ENZIMAS

MSC. Jorge Fupuy Chung

jfupuy@usat.edu.pe
Perfil energtico de una
reaccin espontnea
Perfil energtico de una
reaccin catalizada
Las enzimas son protenas altamente especializadas que
tienen como funcin la catlisis o regulacin de la
velocidad de las reacciones qumicas que se llevan a cabo
en los seres vivos.
E + P
E + S
[ES]
Las enzimas son protenas
Catalizan reacciones qumicas necesarias
para la sobrevivencia celular
Sin las enzimas los procesos biolgicos
seran tan lentos que las clulas no
podran existir.
Las enzimas pueden actuar dentro de la
clula , fuera de sta, y en el tubo de
ensayo.
E + S ESEP E + P
E
E E E
Las enzimas son protenas* que catalizan
reacciones qumicas

Nos hacen factibles las reacciones imposibles
Son sustancias que, sin consumirse en una reaccin,
aumentan notablemente su velocidad.
Ello hace posible que en condiciones fisiolgicas
tengan lugar reacciones que sin catalizador
requeriran condiciones extremas de presin,
temperatura o pH.
Prcticamente todas las reacciones qumicas que
tienen lugar en los seres vivos estn catalizadas por
enzimas.
* En su mayora son protenas, hay ARN con capacidad cataltica
(ribozimas)
Enzima y su
sustrato
Unin al centro
activo
Formacin de
productos
E + S ES E + P
Complejo enzima-sustrato
Reaccin catalizada por una enzima:

centro activo regin concreta de la enzima donde el sustrato se une
un sitio de unin formado por los aminocidos
que estn en contacto directo con el sustrato y
un sitio cataltico, formado por los aminocidos
directamente implicados en el mecanismo de la
reaccin
El centro activo comprende
Sitio de unin: es el que le da la especificidad a la
enzima
Sitio
cataltico
El sustrato se une a la enzima luego se inicia la catlisis
Enzimas, protenas catalizadoras. Muchas son protenas conjugadas, contienen
componentes no proteicos cofactores- (inorgnicos = metales, orgnicos =
coenzimas)
Los reactantes deben absorber una energa de activacin (EA) para iniciar una
reaccin
Las enzimas NO agregan energa sino que disminuyen la EA aumentando la
velocidad de una reaccin
Las enzimas (gr. en levaduras)
La enzima disminuye la energa de activacin
Tiempo de la reaccin
E + S
E + P
Sin enzima
Con enzima
La Ea de la hidrlisis de la urea
baja de 30 a 11 kcal/mol con la
accin de las enzimas, acelerando
la reaccin 10
14
x
El aumento de temperatura
necesario para producir la reaccin
no catalizada seria de 529C
MODO DE ACCIN DE LAS ENZIMAS
Enzima - Catalizador
Tanto la enzima como el catalizador
aceleran la velocidad de una reaccin
qumica.
Una enzima puede transformar 1000
molculas de sustrato/ segundo
Las enzimas tienen 3 propiedades que los
catalizadores NO tienen
Especificidad por el sustrato
Se inactivan por desnaturacin
Pueden ser reguladas

1. Solo se precisan en pequeas cantidades
2. No sufren cambios irreversibles durante la reaccin participa de
manera repetida en la reaccin-
3. No tienen efecto en la termodinmica de la reaccin
4. Aceleran reacciones especficas qumicas(10
3
-10
20
)
5. Actan en disolucin acuosa, a pH y temp. ptimos
Pepsina 1.5
Tripsina 7.7
Catalasa 7.6
Arginasa 9.7
Fumarasa 7.8
Ribonucleasa 7.8
Enzima pH ptimo
PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS:
Sitio activo y especificidad molecular
Sitio activo
Enlaces no covalentes
(inicos, de H, interac.
Hidrfobas)
Formacin de un complejo
enzima sustrato.
Representacin esquemtica de
la reaccin que cataliza la
cinasa de piruvato en la que dos
sustratos, el fosfoenolpiruvato
(PEP) y el ADP, se unen con la
enzima para formar un complejo
enzima-ssustrato (ES), que
conduce a la formacin de
productos , ATP y piruvato
Las enzimas se unen a los
reactivos (sustratos) reduciendo
la energa de activacin

Cada enzima tiene una forma
nica con un sitio o centro activo
en el que se une al sustrato

Despus de la reaccin, enzimas y
productos se separan.

Las molculas enzimticas no han
cambiado despus de participar
en la reaccin

La unin del sustrato es muy especfica
Complementariedad geomtrica
Complementariedad de cargas, uniones
inicas
Modelos:
Encaje inducido
Llave cerradura.
Estado de transicin
Una enzima puede unir dos sustratos en su sitio activo
Nomenclatura
Hay varias formas de nombrar una
enzima:
nombres particulares
nombre sistemtico
cdigo de la comisin enzimtica
(enzyme comission)

Nomenclatura:
nombres particulares
Antiguamente, los enzimas reciban nombres
particulares, asignados por su descubridor.

Ejemplos: amilasa (hidrolisa el almidn)
glucoquinasa
Glc + ATP Glc-6P + ADP

Al ir aumentando el nmero de enzimas
conocidos, se hizo necesaria una nomenclatura
sistemtica que informara sobre la accin
especfica de cada enzima y los sustratos sobre
los que actuaba.

Nomenclatura:
nombre sistemtico
Consta actualmente de 3 partes:
el sustrato preferente
el tipo de reaccin realizado
terminacin "asa"
ejemplo: la glucoquinasa
ATP:glucosa fosfo transferasa
Glc + ATP Glc-6P + ADP
Nomenclatura:
Comisin de Enzimas
El nombre es identificado por un cdigo numrico:

encabezado por las letras EC (enzyme commission)

seguidas de cuatro nmeros separados por puntos.
el primer nmero indica a cual de las seis clases
pertenece la enzima,
el segundo se refiere a distintas subclases dentro
de cada grupo,
el tercero y el cuarto se refieren a los grupos
qumicos especficos que intervienen en la
reaccin.
EC 1.x Oxidorreductasas
EC 2.x Transferasas
EC 3.x Hidrolasas
EC 4.x Liasas
EC 5.x Isomerasas
EC 6.x Ligasas
Clasificacin y nomenclatura
EC 2.7.1.1
Nmero Enzyme Commission:
Enzyme
Comission
Grupo
Subgrupo
Nombre comn (sustrato+asa): Hexokinasa
Clasificacin y nomenclatura
ATP: hexosa fosfotransferasa
Nombre sistemtico:
Donador Aceptor
Grupo transferido
Tipo de reaccin catalizada
Grupos qumicos
Grupos qumicos
especficos
Ej.: la ATP:glucosa fosfotransferasa
(glucoquinasa)
Glc + ATP Glc-6P + ADP
EC 2.7.1.2.
2: transferasa
7: fosfotransferasa
1: el aceptor es un grupo OH
2: es un OH de la D-glucosa el que acepta el grupo
fosfato.
Nomenclatura:
Comisin de Enzimas
Grupo 1: Oxidorreductasas
Catalizan reacciones de oxidorreduccin, en que tomos
de oxigeno hidrogeno son trasladados entre molculas:
En las reacciones redox, siempre tienen que estar
presentes a la vez el aceptor y el dador electrnico.
AH
2
+ B A + BH
2

Clasificacin y nomenclatura
A
red
+ B
ox
A
ox
+ B
red

cido succnico + FAD cido fumrico + FADH2
Succinato
deshidrogenasa
Nomenclatura del subgrupo en oxidorreductasas:
EC 1.1.x - Deshidrogenasas
EC 1.2.x - Oxidasas
EC 1.3.x - Peroxidasas
EC 1.4.x - Oxigenasas
EC 1.5.x - Hidroxilasas
EC 1.6.x - Reductasas
etc.
Grupo 1: Oxidorreductasas
Aplicaciones: Ensayos de diagnostico clnico (glucosa oxidasa y colesterol oxidasa)

A-B + C
A + C-B
Grupo 2: Transferasas
Catalizan reacciones de transferencia de tomos grupo de
tomos (distinto del hidrgeno) entre molculas:
Clasificacin y nomenclatura
ATP + glucosa ADP + Glucosa 6 fosfato
Glucoquinasa
Clasificacin de subgrupo de las transferasas:
EC 2.1.x - Grupos monocarbonados
EC 2.2.x - Grupos aldehido o ceto
EC 2.3.x - Aciltransferasas
EC 2.4.x - Glicosiltransferasas
EC 2.5.x - Alquil- o Ariltransferasas
EC 2.6.x - Grupos nitrogenados
EC 2.7.x - Grupos fosfato
EC 2.8.x - Grupos sulfato
EC 2.9.x - Grupos selenio
Grupo 2: Transferasas
Aplicaciones: Sntesis de oligosacridos
Grupo 3: Hidrolasas
Catalizan reacciones de hidrlisis y tambin su reverso.
Son las ms comunes en el dominio de la tecnologa
enzimtica:
A-B + H
2
O A-H + B-OH
No se suelen utilizar nombres sistemticos en las
hidrolasas. Muchas de ellas conservan el nombre
Primitivo. Ejemplo: Quimosina EC 3.4.23.4.
Lactosa + H2O Galactosa + glucosa
Lactasaa
Clasificacin de las hidrolasas:
3.1.-.- Esterasas (carboxilesterasas, fosfoesterasas, sulfoesterasas)
3.2.-.- Glicosidasas
3.3.-.- ter hidrolasas
3.4.-.- Pptido hidrolasas
3.5.-.- Acil anhdrido hidrolasas
etc.
Grupo 3: Hidrolasas
Aplicaciones: Lipasas Sntesis de tensoactivos
Proteasas Fbrica de quesos
Glicosidasas Clarificacin de jugos; liberacin de aromas en los
vinos; aplicaciones textiles
Grupo 4: Liasas
Catalizan reacciones reversibles de ruptura o soldadura de
sustratos (remocin de grupo de tomos del sustrato - este
grupo no incluye las hidrolasas):

A-B A + B
cido acetoactico CO2 + Acetona
Acetacetato
descarboxilasa
Clasificacin de las liasas:
4.1.x - Actan sobre enlaces C-C
4.2.x - Actan sobre enlaces C-O
4.3.x - Actan sobre enlaces C-N
4.4.x - Actan sobre enlaces C-S
4.5.x - Actan sobre enlaces C-Haluro (S
-
, Cl
-
, Br
-
, I
-
At
-
)
4.6.x - Actan sobre enlaces P-O
4.99.x - Otras liases
Aplicaciones: Pectato liasa Remueve los compuestos indeseables (ceras,
pectinas, protenas) en fibras en la industria textil
Grupo 4: Liasas
Grupo 5: Isomerasas
Catalizan reacciones de isomerizacin moleculares
A B
Gliceraldehdo 3 fosfato Dihidroxiacetona fosfato
Fosfotriosa
isomerasa
5.1.x - Rasemasas y Epimerasas
5.2.x - cis-Trans-Isomerasas
5.3.x - Oxidoreductasas Intramolecular
5.4.x - Transferasas Intramoleculares (mutases)
5.5.x - Liasas Intramoleculares
5.99.x - Otras Isomerasas
Grupo 5: Isomerasas
Clasificacin de las isomerasas:
Grupo 6: Ligasas
Catalizan la unin de dos grupos qumicos a expensas
de la hidrlisis de un nucletido trifosfato (ATP, GTP, etc.).
A + B + ATP A-B + ADP + P
i

Ejemplo: Glutation sintasa (EC 6.2.2.3)


Nombre sistmico:
G-L-glutamilo-L-cisteina:glicina ligase


Grupo 6: Ligasas
Clasificacin de las ligasas:
6.1.x - Forman enlaces C-O
6.2.x - Forman enlaces C-S
6.3.x - Forman enlaces C-N
6.4.x - Forman enlaces C-C
6.5.x - Forman enlaces steres fosfricos
6.6.x - Actan sobre enlaces N-metal
Coenzimas
Las coenzimas son pequeas molculas orgnicas,
que se unen a la enzima.
Las coenzimas colaboran en la reaccin
enzimtica recibiendo transitoriamente algn
grupo qumico: H
+
, OH, CH
3
.
La enzima sin la coenzima recibe el nombre de
APOENZIMA
Tres grupos principales: 1. implicadas en
reacciones de transferencia de grupos fosfato:
AMP, ADP y ATP 2. Derivadas de vitaminas:
piridoxal fosfato, coenzima A 3. implicadas en
reacciones de oxidoreduccin: NAD+ y FMN
Inhibidor:

Efector que hace disminuir la actividad enzimtica, a travs de
interacciones con el centro activo u otros centros especficos
(alostricos).

Esta definicin excluye todos aquellos agentes que inactivan a
la enzima a travs de desnaturalizacin de la molcula enzimtica

De esta forma, habr dos tipos de inhibidores:

I. Isostricos: ejercen su accin sobre el centro activo

II. Alostricos: ejercen su accin sobre otra parte de la
molcula, causando un cambio conformacional con
repercusin negativa en la actividad enzimtica.
Los inhibidores isostricos pueden ser de dos tipos:
1. Inhibidor reversible: establece un equilibrio con la enzima libre,
con el complejo enzima-substrato o con ambos:
E + I EI
2. Inhibidor irreversible: modifica qumicamente a la enzima:
E + I
E
ES + I
ESI
Inhibidores enzimticos Los inhibidores enzimticos son molculas que pueden
unirse con una enzima y disminuir su actividad. La
clula depende de inhibidores para regular la actividad
de muchas de sus enzimas
Pueden dividirse en reversibles (competitivos o no
competitivos) o irreversibles
Los reversibles se unen en forma dbil con la enzima,
por lo que son fciles de desplazar. Los competitivos
compiten con el sustrato por el sitio activo, esta tipo de
inhibicin es la base de la actividad de mltiples
frmacos de uso frecuente (La enzima conversora de la
angiotensina ECA: Angiotensina I Angiotensina II,
factor de riesgo mayor para la elevacin de la presin
sangunea. Factor Inhibidor de ECA: Teprtido,
posteriormente se sintetiz el CAPTOPRIL, primer
antihipertensivo. En la inhibicin no competitiva, el
sustrato y el inhibidor no compiten por el mismo sitio de
unin
Los irreversibles, son los que se unen con gran
firmeza a las enzimas. Gases nerviosos como el
diisopropilfosfofluoridato y los pesticidas
organofosforados, actuan como inhibidores irreversibles
de acetilcolinaesterasa, una enzima que tiene un papel
crucial en la destruccin de acetilcolina, el
neurotrasmisor encargado de producir contraccin
muscular


Inhibicin reversible
(a) El inhibidor se fija al centro activo de la enzima libre,
impidiendo la fijacin del substrato: Inhibicin Competitiva

(b) El inhibidor se fija a la enzima independientemente de que lo
haga o no el substrato; el inhibidor, por tanto, no impide la
fijacin del substrato a la enzima, pero s impide la accin
cataltica: Inhibicin No Competitiva

(c) El inhibidor se fija nicamente al complejo enzima-substrato
una vez formado, impidiendo la accin cataltica; este tipo
se conoce como Inhibicin Anticompetitiva
Inhibicin competitiva
Al aumentar la cantidad de
SUSTRATO el inhibidor
competitivo es desplazado y
se forma producto
Inhibidor competitivo
su estructura es similar a la del sustrato
No se forma producto
Inhibidor NO competitivo
El inhibidor NO competitivo se une a la enzima en un sitio diferente del sitio
activo
E ES
EI
I
S
E + P
I
ESI
S
Inhibicin
No Competitiva
El inhibidor se fija indistintamente a la enzima libre E
y al complejo enzima-substrato ES; ni el complejo EI
ni el complejo ESI son productivos
Inhibidor Incompetitivo
En este tipo de inhibicin el inhibidor se enlaza al
centro activo pero solo despus de que el sustrato lo
haya hecho y, por tanto, inhibidor y sustrato no
compiten. De esta manera, aunque todo el sustrato
est saturando la enzima y toda la enzima est como
complejo ES, el inhibidor puede enlazarse
produciendo un complejo inactivo ESI.

cido glucnico
4 aminoantipirina + fenol
Glucosa
oxidasa
4 p benzoquinona
iminofenazona