Ciclo de Krebs

CICLO DE LOS CIDOS TRICARBOXLICOS

CICLO DEL CIDO CTRICO
Convergencia de las vas Catablicas
en el ciclo de Krebs
El ciclo de Krebs (de los cidos tricarboxlicos o del cido ctrico) es
una va metablica presente en todas las clulas aerobias, es decir, las
que utilizan oxgeno como aceptor final de electrones en la respiracin
celular. En los organismos aerobios las rutas metablicas responsables
de la degradacin de los glcidos, cidos grasos y aminocidos
convergen en el ciclo de Krebs, que a su vez aporta poder reductor a la
cadena respiratoria y libera CO2.

Convergencia de las vas Catablicas
en el ciclo de Krebs
Ciclo de Krebs
El ciclo del cido ctrico, considerado el embudo del metabolismo,
consiste ocho reacciones enzimticas, todas ellas mitocondriales
en los eucariontes.

En muchas clulas la accin acoplada del ciclo del cido ctrico y la
cadena de transporte de electrones son responsables de la mayora
de la energa producida
Historia
La historia comienza a principios de la dcada de los
30s con el descubrimiento de que al
agregar succinato, fumarato y malato a msculos
machacados incrementa la velocidad del consumo de
Oxgeno. El oxaloacetato se incorpor a la lista de
cidos dicarboxlicos cuando se descubri que se poda
formar en condiciones aerbicas a partir del piruvato.
Historia
En 1935 A. Szent-Gyrgyi propuso que ciertos pares de
cidos dicarboxilicos eran interconvertidos por la accin
de deshidrogenasas y que este proceso estaba
relacionado con la respiracin.

Historia
El cido ctrico fue descubierto en
1784 por Carl Wilhelm Scheele en el jugo de limn, y no
fue hasta 1937 que los cientficos entendieron su
participacin metablica.
Historia
Carl Martius y FranzKnoop mostraron que el cido
ctrico es convertido en alfa-cetoglutarato por medio
del isocitrato. Se supo tambin que el alfa-
cetoglutarato puede ser oxidado a succinato.

Historia
En 1937 se supo tambin que el alfa-
cetoglutarato puede ser oxidado a succinato.
La formacin del citrato era la pieza faltante
para poder armar completamente el
rompecabezas metablico

Historia
El descubrimiento que resolvi este rompecabezas y
unific el metabolismo fue hecho en 1937 por
Sir Hans Krebs y W.A. Johnson: ellos mostraron que el
citrato es derivado del piruvato y del oxaloacetato
completando lo que se conoce como el ciclo del cido
ctrico
Historia
Se necesit de una dcada para demostrar que el Ac-
CoA, derivado del piruvato, es la fuente intermediaria de
los fragmentos de dos Carbonos que se combinan con el
oxaloacetato para formar citrato.

Historia
En 1948 E.P. Kennedy y A. Lenhinger descubrieron que
en mitocondrias aisladas de homogenados de hgado de
rata, se llevaban a cabo la oxidacin del piruvato y de
todos los intermediarios del ciclo de Krebs a expensas de
O
2
, por tanto contienen todas las enzimas necesarias
para catalizar las reacciones del ciclo y del transporte
energtico
Reaccin 1. : condensacin del
oxalacetato con la acetil CoA
La enzima citrato sintasa condensa a la acetil-CoA (2C)con el
oxalacetato (4C)para dar una molcula de citrato(6C).

Como consecuencia de esta condensacin se libera la coenzima
A(HSCoA). La reaccin es fuertemente exergnica: es irreversible.

Reaccin 2. Isomerizacin del citrato a
isocitrato
La isomerizacin del citrato en isocitrato ocurre por dos
reacciones, que se resumen en una.


Reaccin 3.Oxidacin y
decarboxilacin del isocitrato
El isocitrato es sustrato de la isocitrato deshidrogenasa,enzima que
tiene como cofactor un NAD, que forma partede la cadena
respiratoria. Esta reaccin se resume con dos reacciones a partir de las
cuales el isocitrato forma -cetoglutarato (5C). Para lograr ese
producto ocurre una decarboxilacin, es decir la liberacin de una
molcula de CO2, y la reduccin de un NAD que permite la formacin
de 3 ATP.

Reaccin 4: el -cetoglutarato se
transforma en succinil-CoA
Este paso implica la segunda decarboxilacin oxidativa,
catalizada por la -cetoglutarato deshidrogenasa, que lleva
a la formacin de succinil-CoA (4C). El NAD es la
coenzima de la deshidrogenasa, de manera que se
formarn 3 ATP como consecuencia de la actividad de
cadena respiratoria.
Reaccin 5.La succinil-CoA rinde
succinato y GTP
La succinil-CoA, es un tioster de alta energa con un
G de hidrlisis de -33.5 KJ.mol-1 aproximadamente.
La energa liberada por la ruptura de ese enlace se utiliza
para generar un enlace fosfoanhidro entre un fosfato y
un GDP para dar 1GTP porfosforilacin a nivel de sustrato.
En la reaccin se libera HSCoA.




El GTP se puede convertir en ATP segn la siguiente reaccin:
GTP + ADP GDP + ATP G = 0 KJ.mol- 1

Reaccin 6.El succinato se transforma
en fumarato
El succinato es oxidado a fumarato por la succinado
deshidrogenasa, enzima que tiene como cofactor al FAD: se
producen 2ATP en la cadena respiratoria. La enzima usa FAD
porque la energa asociada a la reaccin no es suficiente para
reducir al NAD.





El complejo enzimtico de la succinato deshidrogenasa es el
nico del ciclo que est asociado a la membrana mitocondrial de
eucariotas, y en la membrana plasmtica de procariotas.

Reaccin 7.El fumarato se hidrata y
genera malato
La fumarasa cataliza la adicin de agua, es decir la
hidratacin del fumarato. El producto de la reaccin es el
malato.



Reaccin 8.El malato se oxida a
oxalacetato
Dada la naturaleza cclica de la va, las reacciones en su
conjunto conducen a la regeneracin del oxalacetato. La
malato deshidrogenasa cataliza la oxidacin del malato a
oxalacetato, con la reduccin de un NAD: se forman 3
ATP en la cadena respiratoria.

Papel de las mitocondrias
En el espacio Inter membranal de las Mitocondrias, el producto final de la
Gluclisis(cido Pirvico) sigue degradndose hasta ser convertido en
Acetil-CoA, este compuesto de 2 tomos de C pasa del espacio inter
membranal hacia la Matriz mitocondrial para combinarse con el cido
Oxalactico de 4 tomos de C formando cido Ctrico de 6 tomos de C
dando inicio al Ciclo de Krebs. En la Matriz mitocondrial y en condiciones
aerbicas, el cido Ctrico es Descarboxilado y degradado en coenzimas
reducidas como NADH, FADH2, que participarn en la Cadena Oxidativa o
respiratoria donando los protones y electrones por medio de una serie de
aceptores de E- intermedios hasta ser conducidos hacia el O2(ltimo
aceptor de electrones). En la Matriz mitocondrial se encuentran las enzimas
y complejos multienzimticos cuya funcin es degradar al cido Ctrico en
Coenzimas reducidas importantes para la donacin de Protones H y
electrones en la Cadena Oxidativa.
Solamente la Gluclisis se realiza en el Citoplasma en condiciones
anaerobias porque es la 1 va degradativa de la Respiracin celular aerobia,
las otras 2 vas degradativas (Ciclo de Krebs y Cadena oxidativa) se realizan
dentro de las Mitocondrias.

Papel de las mitocondrias
En la membrana interna estn los sistemas dedicados
al transporte de los electrones que se desprenden en las
oxidaciones anteriores y un conjunto de protenas
encargadas de acoplar la energa liberada del transporte
electrnico con la sntesis de ATP, estas protenas le dan
un aspecto granulado a la cara interna de la membrana
mitocondrial.


Tambin se encuentran dispersas por la matriz una
molcula de ADN circular y unos
pequeos ribosomas implicados en la sntesis de un
pequeo nmero de protenas mitocondriales.

El metabolismo aerobio del piruvato

En los organismos anaerobios o en las clulas
aerobias que estn realizando unas tasas de
gluclisis muy elevadas, el NADH generado en la
gluclisis no puede reoxidarse en las
mitocondrias.
Cuando es esta la situacin el NADH se utiliza
para impulsar la reduccin de un sustrato
orgnico que es el propio piruvato.
El piruvato tiene numerosos destinos
alternativos en los microorganismos anaerobios:
Fermentacin del cido lctico y Fermentacin
alcohlica levadura
1.- Microorganismos anaerobios
Fermentacin Lctica
piruvato + NADH + H
+
-------> cido lctico + NAD
+

Glucosa + 2ADP + 2Pi 2 Lactato + 2ATP + 2H
2
O



Se produce en bacterias (bacterias lcticas), tambin en algunos
protozoos y en el msculo esqueltico humano.

Es responsable de la produccin de productos lcteos acidificados --->
yoghurt, quesos, crema cida, etc.
Fermentacin Alcohlica

piruvato --------> acetaldehido + CO
2

acetaldehido + NADH + H
+
-------> etanol + NAD
+

Glucosa + 2ADP + 2Pi + 2H
+
2 Etanol + 2CO
2
+ 2ATP +
2H
2
O




Se lo encuentra en levaduras , hongos y algunas bacterias.

La fermentacin alcohlica es la base de las siguientes aplicaciones en
la alimentacin humana: pan, cerveza, vino y otras.
El metabolismo oxidativo se puede subdividir en
tres etapas:
Generacin de un fragmento activado de dos
carbonos Acetil-CoA
Oxidacin de estos dos tomos de carbono en el
ciclo del cido ctrico
Transporte electrnico y la fosforilacin
oxidativa, en donde los transportadores
electrnicos reducidos que se generan en el ciclo,
vuelven a oxidarse junto con la sntesis de ATP
2.- Microorganismos aerobios
El piruvato difunde hasta la matriz de la
mitocondria, cruzando ambas membranas.
Dentro de la mitocondria, este es descarboxilado
por oxidacin a Acetil-CoA.
ETAPA 1. Oxidacin del piruvato
Coenzima A
Enzima piruvato deshidrogenasa
E
1
= piruvato deshidrogenasa
E
2
= dihidrolipoil transacetilasa
E
3
= dihidrolipoil deshidrogenasa
Inhibido por ATP
Inhibido por acetilCo A y NADH (productos)
Inhibido por la fosforilacin de E
1
(piruvato deshidrogenasa).

Activada por la desfosforilacin de E
1
.
Activada por AMP y NAD
+

Este ciclo acta en dos fases principalmente:
Fase 1. Introduccin y perdida de dos tomos de
carbono
Fase 2. Regeneracin del oxalacetato

El punto de partida es Acetil-CoA,
obtenindose CO
2
y transportadores de
electrones reducidos (NADH y FADH
2
).

ETAPA 2. Ciclo del cido ctrico
1. Introduccin de dos tomos de
carbono en forma de Acetil-CoA

Fase 1:
2. Isomerizacin del citrato
3. Generacin de CO
2
por una deshidrogenasa
ligada a NAD
+
4. Generacin de un segundo CO
2
por un
complejo multienzimtico.
5. Fosforilacin a nivel de sustrato

Fase 2:
6. Deshidrogenacin dependiente de la Flavina
7. Hidratacin de un doble enlace carbono-
carbono
8. Deshidrogenacin que regenera el oxalacetato
En resumen se tiene que en el ciclo del cido ctrico
por cada vuelta:

Acetil-CoA + 3H
2
O + 3NAD
+
+ FAD + ADP + Pi

2CO
2
+ 3NADH + FADH
2
+ CoA-SH + ATP
Regulacin del ciclo de krebs
Inhibida por ATP, NADH,
succinil-coA.
Inhibida por citrato (producto)
Activada por AMP
Inhibida por ATP
Activada por ADP
Inhibida por NADH
Inhibida por succinil-CoA
(producto)
Si se consideran las tres etapas hasta el momento:
Gluclisis
Glucosa + 2ADP + 2Pi + 2NAD
+
2Piruvato + 2ATP + 2NADH + 2H
2
O + 4H
+
Complejo piruvato deshidrogenasa
2Piruvato + 2NAD
+
+ 2CoA-SH 2Acetil-CoA + 2NADH +2CO
2
Ciclo del cido ctrico (incluyendo la conversin de
GTP en ATP)
2Acetil-CoA + 6H
2
O + 6NAD
+
+ 2FAD + 2ADP + 2Pi 4CO
2
+
6NADH + 2FADH
2
+ 2CoA-SH + 2ATP

Resultado Neto:
Glucosa + 10NAD
+
+ 2FAD + 4H2O + 4ADP + 4Pi 6CO
2
+
10NADH + 4H
+
+ 2FADH
2
+ 4ATP