Enzimas: Cintica,

inibio e regulao
1.Autorreplicao;
2.Catlise de reaes qumicas com eficincia e seletividade
CONDIES FUNDAMENTAIS DA VIDA:
Enzimas
Molculas catalisadoras que aumentam a velocidade das
reaes, sem sofrerem alteraes no processo global;
Na faixa de 5 a 17 ordens de magnitude.
Praticamente todas as reaes
que caracterizam o metabolismo
celular so catalisadas por
enzimas.
Enzimas
http://www.youtube.com/watch?v=s4jEZ9Os6QM
RESDUOS DE AAS COM
GRUPOS DE CADEIAS
LATERAIS QUE SE LIGA
AO SUBSTRATO
CATALISA A
TRANSFORMAO
BIOQUMICA
Enzimas
OS CATALISADORES AUMENTAM A VELOCIDADE DAS REAES POR DIMINUREM AS
ENERGIAS DE ATIVAO (interao covalente e fracas entre enzima e substrato);
NA EVOLUO, AS ENZIMAS DESENVOLVERAM-SE PARA DIMINUIR SELETIVAMENTE AS
ENERGIAS DE ATIVAO DAS REAES NECESSRIAS PARA A SOBREVIVNCIA
CELULAR
Estado de transio
Enzimas
Ribozima
Molcula de RNA com atividade cataltica
Nomenclatura
SUFIXO ASE
UREASE_ CATLISE DA UREIA
DNA POLIMERASE_ POLIMERIZAO DNA
PEPSINA_ DO GREGO PEPIS (DIGESTO)
ACORDO INTERNACIONAL EM BIOQUMICA
Classificao das
Enzimas
Classificao das
Enzimas

Isozimas
Isozimas - enzimas que catalisam a mesma reao mas
apresentam estruturas diferentes (primria e/ou quaternria).
Podem ser :
- constituem diferentes enzimas produzidas por diferentes
genes;

Desidrogenase
ltica
PROPRIEDADES DAS ENZIMAS
STIO ATIVO
Stio de ligao do substrato;
Stio cataltico.
1.Cadeias laterais de AAs (fenda ou bolso_3D)
2.Eficincia cataltica
3.Especificidade

Um ou mais ons inorgnicos ou molcula orgnica ou
metalorgnica complexa (coenzima).
COFATOR
PROPRIEDADES DAS ENZIMAS
Cofator (inorgnico)
Algumas enzimas requerem a presena de ons
metlicos para que a reao cataltica ocorra (Mg, Zn,
Fe, Ca, Cu, Mn).
Anidrase carbnica uma enzima que
tem um papel importante no transporte
do CO2 e no controle do pH do sangue.
Zinco
PROPRIEDADES DAS ENZIMAS
Coenzima_ carreadores transitrios de grupos funcionais
especficos. A maioria deles derivada das vitaminas
(deve estar na dieta em pequenas quantidades).
Apoenzima Holoenzima
As enzimas quando ligadas
covalentemente ou no-
covalentemente s
coenzimas, so chamadas
de holoenzimas
Grupo prosttico
(coenzima)
Coenzima
PROPRIEDADES DAS ENZIMAS
Regulao
Localizao especfica
Modelos enzimticos
Especificidade enzimtica
1. Chave-fechadura
No o ideal, estabiliza o substrato.
Especificidade enzimtica
2. Encaixe induzido
Interaes timas s
ocorrem no estado de
transio.
Modelos enzimticos
FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DA REAO
CONCENTRAO DO SUBSTRATO
Unidade de enzima (U) - quantidade de enzima que catalisa a transformao de
1 mol de substrato por min
[ES]
STIOS DE LIGAO
OCUPADOS
FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DA REAO
Temperatura e estabilidade molecular
A temperatura tima para a maioria das enzimas humanas
est entre 35 e 40C. Acima de 40C, as enzimas
desnaturam.
Bactrias termfilas apresentam temperaturas timas
acima de 70C.
Efeito do pH
Cadeias laterais ionizveis ou no ionizveis
FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DA REAO
Atividade enzimtica
obtida pela determinao da velocidade da reao
catalisada pela enzima sob condies definidas.
Cintica enzimtica
Equao de Michaelis-Menten
baseado nos seguintes pressupostos:
E, S e ES esto em equilbrio;
a converso de ES em E + P uma etapa
irreversvel e limitante da velocidade.
Velocidade inicial calculada quando a
enzima misturada ao substrato, sendo
nesse momento o produto muito
pequeno.
reversvel
Km= K2 + K3/K1
A velocidade da reao diretamente
proporcional concentrao da enzima
Constante de Michaelis-Menten (Km)
Afinidade da enzima e do seu substrato especfico
Qual correlao
entre Km e Vmx?
Km=Vmx/2
Km=[S]
Experimentalmente (grandes qtdes de substrato)
Cintica enzimtica
Grfico de Lineweaver-Burk
A inverso de Vo e [S] possibilta a determinao de
Vmax e Km
Inibio enzimtica
Inibidores enzimticos so substncias que
interferem na atividade das enzimas, bloqueando o
processo cataltico.
Inibidores irreversveis
Inibidores reversveis
Inibidores fisiolgicos
Frmacos
Substncias txicas
Inibio enzimtica
Inibidores Irrevesveis
Gases txicos derivados de cidos fluor-fosfrico
(HPO2F2, H2PO3F)
organofosforados carbamatos
Stio ativo da colinesterase
Inibidores Irrevesveis
Inibio enzimtica
Inibio Competitiva
E + S + I ES + EI
1. Os inibidores competitivos so geralmente
substncias anlogas do substrato;
2. A enzima pode complexar ou o substrato ou o
inibidor mas no ambos simultaneamente;
3. Ocorre aumento do Km (Km aparente), sem
modificao da Vmx;
4. A ao dos inibidores competitivos abolida a
concentraes elevadas do substrato.
5.Reverso (aumento do substrato).
Inibidores reversveis
Sntese
bacteriana
tetraidrofolato
Sntese das
bases de cidos
nuclicos
Inibe DNA polimerase
Inibio enzimtica
Inibio No-competitiva
E + S + I ES + EI + EIS
1. O inibidor se liga enzima num local diferente do
stio ativo;
2. A enzima pode combinar-se simultaneamente com o
substrato e o inibidor;
3. Ocorre diminuio aparente do Vmx (menos
enzimas);
4. O inibidor afeta a configurao mais apropriada
catlise.
Ex: metais pesados
SH protenas
Regulao enzimtica
Controle alostrico
Regulao enzimtica
Modificao covalente
A atividade de muitas enzimas regulada por modificaes de
natureza covalente que se conjugam com as interaes
alostricas (no covalentes) e as ampliam.
quinase e fosfatase
A modificao covalente pode ser ocorrer
pela adio de diferentes radicais, pelos
processos denominados fosforilao,
glicosilao, galactosilao, metilao, entre
outros.