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Objetivos
Los alumnos deben conocer la importancia de la utilizacin del mtodo de Biuret as como su eficiencia para la determinacin de protenas sricas totales, y su fundamento a nivel molecular.
Segn su contenido en aminocidos esenciales. Segn su estructura qumica. FUNCIONES - Plstica, estructural o de construccin. - Reguladora. - Defensiva. - Intervienen en procesos de coagulacin - Transporte de sustancias. - Energtica
PROPIEDADES Y FUNCIONES
Transporte. Equilibrio osmtico. Defensa de las infecciones. Hemostasia. Contribuyen a las necesidades de nitrgeno. Regulan la funcin celular
Albuminas
a) Producidas por el hgado.
b) Es la ms abundante. c) Esta firmemente regulada. d) Ejerce alrededor del 75% de la presin coloidoosmtica. e) Ejerce funcin de transporte de sustancias.
Globulinas
a) Se separan electroforticamente en a , b y c. b) Las a y b son sintetizadas en su mayora en el hgado. c) En el grupo a y b estn la mayora de las protenas de fase aguda. d) Las c globulinas son, en su mayora, inmunoglobulinas secretadas por las clulas plasmticas.
Artculos
Papel de nuevas protenas mitocondriales en el balance energtico, por A. Zorzano., et. al., Universidad de Barcelona.
El metabolismo celular genera calor, a parte de los periodos de la reproduccin o de la lactancia, una considerable proporcin de la energa que un individuo adulto en reposo obtiene de la ingesta alimentaria se pierde en forma de calor liberado durante el metabolismo celular. La activa produccin de calor en el tejido adiposo se explica mediante la elevada expresin de la protena desacopladora UCP-1. Se ha propuesto que esta protena acta como un transportador de protones desde el espacio intermembrana mitocondrial hacia la matriz mitocondrial, provocando la perdida del gradiente mitocondrial de protones y en consecuencia aumentando la respiracin desacoplada y la generacin de calor.
Metodologa
Extraer 5 ml de sangre utilizando heparina como anticoagulante Cada equipo debe preparar 10ml de estndar de protena disolviendo 0.2g de albumina en 5 ml de hidrxido de potasio 0.3 N y aforando a 10 ml con agua destilada Cada equipo preparara 10ml de hidrxido de potasio 0.3 N En un tubo de ensaye agregar 0.1 ml de suero, 0.9 ml de agua destilada, 4.0 ml de reactivo de Biuret. Por duplicado Utilizamos un blanco, al cual le agregamos 1 ml de agua destilada, 4.0 ml de reactivo de Biuret Incubar a 37C durante 30 min. Leer a 540 nm en el espectrofotmetro Trazar una curva estndar, tomando en cuenta la concentracin en protena es: 0.002, 0.004, 0.006, 0.008, 0.010, 0.014, para los tubos 1, 2, 3, 4, 5,6.
Resultados
Solucin estndar de protena
1 2 0.1 0.2 Agua Destilada
Reactivo de Biuret
4.0 4.0
Promedio
0.9 0.8
0.037 0.073
0.038 0.073
0.0375 0.073
3
4 5 6
0.3
0.4 0.5 0.7
0.7
0.6 0.5 0.3
4.0
4.0 4.0 4.0
0.109
0.119 0.159 0.247
0.109
0.119 0.159 0.247
0.109
0.119 0.159 0.247
Muestras problema
Blanco 0 Muestra Problema 1 0.350 Muestra Problema 2 0.578
r = 0.9996
ABSORBANCIA
CONCENTRACION
Anlisis de Resultados
DATOS OBTENIDOS DE LA LINEALIDAD DEL METODO LLEVANDO A CABO LA SIGUIENTE ECUACION: CUANDO Y VALE 0.347 X = 0.020 Y ASI PARA CADA UNO DE LOS DATOS OBTENIDOS PARA LA LINEALIDAD DEL METODO. OBTENIENDO UNA= r = 0.9996 AL INTERPOLAR LA MUESTRA PRBLEMA EN NUESTRO GRAFICO OBTENEMOS UNA CONCENTRACION = 0.208 Llevando a cabo los clculos para obtener la concentracin final de albumina srica obtenemos. (Concentracin en g / ml de suero) x 100 = (0.208 g / 0.1ml) x 100 = 0.0208 g/ml por lo tanto obtenemos 0.2 g/dl
Conclusiones
Como podemos observar en los resultados obtenidos en la determinacin de protenas en especifico albumina, se llevo a cabo la realizacin de la curva estndar pero est en las concentraciones inciales se obtena una curva con un r= 0.9699, por lo cual se procedi a realizar la linealidad del mtodo obteniendo as una curva ms prolongada en la que se pudo interpolar el resultado obtenido en el espectrofotmetro, y de esta forma determinar la concentracin de protenas (albumina) en suero, al comparar la concentracin de albumina podemos observar que esta sale de los valores normales ya que estos oscilan entre los 3.5 y 6.5 g/dl, y nosotros obtuvimos 2.0 g/dl, pero tomando en cuenta los valores normales de las globulinas alfa observamos que estn dentro de los valores normales de 0.2 a 0.4 g/dl.
Clnicamente podemos mencionar que la disminucin de las protenas totales, se puede deber a una mala alimentacin, un sndrome nefrtico, una enteropata, tambin se puede mencionar que algunas veces la mala prctica nos puede dar una baja de protenas debido a una hemolisis en los tubos o en la toma de muestra, por lo cual recomendaramos al paciente, realizarse una segunda prueba para corroborar si existe una disminucin de protenas o es un resultado falso positivo y un mal manejo por parte del qumico, as mismo se recomienda que esta prueba se haga en ayunas para una mejor determinacin y no exista interferencia por parte de algunos alimentos que se encuentren ingresando a un proceso metablico.
Bibliografa
http://www.uv.es/jcastell/Proteinas_plasmaticas.pdf http://www.portalesmedicos.com/publicaciones/articles/108 9/1/Proteinas-sericas-en-enfermedadeshematologicas.html
BIBLIOGRAFIA
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