no producen las protenas correctas o no lo hacen correctamente, una persona (no siempre nios), puede tener un trastorno gentico: enfermedad, predisposicin (albinismo) La terapia gentica es una tcnica experimental que utiliza los genes para tratar o prevenir enfermedades. La forma ms comn de terapia gentica incluye la insercin de un gen normal para sustituir a uno anormal. Otros tipos incluyen:
Intercambio de un gen anormal por uno normal Reparacin de un gen anormal Alteracin del grado en el que se active o se desactive un gen

Aunque hay una gran esperanza para la terapia gentica, an es experimental.

CONSEJO GENTICO
El asesoramiento gentico ofrece informacin y apoyo a las personas que tienen o pueden tener riesgos de trastornos genticos. Un genetista puede evaluarla con pruebas genticas. Existen muchas razones para buscar asesoramiento gentico. Puede pensar en hacerlo si: Tiene o le preocupa tener una enfermedad hereditaria Est embarazada o planea estarlo despus de los 35 aos Ya tiene un hijo con un trastorno o defecto congnito Tuvo dos o ms prdidas de embarazos o un beb que falleci Se realiz un ultrasonido o pruebas que sugieren la posibilidad de un problema

CONSEJO GENTICO: PRUEBAS

Exmenes en la sangre y otros tejidos para detectar trastornos genticos. Existen aproximadamente 900 pruebas disponibles. Los mdicos hacen pruebas por varios motivos. Entre ellos: 1. Encontrar posibles trastornos genticos en el feto 2. Saber si las personas tienen un gen de una enfermedad y pueden transferrsela a sus hijos 3. Estudiar embriones para detectar enfermedades 4. Evaluar la presencia de enfermedades genticas en adultos antes de que produzcan sntomas 5. Confirmar un diagnstico en una persona que tiene sntomas de una enfermedad

CA. COLORECTAL
El Grupo de trabajo EGAPP descubri evidencias cientficas slidas para recomendar que a todas las personas que reciban un diagnstico nuevo de cncer colorrectal (sin importar la edad o antecedentes familiares) se les realicen una prueba gentica para detectar el sndrome de Lynch.

CA. COLORECTAL
Sndrome de Lynch Aproximadamente el 3% de los casos de cncer colorrectal se origina en una afeccin hereditaria conocida como el sndrome de Lynch (en ocasiones llamado cncer colorrectal hereditario no asociado a poliposis o HNPCC). Las personas con esta afeccin tienen una mayor probabilidad de cncer colorrectal, especialmente a una edad temprana (antes de los 50 aos). Los hijos y hermanos de las personas con sndrome de Lynch tienen el 50% de probabilidades de heredar esta afeccin. Los padres y otros familiares consanguneos como abuelos, tos y sobrinos tambin tienen mayor riesgo de padecer el sndrome de Lynch.

TRATAMIENTO DEL CANCER

Terapias dirigidas contra el cncer Puntos clave Las terapias dirigidas contra el cncer son frmacos u otras sustancias que bloquean el crecimiento y la diseminacin del cncer al interferir con molculas especficas implicadas en el crecimiento y avance de tumores. Debido a que los cientficos denominan estas molculas especficas blancos moleculares, las terapias que interfieren con ellas se llaman algunas veces frmacos molecularmente dirigidos, terapias molecularmente dirigidas, o incluso se usan otros nombres semejantes.

TRATAMIENTO DIABETES
DEFICIT ABSOLUTO O RELATIVO DE INSULINA

LA INSULINA, PARADIGMA

LA INSULINA, PARADIGMA

Las enzimas de restriccion cortan las moleculas de ADN en zonas especificas. As se puede aislar el gen que codifica la insulina. Este gen se inserta en un plasmido (trozo de ADN circular presente en algunas bacterias), que ha sido tambien cortado por una enzima de restriccin. As se forma un plsmido RECOMBINADO, que lleva el gen humano para la sntesis de la insulina.

LA INSULINA, PARADIGMA

LA INSULINA, PARADIGMA

INGENIERIA GENETICA Y AGRICULTURA

Sirve para conseguir plantas resistentes a determinados herbicidas, para mejorar el contenido nutritivo de algunos alimentos y para fabricar medicamentos. Resistencia a los herbicidas. El 10% de una cosecha se pierde debido a las malas hierbas. Este porcentaje se puede reducir utilizando plantas transgnicas resistentes a los herbicidas con los que se eliminan a las malas hierbas. Mejorar los alimentos. Por ejemplo, el arroz transgnico que lleva beta-caroteno como precursor de la vitamina A. Fabricacin de medicamentos. La industria farmacutica comienza a utilizar plantas transgnicas para producir sustancias como protenas humanas para uso mdico, protenas virales como vacunas o anticuerpos.

INGENIERIA GENETICA Y AGRICULTURA

Obtencin de plantas transgnicas

Resistencia a herbicidas Se introduce un gen de E. coli que permite usar mayores concentraciones de herbicidas sin daar a la planta de inters, y eliminando malas hierbas.

Mejora del producto Se mejora el valor nutricional del producto, por ejemplo aadiendo beta-caroteno al arroz

Plantas farmacuticas Las plantas producen sustancias medicinales, vacunas o anticuerpos (planticuerpos).

INGENIERIA GENETICA Y AGRICULTURA

INGENIERIA GENETICAGANADERIA Y GANADERIA APLICACIONES:

Se utiliza fundamentalmente para la mejora del rendimiento de explotaciones ganaderas, pero tambin se obtienen animales transgnicos para utilizar sus rganos en los xenotransplantes u obtener sustancias de inters farmacutico.
Determinados animales se clonan teraputica (creacin de embriones por clonacin para ser utilizados como materia prima en distintas terapias) y reproductivamente.

ALIMENTOS TRANSGENICOS
Son aquellos alimentos a los que se les han insertado genes exgenos (de otras plantas o animales) en sus cdigos genticos. Se puede hacer con plantas, animales o microorganismos. Histricamente, los granjeros producan cultivos y criaban animales para obtener especies con caractersticas deseables durante miles de aos. Por ejemplo, ellos criaban rosas desde las miniaturas con olor dulce hasta las rosas rojas sin olor y perecederas de hoy en da. La cra selectiva con el tiempo cre estas amplias variaciones, pero el proceso dependa de la naturaleza para producir el gen deseado. Los humanos entonces optaron por aparear los animales o plantas individuales que portaban ese gen particular, con el fin de hacer que las caractersticas deseadas fueran ms comunes o ms pronunciadas. La ingeniera gentica le permite a los cientficos acelerar este proceso pasando los genes deseados de una planta a otra o incluso de un animal a una planta y viceversa.

ALIMENTOS TRANSGENICOS
Los posibles beneficios de los alimentos transgnicos son: 1. Alimentos ms nutritivos 2. Alimentos ms apetitosos 3. Plantas resistentes a la sequa y a las enfermedades, que requieren menos recursos ambientales (agua, fertilizante, etc.) 4. Disminucin en el uso de pesticidas 5. Aumento en el suministro de alimentos a un costo reducido y con una mayor durabilidad antes de la venta 6. Crecimiento ms rpido en plantas y animales 7. Alimentos con caractersticas ms apetecibles, como las papas (patatas) que absorben menos grasa al frerlas 8. Alimentos medicinales que se podran utilizar como vacunas u otros medicamentos

ALIMENTOS TRANSGENICOS
Los riesgos potenciales son, entre otros: 1. Plantas y animales modificados que pueden tener cambios genticos inesperados y dainos 2. Organismos modificados que se pueden cruzar con organismos naturales y los pueden superar, llevando a la extincin del organismo original u otros efectos ambientales impredecibles 3. Plantas que pueden ser menos resistentes a algunas plagas y ms susceptibles a otras

ALIMENTOS TRANSGENICOS
Los alimentos transgnicos generalmente se consideran seguros; sin embargo, no ha habido pruebas adecuadas para garantizar la total seguridad. No existen informes de enfermedades o lesiones debido a estos alimentos. Cada alimento transgnico nuevo tendr que evaluarse de manera individual.

ALIMENTOS TRANSGENICOS
La FDA de los Estados Unidos regula produccin y etiquetado de alimentos transgnicos. Algunas personas han planteado inquietudes con respecto a que los genes de un alimento que se insertan en otro pueden causar una reaccin alrgica. Por ejemplo, si los genes del cacahuete estn en los tomates, podra suceder que alguien con una alergia a los cacahuetes, pueda reaccionar negativamente a los tomates? En enero de 2001, el FDAsCenter for Food Safety and Applied Nutrition propuso que quienes desarrollen alimentos procesados genticamente enven informacin cientfica y de seguridad a la FDA al menos 120 das antes de que el producto salga al mercado.

Ingeniera gentica y medio ambiente

Microorganismos modificados genticamente estn siendo utilizados para limpiar el medio ambiente de ciertos contaminantes. Su accin se realiza de dos formas: Biorremediacin: Existen bacterias que, de forma natural, son capaces de degradar la materia orgnica. Mediante ingeniera gentica se pueden modificar para que sean capaces de hacerlo con mejor rendimiento y en condiciones ambientales diversas. Bioadsorcin: Bacterias genticamente modificadas son capaces de adsorber (fijar en la superficie celular) ciertos metales pesados que contaminan el suelo.

Ingeniera gentica y medio ambiente

Biorremediacin
Uso de bacterias modificadas para degradar materia orgnica (petrleo)

Bioadsorcin
Fijacin de metales pesados a la superficie de la clula para limpieza de suelos

Biolixiviacin
Obtencin de metales a partir de minerales de baja ley

Ingeniera gentica y medio ambiente

Tratamiento de residuos En la obtencin de compost los microorganismos tienen un papel de gran importancia al metabolizar la materia orgnica, liberando as nutrientes que ser utilizados por las plantas.

Fig.1 Vertedero urbano.

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Ingeniera gentica y medio ambiente

Depuracin de aguas Los microorganismos contribuyen tambin a la regeneracin de las aguas de uso urbano en las depuradoras.

Agencia Catalana del

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Ingeniera gentica y medio ambiente

Tratamiento de metales pesados
El 25 de Abril de 1998 se produce la rotura de la presa de contencin de la balsa de decantacin de la mina de pirita (FeS2) en Aznalcllar (Sevilla). Como resultado aparece un importante vertido de agua cida y de lodos muy txicos, conteniendo altas concentraciones de metales pesados, de gravsimas consecuencias para la regin.

Algunos tipos de microorganismo pueden eliminar los metales pesados de las aguas y suelos contaminados concentrndolos en su interior.

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Ingeniera gentica y medio ambiente

Tratamiento de aguas contaminadas por mareas negras Ciertos microorganismos son capaces de metabolizar los hidrocarburos del petrleo y con ello contribuyen a mitigar los efectos de las mareas negras.

El hundimiento del petrolero Prestige (2002) produjo una gran marea negra en las costas del del norte de Espaa.

Marea negra en Alaska producida por el Exxon Valdez en 1989).

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INGENIERIA GENETICA: MITOS

La ingeniera gentica no es nueva: es slo la aceleracin de la reproduccin selectiva.
La ingeniera gentica y la reproduccin selectiva son mundos antagnicos. La reproduccin selectiva se basa en mtodos naturales: cruza padres selectivos de la misma especie o de especies cercanas muy relacionadas. En contraste, la ingeniera gentica extrae genes seleccionados de un organismo o los copia sintetizadamente para insertarlos artificialmente dentro de otro organismo totalmente lejano en la evolucin natural. La ingeniera gentica emplea genes de virus y de bacterias para usarlos como marcadores del proceso.

INGENIERIA GENETICA: MITOS

La ingeniera gentica es exacta, est plenamente controlada.
Est demostrado que los genes no operan aisladamente: por el contrario, funcionan complejamente y son influenciados por la accin de otros genes. Si bien un gen puede ser separado exactamente del DNA de una clula, su insercin al DNA de otra es enteramente fortuito. Esta insercin rompe el orden de los genes en el DNA y puede dar lugar a cambios inesperados. Richard Lewotin, profesor de gentica de la Universidad de Harvard, ha dicho de la ingeniera gentica: "tenemos un conocimiento tan miserablemente pobre de cmo el DNA de un organismo evoluciona, que me sorprendera que no tuviramos un rudo golpe uno detrs de otro".

INGENIERIA GENETICA: MITOS

Los alimentos transgnicos varan de los naturales slo en la caracterstica que fue modificada. La insercin al azar de genes extraos puede causar cambios inesperados en el funcionamiento de otros genes. Las molculas de los genes podran ser manufacturadas en cantidades incorrectas, en tiempos equivocados, o pueden producirse molculas nuevas. Los alimentos transgnicos podran, por lo tanto, contener toxinas inesperadas o molculas alergnicas que podran afectar nuestra salud o la de nuestra descendencia. Es el caso del triptofano que mat en USA 27 personas y afect la salud de otros 1.500 en 1998.

INGENIERIA GENETICA: MITOS

Los alimentos transgnicos han sido manipulados cuidadosamente y son perfectamente seguros.
Hay serias dudas sobre la adecuada prueba y sobre la validez de las conclusiones. Se necesitan pruebas a largo plazo antes de asegurar que un transgnico es confiable.

INGENIERIA GENETICA: MITOS

Los alimentos transgnicos son de calidad superior.
Hasta la fecha no se ha demostrado que los alimentos transgnicos sean mejores que los naturales. La mayora de las cosechas transgnicas han sido diseadas para resistir herbicidas especficos (es el caso del glifosato) o para producir sus propios insecticidas (es el caso del gene txico a perforadores del Bacillus thuringiensis) o para prolongar su vida comercial (es el caso del fracasado tomate Flavor Savr, diseado para larga duracin).

INGENIERIA GENETICA: MITOS

Uno siempre puede abstenerse de comer transgncos.
En este momento muchsimos alimentos contienen ingredientes transgnicos no etiquetados, particularmente productos que contengan harina y aceite de soja, lecitina, aceite de canola y productos de maz. Precisamente uno de los aspectos ms debatidos y uno de los mayores logros en el Protocolo de Bioseguridad fue el etiquetado de productos transgnicos.

INGENIERIA GENETICA: MITOS

Los agricultores se beneficiarn de las cosechas transgnicas.

Las semillas transgnicas son ms caras. Los granjeros de USA y del Reino Unido han informado que los rendimientos generalmente no son mejores. Los productos naturales reciben premios de los consumidores de pases desarrollados, los cuales se niegan a consumir trangnicos. Las oportunidades de mercadear transgnicos estn disminuyendo. Las compaas de seguros en USA y el Reino Unido son renuentes ante los transgnicos, debido a sus potenciales peligrosos. Los granjeros que cosechan transgnicos deben firmar contratos onerosos con las compaas proveedores de semillas, que les prohiben guardar semillas para futuras siembras. Este derecho ha sido tradicional desde hace miles de aos para los agricultores.

INGENIERIA GENETICA: MITOS

No hay evidencia de que los transgnicos amenacen el ambiente.

Los insectos, aves y el viento llevan polen transgnico a campos vecinos y aun ms lejos. Un estudio de la Universidad de Cornell, 1999, denunci que larvas de mariposas Monarca haban muerto por ingestin de polen de maz transgnico Bt (es decir, que incorpora la toxina del Bacillus thuringiensis). El Scotish Crop Research Institute denunci en 1998 que pjaros que comieron fidos de cultivos de papas transgnicas sufrieron problemas reproductivos. La habilidad para cruzarse con ancestros silvestres se multiplic por veinte en mostaza transgnica, segn estudios de la Universidad de Chicago, 1999.

INGENIERIA GENETICA: MITOS

No hay que dar tanta importancia a los organismos modificados por ingeniera gentica.
Muchos cientficos no lo piensan as. Por ejemplo el Dr. Joseph Rothlat, cientfico britnico que gan el Nobel en 1995, dice: "mi preocupacin es que otros avances cientficos que puedan resultar en formas de destruccin masiva (es el caso de los genes esterilizantes TRAITOR y TERMINATOR) pueden estar mucho ms rpidamente disponibles que los misiles nucleares. La ingeniera gentica es una posible rea, y es espantoso el crecimiento con que se est llevando a cabo (para ejemplo la propuesta de guerra bacteriolgica a cultivos narcticos, donde la oferta del Fusarium oxisporum es apenas uno de los episodios de una larga cadena, que ya ha implicado la liberacin de insectos plagas y la aplicacin de agrotxicos".

PREGUNTAS? DUDAS?

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GRACIAS A TODOS, ESPERAMOS QUE OS HAYA GUSTADO