INTRODUCCIN A LA

CROMATROGRAFA
POR:
Q.F. OMAR PAOLO
NAVARRO MUANTE
CROMATROGRAFA
La separacin del analito de los posibles
interferentes es de vital importancia en los
procedimientos analticos . El modo mas
comn es la cromatografa inventada a
principios del S-XX por el botnico ruso
Mikhail Tswett .
CHROMO= Color
GRAPHEIN = Escribir
En general, los mtodos para el
anlisis qumico son, en los casos
mas favorables , selectivos ,
pocos , si es que los hay , son
verdaderamente especficos .
En realidad la CROMATOGRAFA es un
mtodo de separacin.
Fundamento

La cromatografa es un Conjunto importante y
diverso de mtodos que permite al analista
separar componentes en mezclas complejas que
no se logran por otros mtodos . En cromatografa
la muestra se disuelve en una fase mvil ( liquido ,
gas o FSC) que pasa a travs de la fase
estacionaria inmiscible que se mantiene en una
columna o superficie slida .
CLASIFICACIN DE LA
CROMATOGRAFA
Por la forma como la F:S: y F.M. se
ponen en contacto :
a.-C. en columna ( gravedad o presin )
b.-C. plana (capilaridad o gravedad).
Por el tipo de F.M. y F.E.
a.- C. Lquida
b.-C. gaseosa
c.- C. Fluidos sper crticos


CROMATOGRAFA DE ELUCIN EN
COLUMNA


CROMATOGRAMAS
Si un detector que responde a la presencia
del analito se coloca al final de la columna
, y se representa su seal en funcin del
tiempo ( o del volumen de fase mvil
aadido ) , se obtienen una serie de picos
a lo que se le llama CROMATOGRAMA.
CROMATOGRAFIA DE ELUCION EN
COLUMNA
ENSANCHAMIENTO DE BANDA Y
EFECTO DE LAS VELOCIDADES DE
MIGRACIN

Velocidades de migracin de las
especies
La efectividad de una columna cromatogrfica para
dispersar dos analitos depende en parte de las
velocidades relativas con las que eluyen las dos
especies:
CONSTANTE DE DISTRIBUCIN
A mvil = A estacionaria
CONSTANTE DE EQILIBRIO ( k )
K= CS
CM
TIEMPO DE RETENCIN .
TIEMPO MUERTO.
ELUCIN
COMO DESCRIBIR LA EFICACIA DE
COLUMNA
MARTIN Y SYNGE : mayor N y menor H
ALTURA DE PLATO ( H )
NMERO DE PLATOS TERICOS ( N )
N = L / H
L = Longitud del relleno de la colmna.
VARIABLES QUE INFLUYEN EN LA EFICACIA DE
COLUMNA
Velocidad de la fase mvil
Coeficiente de distribucin en la FM(
aumenta con el aumenro de temperatura
y disminucin de la viscosidad)
Coeficiente de distribucin en la FE
Factor de capacidad ( K )
Diametro de la partcula de relleno
Grosor del recubrimiento lquido en la F.E.
OPTIMIZACIN DE LA EFICACIA
DE UNA COLUMNA

La separacin cromatografica se optimiza
variando las condiciones experimentales
hasta que los componentes de la mezcla
se separen totalmente en el menor tiempo
posible.Para lograrlo se puede variar la
temperatura o la composicin de la FM ,
utilizando un relleno de columna distinto,
cambiar N, cambiando la long. De onda y
H , por alteracin del caudal de FM.
EL PROBLEMA GENERAL DE LA
ELUCIN
RESOLUCIN DE COLUMNA ( Rs )
Constituye una medida
cuantitativa de su capacidad para
separar dos analitos .
Esto se logra alargando la
columna , aumentando el N ,pero
ello puede llevar al aumento de la
temperatura para la separacin.
Aplicacines de la cromatografa
Anlisis cualitativos ( TR )
Anlisis cuantitativos ( rapidez ,
simplicidad , bajo costo, .)
Basados en la altura de pico
Basados en rea de pico
Calibracin y patrones .
Mtodo del estndar interno.
GRACIAS
POR LA ATENCIN PRESTADA