UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PER

FACULTAD DE INGENIERA EN INDUSTRIAS

ALIMENTARIAS
BIOTECNOLOGA
HUANCAYO 2014
PRODUCCIN DE
ALFA AMILASA
MICROBIANA
Catedrtico:
M.Sc. NORMA NLIDA, GAMARRA
MENDOZA
Integrantes:
HUANQUIS ALBINAGORTA, Lourdes
PALOMINO CESAR, William Ezer


La produccin de enzimas tienen una gran importancia para
los procesos industriales o biotecnolgicos, ya que pueden
ser de enorme ayuda para obtener: productos lcteos,
edulcorantes, frmacos, alimentos, licores, detergentes, o con
propiedades de degradacin de lignina o de compuestos
txicos.
Estas alfa amilasas son muy importantes para muchos
procesos, tanto fisiolgicos, como las amilasas salivales,
como industriales, las que son utilizadas en la fabricacin
de etanol combustible (ya mencionado anteriormente).

Conocer la
definicin de las
alfa amilasas.
Conocer los
pases
productores de
esta enzima.
Estudiar la forma
de obtencin de
las alfa amilasas,
as como los
microorganismos
que la producen.
Las amilasas son enzimas las cuales
hidrolizan molculas de almidn dando
como productos dextrinas y polmeros
compuestos progresivamente por unidades
de glucosa.
alfa-amilasa
beta-amilasa
glucoamilasa isoamilasa
Se encuentran
ampliamente
distribuidas en
tejidos vegetales
en su
accionar
degrada la
amilosa en
maltosa y
pequeos
compuestos
de glucosa
degrada los
enlaces 1,4-a-
glucosdicos
pero
comienza su
accin por el
extremo libre
no reductor
del almidn
convierte la
maltosa
(disacrido)
en las dos
glucosas de
las que est
compuesta
hidroliza los
enlaces 1,6-
alfa-
glicosdicos
quitando las
ramas de la
amilopectina
o las
dextrinas
La comisin enzimolgica (EC)
Alfa amilasa
E.C. 3.2.1.1.
El nmero 3 indica el tipo de
enzima, en este caso una
Hidrolasa, el nmero 2
indica el sub grupo, en este
caso una glicosidasa.
Su nombre sistemtico es
alfa-1,4-glucan-4-
glucanohidrolasa.
Nombres comunes
glucogenasa
endoamilasa
Estas se caracterizan en llevar a cabo la reaccin de
endohidrlisis que se sita de los enlaces 1,4-alfa-D-
glucosidicos en polisacridos que contienen 3 o ms enlaces
1,4-alfa-D-glucosidicos.
Las clulas microbianas son la fuente usual de enzimas para
uso industrial. Las enzimas microbianas se producen a partir
de aproximadamente 25 organismos, incluyendo una docena
de hongos, pero slo aproximadamente el 2 % de los
microorganismos han sido estudiados como fuente de
enzimas.
Segn Food and Agriculture Organization (FAO)
(1992), los principales microorganismos utilizados para
la produccin de alfa amilasas son:
Aspergillus niger.
Aspergillus oryzae
Bacillus licheniformis
Bacillus
stearothermophilus
Bacillus subtilis
Rhizopus delemar
Rhizopus oryzae
Segn Garca, Quintero y Lpez, (2004), los
microorganismos deben cumplir con los siguientes para la
produccin de enzimas.
El microorganismo no debe ser patgeno, ni debe
producir toxinas durante el proceso; debe ser
considerada como GRAS (generalmente reconocido
como seguro) por la FDA.
La enzima debe ser producida extracelularmente.
Debe ser producida con altos rendimientos.
El costo de produccin debe ser razonable.
Debe ser eficiente en el consumo de nutrientes del
medio de cultivo.
Aspergillus niger. Mariani y
Balatti (1999) describen la
obtencin de alfa amilasa a
partir de este microorganismo
de la siguiente manera:
Se utiliza el Aspergillus niger
NRRL 3112, obtenidas en cebada
perlada y un medio de cultivo
selectivo, el cual se puede
apreciar en la tabla 1.
Tabla 1. Composicin del
medio de cultivo
La enzima obtenida es utilizada en la hidrolisis del
almidn en panificacin y la obtencin de jarabes
edulcorantes para la industria alimentaria.
Bacillus. El gnero Bacillus es la fuente bacteriana de
mayor importancia destacando por su importancia
comercial dos de ellos: B amyloliquefaciens y B.
licheniformis, la alfa amilasa de la segunda es la ms
empleada por su alta termo estabilidad.
La incubacin se
llev a cabo en
condiciones
estticas a 35 C por
6 das, tiempo en el
que se alcanza la
mxima actividad
enzimtica.
COMPONENTE g/L
Pectina 2
Extracto de levadura 1
Peptona de carne 10
Peptona de soya 10
KH
2
PO
4
(fosfato de potasio
monobsico)
0.2
CaCl
2
(cloruro de calcio) 0.05
(NH
4
)
2
SO
4
(sulfato de amonio) 3
MgSO
4
(sulfato de magnesio) 0.8
MnSO
4
6H
2
O (sulfato de manganeso
hidratado)
0.05
FeSO
4
7 H
2
O (sulfato de hierro
hidratado)
0.015
Tabla 2. Formulacin del medio de cultivo para Bacillus SC-H.
Aspergillus oryzae. Las alfa amilasas de este
microorganismo es de importancia comercial, ya que es
una enzima de sacarificacin, produce altas cantidades de
maltosa. Un medio de cultivo adecuado para este
microorganismo, se describe en la tabla 3.
En este caso el pH
de fermentacin
juega un papel muy
importante.
COMPONENTE %
Almidn 8
NaNO
3
(nitrato de sodio) 1.2
K
2
HPO
4
(fosfato monoacido de
potasio)
0.1
MgSO
4
(sulfato de magnesio) 0.1
KCl (cloruro de potasio) 0.05
FeSO
4
(sulfato de hierro) 0.003
Mg(NO
3
)
2
(nitrato de magnesio) 0.08
Zinc trazas
Extracto de malta 2
Tabla 3. Medio de cultivo para Aspergillus
oryzae.
Unas 20 compaas de Europa, Japn y Estados Unidos
realizan la produccin de enzimas, pero el mercado es
dominado por 3 de ellas: Novo Nordisk (Dinamarca) con
el 50% de las ventas a nivel mundial, seguida por Gist
Brocades (Neatherlands) y Rhom and Haas (Alemania).
El mercado de las enzimas ha tenido gran crecimiento desde
los aos 70 y este ha sido paralelo con el desarrollo de un
gran nmero de aplicaciones en la industria alimentaria.
En Amrica latina existen empresas productoras de
enzimas en Mxico, Brasil, Argentina y Uruguay,
muchas de las cuales son subsidiarias de empresas
transnacionales, como es el caso de Pfizer en
Mxico y Brasil y Novo en Brasil.
Mid- temperatura alfa- amilasa
enzima textil
Suministrado por Xingtai Sinobest
Biotech Co., Ltd. Ubicado en el pas
de china, con la marca de xiangyu.
Provee de una enzima en polvo de
color amarillo marron. Con una
actividad de enzima de 2000 a
4000 U/g.
Tiene un precio de 9.09 nuevos
soles por kilogramo, con una
cantidad mnima de pedido de 1
tonelada por semana.
Alfa amilasa fngica.
Originario de china,
suministrado por la empresa
Xian Lyphar Biotech Co.,
Ltd. Actividad de enzima de
20000 U/g. Tiene un precio
de 155.82 nuevos soles por
kilogramo, con una cantidad
de pedido minimo de 1
kilogramo por semana.
Food and Agriculture Organization (FAO) (1992) CODEX
ALIMENTARIUS, REQUISITOS GENERALES. SEGUNDA
EDICIN. ROMA ITALIA.
Garca, Quintero y Lpez, (2004) BIOTECNOLOGA
ALIMENTARIA. Editorial Limusa. Mxico Mxico.
Mariani y Balatti (1999). INFLUENCIA DE LA AERACION EN
LA PRODUCCIN DE ALFA AMILASA POR ASPERGILLUS
NIGER NRRL 3112. UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA
PAMPA. ARGENTINA.
Cabezas y Morata (sf ). PRODUCCIN DE PECTINASAS Y
AMILASAS DE BACILLUS SC-H EN FERMENTACIN EN
SUSTRATO SLIDO Y SUMERGIDA. Facultad de Ciencias
Aplicadas a la Industria, UNCuyo. Argentina.