AGLUTINACIN EN LAMINA,

EN TUBO Y
2-MERCAPTOETANOL
CONTENIDO

DEFINICIN
PRINCIPIO
PROCEDIMIENTO
INTERPRETACIN
APLICACIN

AGLUTINACIN
El antgeno es partculado,
Es insoluble o puede encontrarse unido
a otra partcula.
La mejor aglutinina es la IgM,
La lectura se hace por la formacin de
grumos,
Se pueden determinar en dos minutos,
Es especfica y muy sensible
Esta influenciada :
- Ph neutro,
- Temperatura a 37 grados,
- Nmero de determinantes antignicos,
- Concentracin de sales (NaCl),
- El potencial Z (es un rechazo de las
molculas debido a su misma carga elctrica,
se evita centrifugando) y la
- Ubicacin del determinante antignico
Esta fuerza de
repulsin se
denomina potencial
Zeta y puede
expresarse mediante
la frmula siguiente
= carga elctrica de
los hemates
D = constante
dielctrica del medio
y = fuerza inica del
medio
REACCIN DE AGLUTINACIN

Consiste en que partculas tales como
clulas o material sinttico conocido
como antgeno, se agrega con
anticuerpos
Bordet propuso que la aglutinacin
presentaba dos fases:
1.- Reconocimiento y unin del Ag-Ac
(reaccin primaria)

2.- Interaccin Ag-Ac tras la formacin de
inmunocomplejos(reaccin secundaria)
Aglutinacin
Y Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Antgenos insolubles
Suero ?
Factores que afectan a la medida de la
reaccin secundaria:
1.-Afinidad
2.-Avidez
3.- proporcin Ag/Ac
4.-Forma fsica del antigeno
5.-Tipo de inmunoglobulina implicada


Aglutinacin Cualitativa

AGLUTINACIN EN LMINA
-Aglutinacin cuantitativa: para la
titulacin del suero, se diluye el suero y
se enfrenta a cantidades fijas de
antgeno
-Se mezcla y lee los resultados entre
los 3 y 5 minutos
-El ttulo: corresponde a la mxima
dilucin del suero en la que aglutinacin
es positiva
Aglutinacin II
Utilidad:
- Para diagnsticos rpido de infecciones
bacterianas
AGLUTINACIN EN TUBOS
Es una prueba semicuantitativa que
consiste en determinar cual es la
mxima dilucin del suero capaz de
aglutinar un antgeno especifico.
Las diluciones son seriadas en tubos
tomando para el ensayos controles
Esta prueba se utiliza para la
confirmacin de la prueba rpida de
lmina



Procedimiento:

1/5 1/10 1/20 1/40.......1/320 -
1 2 3 4 ... 6 7 8
Salina(ml) 0.8 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Suero(ml) 0.2 ------------0.5---------- -
-------------------------------------------------------
Se aade 0.5ml delAntigeno comercial (1/20)
en todos los tubos.
Se realiza la incubacin de acuerdo al tipo de Ag

Ventajas:
- Da mayor grado de confiabilidad
- Mayor precisin en las lecturas de la
reaccin

Desventaja:
- El tiempo de incubacin.
- Gasto de materiales.


Utilidad : es til para seguir el curso o
evolucin de una infeccin en infecciones
bacterianas

PRUEBA DEL 2-
MERCAPTOETANOL

El mercaptoetanol es un reactivo que
inhibe las propiedades de aglutinacin o
de activacin del complemento de los
referido al anticuerpo de clase IgM
Se basa en la propiedad de los
compuetos quimicos sulfidrilos de
inactivar la Ig M
Es una prueba selectiva que detecta la
presencia de Ig G

El 2- mercaptoetanol es sensible a la luz y
al calor deteriorandose rpidamente por
exposicin al aire
Procedimiento:
1/32 1/64 1/34 1/64 -
1 2 3 4 5
Suero(ml) 0.1 0.1 0.1 0.1 -
Salina(ml) 0.1 0.1 - - 0.2
Mercptoetnol - - 0.1 0.1 -
--------------------------------------------------------
GR al 2% 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
Control Pueba Control
Hemag Mercpet eritroc
Lectura:
- Prueba del 2- mercaptoetanol positiva: la
dilucin en la que no hay hemaglutinacin

- En la hemaglutinacin positiva:
formacin de malla (hemaglutinacin)

-En hemaglutinacin negativa: formacin
de botn compacto(sedimentacin)


Usos:
Es una prueba utilizada en el diagnostico
de Brucella, en la que nos indica si es una
infeccin reciente o activa
Referencia Bibliogrfica
Rose Friedman 1989. El laboratorio en
Inmunologa Clnica 2da Edicin Ed.
Panamericana

Stites Daniel 1994. Inmunologa Bsica
y Clnica