Tema 15

Parte 1.- La muestra y su tratamiento.

Parte 2.- Tcnicas analticas de separacin no
cromatogrficas
1.1 .- La disolucin de las
muestras slidas
1.1 INTRODUCCION
DISOLUCION DE MUESTRAS SOLIDAS
La mayora de las tcnicas analticas requieren la muestra en disolucin
Muy pocas permiten su anlisis directo sobre muestras slidas
Transformacin de una muestra slida a
una fase lquida, pudiendo realizarse
con o sin reaccin qumica
DISOLUCION O
DIGESTION
DISOLUCION
DI SOLUCI ON DE MUESTRAS SLI DAS

Elegir un disolvente apropiado: semejante disuelve a semejante:
Disolventes no polares como CCl
4
, CHCl
3
, CS
2
, ... disuelven sustancias no polares (inorgnicos
como S o I
2
)
Disolventes de polaridad media como etanol para cidos orgnicos , aminas , etc..
Disolventes polares como el agua para sustancias inicas..

1.1 INTRODUCCION
Tipo de
tratamiento
Principio del mtodo Consideraciones
Digestin cida Se trata con agua, cidos, mezcla de
cidos u otros agentes que
disuelven la muestra (con o sin
reaccin qumica), generalmente en
caliente
La eficiencia del proceso depende de
la naturales de la muestra y del
disolvente usado, temperatura, ..
Acenizamiento en
seco
La materia orgnica se destruye por
oxidacin a temperatura elevada. El
residuo se disuelve en medio cido
La eficiencia del proceso dependen
de la matriz y la temperatura del
proceso. Los riesgos de prdidas se
disminuyen con la adicin de agentes
estabilizantes
Lixiviacin Se usa un solo disolvente o
secuencialmente diferentes
disolventes que extraen a los
analitos. El mtodo incluye
agitacin, control de la temperatura
y filtracin
La muestra debe estar constituida
por partculas muy finas. La
eficiencia del proceso depende de las
condiciones usadas y de la
naturaleza de los analitos
Fusin Se trata con fundente que
proporcionan temperaturas muy
altas que aumentan la solubilidad de
los componentes de la muestra
La temperatura depende de los
fundentes (300-1200C)
Sonicacin La muestra junto con el extractante
se somete a la radiacin de
ultrasonidos
La eficiencia del proceso depende de
la temperatura, tiempo, matriz y
extractante
Extraccin
acelerada (ASE)
Se calienta en un recipiente cerrado
por encima del punto de ebullicin
Proporciona un aumento de la
velocidad del proceso. Requiere
medidas de seguridad
Extraccin con
fluidos
supercrticos
(SFE)
Se pasa un fluido en estado
supercrtico a travs de la muestra
El CO
2
es el ms usado y la eficiencia
depende de la naturaleza de la matriz
Microondas Las muestras junto con el
extractante se colocan en sistemas
cerrados y se somete a la radiacin
de microondas
Disminuye los riesgos de prdidas,
de contaminacin y el tiempo del
proceso disminuye
Tabla. Mtodos comnmente usados en la disolucin de muestras slidas
Digestin
cida
Se trata con agua,
cidos, mezcla de cidos
u otros agentes que
disuelven la muestra (con
o sin reaccin qumica),
generalmente en caliente
La eficiencia del proceso
depende de la naturales
de la muestra y del
disolvente usado,
temperatura, ..
Detalle de tabla: Mtodos comnmente usados en la disolucin de muestras slidas
1.1 INTRODUCCION
DIGESTION ACIDA
OBJETIVOS
Usar reactivos capaces de disolver la muestra completamente (sin restos
insolubles)
Debe ser un proceso rpido
Los reactivos no deben interferir en la etapa de medida y no deben
contaminar la muestra
No deben producirse prdidas de los analitos de inters
Los reactivos no deben alterar el recipiente donde se realiza el proceso
Debe ser seguro
Consiste en el uso de cidos minerales u oxidantes y una fuente
de calor externa que descompone la matriz de la muestra
SIN REACCION QUIMICA
Agua o disoluciones reguladoras en fro o en caliente
Acidos diluidos, concentrados y mezclas
CON REACCION QUIMICA
DIGESTION ACIDA
Acidos y mezclas de cidos ms utilizados en la digestin de muestras slidas
Acido PE
(C)
Caractersticas Aplicaciones
HCl 110 Acido fuerte con carcter reductor
Forma complejos con la mayora de
metales de transicin (excepto: Ag y
Tl)
Aceros
No para grafito y carburos resistentes). No
descompone la materia orgnica
H
2
SO
4
338 Propiedades oxidantes (concentrado) y
al ser es menos voltil se puede utilizar
a T elevadas pero utilizando
recipientes de cuarzo y nunca PTFE
(se deforma a 260 C)
Metales, aleaciones, xidos e hidrxidos
Eliminacin de la materia orgnica.
Se utiliza combinado con el cido ntrico.
La eficacia aumenta con la adicin de
electrolitos (Na
2
SO
4
o K
2
SO
4
)
HNO
3
122 Oxidante muy fuerte que disuelve
diferentes muestras que el cido
clorhdrico no es capaz de atacar
Muy inestable y altamente reactivo
(aadir lentamente)
Disuelve metales como Cu, Pb, Zn, Cd, Mo
pero no para metales nobles
Su poder aumenta cuando se combina con
HCl
HClO
4
203 Oxidante muy fuerte
Las muestras son tratadas primero con
cido ntrico y a continuacin con
perclrico..
Precaucin cuando se utilice pues la
reacciones son explosivas (origina
CO2) y se debe calentar gradualmente,
adems se generan vapores txicos
(utilizar vitrinas de extraccin de acero
inoxidable)
Elimina la materia orgnica
En caliente es capaz de disolver un gran
nmero de metales, el grafito y otras
sustancias muy insolubles como el sulfato
de bario
1.1 INTRODUCCION
Acidos y mezclas de cidos ms utilizados en la digestin de muestras slidas
Acido PE
(C
)
Caractersticas Aplicaciones
HF 112 Su capacidad de disolver muestras se
debe a su capacidad como
complejante.
Ataca al vidrio y cuarzo y hay que usar
material de tefln y adems es
necesario eliminarlo antes del anlisis
pues puede daar aquellos
componentes del instrumento que sean
de estos materiales
Para eliminarlo se usan otros cidos
H
2
SiF
6
+ (H+) 2HF (g) + SiF
4
(g) o con
cido brico H
3
BO
3
+ 3 HF HBF
3
(OH)
+ 2H
2
O, HBF
3
+ HF HBF
4
(problema
es que la slice tambin se elimina)
Se usa principalmente con muestras
que contienen slice (SiO
2
+ 6HF
H
2
SiF
6
+ 2H
2
O).
Cuando en la muestra se quiera
determinar slice hay que eliminar el
fluorhdrico por volatilizacin.
Agua
regia
- Ntrico:Clorhdrico 1:3 v/v que da lugar
a un reactivo intermedio de NOCl).
Esta mezcla tiene un gran poder de
digestin y es capaz de disolver
metales (incluso metales nobles
como Au, Pd y Pt)
Uso de cidos:
No oxidantes : HCl, HF , HBr , HI, H
3
PO
4
, H
2
SO
4
dil y HClO
4
dil
Para rocas carbonatadas y algunos sulfuros pueden usarse cidos
diluidos. Ataque de cementos, escorias, vidrios, silicatos, fosfatos.

Oxidantes : HNO
3
conc. HClO
4
conc. H
2
SO
4
conc.
Los cidos concentrados implican ms acidez, a veces oxidacin y el
efecto complejante del anin.

1.1 INTRODUCCION
DIGESTION ACIDA
PROCEDIMIENTO GENERAL
1) Seleccin del reactivo de digestin depende de la naturaleza de
la matriz y de los analitos
2) Se introduce la muestra (tamao adecuado) junto con el reactivo en
un recipiente para llevar a cabo la digestin (normalmente en caliente)
Se utilizan recipientes abiertos de vidrio o de Tefln y sometidos
a altas temperaturas en vitrinas de extraccin (gases txicos)
Existen digestores comerciales que permiten la digestin
simultnea de varias muestras utilizando tubos de digestin de
vidrio como el de la imagen.
1.1 INTRODUCCION
Figura. Digestor para muestras slidas
DISGREGACIONES :

Someter una sustancia muy insoluble, a la accin
de reactivos de accin muy enrgica, generalmente
a estado de fusin o alta temperatura, que conduce
a la desnaturalizacin del slido insoluble,
dejandolo en condiciones de ser disuelto, una vez
frio, por los disolventes de uso frecuente
Para ello la muestra en polvo se mezcla con una fundente en exceso, a
continuacin se funde la mezcla dentro de un crisol en un horno mufla ( 300 a
1000 C) y el resultado es ya soluble.
1.1 INTRODUCCION
FUSION
Algunas sustancias como por ejemplo silicatos y xidos son muy
difciles de digerir utilizando cidos y es necesario recurrir a otras
tcnicas como la fusin
Consiste en la adicin de un reactivo slido a la muestra en un
crisol resistente a las altas temperaturas (ejemplo de Pt)
Se introduce en un horno mufla a la temperatura requerida (300-
1000 C) durante un periodo de tiempo que puede variar desde varios
minutos a varias horas
Despus de este tiempo se obtiene una sustancia clara derretida
debido a que los diferentes componentes de la muestra se
transformar en otros que son fciles de disolver
Se enfra y el residuo se disuelve en un cido mineral
(generalmente HCl)
Sulfatos cidos y disulfuros Oxidos de metales
Fluoruros (hidrgeno, potasio y amonio) Zr, Be, otros metales
resistentes
Uno de los ms eficaces es el cido brico y xido de boro materiales
muy resistentes (minerales, materiales refractarios)
FUNDENTES ALCALINOS
Los ms conocidos son los que usan carbonato (Na
2
CO
3
)
Otras fusiones: hidrxidos alcalinos (KOH, NaOH, LiOH) o boratos (cidos
meta y tetrabrico para cermicas)
FUNDENTES CON CARACTERISTICAS REDOX
FUNDENTES ACIDOS
Oxidantes: Perxido de sodio
Reductores: Almidn o cianuros alcalinos (en este caso se requiere el
uso previo de un fundente cido o bsico)
Mineralizacin de una muestra orgnica para un anlisis elemental
Mineralizacin hmeda :

Se usan agentes oxidantes como cido sulfrico concentrado o
mezclas sulfrico ntrico; perclrico ntrico. Puede realizarse en
bomba a presin atacada con microondas.


Mineralizacin seca :

Calentando en una llama el crisol hasta que la materia carbonosa
pase a xido de carbono
Tcnicas analticas de separacin no
cromatogrfica
Parte 2
Tcnicas analticas de separacin:
Extraccin con disolventes: Una sustancia en un disolvente. Otro
disolvente donde se extrae segn equilibrio de distribucin.

Precipitacin: Convertir el analito en una especie insoluble por reaccin
qumica ( gravimetra, precipitacin de proteinas...)

Coprecipitacin: Trazas de analito se incorporan al precipitado.

Electrodeposicin : Iones metlicos ante un potencial elctrico

Volatilizacin: Conversin qumica a forma gaseosa.

Destilacin: Separacin por puntos de ebullicin

Dilisis: Dos fases lquidas membrana semipermeable- difusin


Y cmo separamos el analito de la matriz?
. Cromatografa : fase mvil fluye por fase estacionaria

. Destilacin fraccionada: en contracorriente, equilibrio liquido-vapor.

. Cambio inico : la disolucin inica pasa por una resina cambiadora

. Adsorcin / Desorcin : Slidos adsorbe lquido o gas.

. Absorcin : por reaccin con solidos

. Atrapamiento en fro: Separacin de gases por condensacin en trampa
fria

. Electroforesis : especies cargadas se separan por diferente velocidad de
migracin en un campo elctrico. (separacin protenas)

. Ultracentrifugacin : intensa centrifugacin

Extraccin con disolventes
1.1 INTRODUCCION
EXTRACCION LIQUIDO-LIQUIDO
Se basa en la diferencia de solubilidad de un soluto en dos fases lquidas
inmiscibles
El analito se transfiere desde la muestra lquida o un extracto de la misma hasta
una fase lquida inmiscible que se separa de la anterior
Adems de la preconcentracin se consigue la limpieza de la muestra
1) Se adiciona a la muestra un volumen de disolvente
orgnico inmiscible en un embudo de decantacin
2) Se agita la mezcla vigorosamente durante varios
minutos
3) Se deja en reposo hasta que las dos fases se
separen
4) Se recoge la segunda fase en un matraz redondo
5) Se repite el proceso
6) Los total de extractos se lleva a sequedad y se
redisuelve el residuo con un volumen pequeo de
disolvente adecuado para el anlisis
1.1 INTRODUCCION
EXTRACCIN LQUIDO-SLIDO CONVENCIONAL CON AGITACION
MECANICA
Consiste en colocar la muestra slida en un recipiente al que se aade el
disolvente orgnico y a continuacin se agita (manualmente o bien en un
agitador mecnico o de volteo).
Los analitos son separados de la matriz slida por filtracin o
centrifugacin.
El proceso se repite varias veces para conseguir la extraccin
completa de los analitos.
EJEMPLO:
Extraccin de fenoles en muestras de suelo mediante
agitacin
1 gramo de suelo, 50 mL de MeOH:agua (60:40 v/v) y agitar
durante 30 minutos en un agitador de volteo.
Finalmente la muestra se filtra travs de un filtro de
membrana de 0.45 m.
1.1 INTRODUCCION
EXTRACCION CON SOXHLET
1) La muestra se coloca en el dispositivo B junto con sulfato sdico (para
eliminar el agua de la muestra) dentro de un cono de material que sea
resistente al disolvente orgnico pero que no sea impermeable
Consiste en la extraccin de la muestra en un recipiente (matraz redondo
de boca esmerilada) utilizando un disolvente a elevada temperatura
(manta calefactora, un mechero o una placa (bao mara)
2) Se llena el matraz redondo con un volumen adecuado de disolvente
orgnico
3) Se calienta por encima de su punto de ebullicin el disolvente se
evapora y va condensando en el deposito donde est la muestra y este
comienza a llenarse
4) Cuando se llena completamente el tubo (D), el deposito se vaca y todo el
disolvente cae nuevamente en el matraz redondo y as sucesivamente
durante el tiempo necesario para la extraccin (estos periodos suelen ser de
6, 12, 18 o 24 horas)
EXTRACCION CON
SOXHLET
B
D
1.1 INTRODUCCION
SISTEMA DE EXTRACCION CON SOXHLET
EJEMPLO
Extraccin de
PAHs en suelos

10 gramos de
suelo ms 10
gramos de
sulfato sdico
150 mL de
diclorometano
Extraccin
durante 24 horas.

Recuperaciones
satisfactorias
para la mayora
de PAHs.
1.1 INTRODUCCION
EXTRACCION CON HORNO MICROONDAS
El sistema se extraccin por microondas se puede utilizar tambin para
la extraccin de compuestos orgnicos en muestras slidas utilizando
disolventes orgnico
La extraccin se puede llevar a cabo tanto en sistemas cerrados como
abiertos y como disolventes orgnicos se utilizan: acetona, acetonitrilo,
diclorometano, metanol,
Ejemplo: extraccin de PAHs en suelos
- 2 gramos de suelo y 70 mL de diclorometano
- Extraccin a 300 W en vasos abiertos durante 20 minutos
- A continuacin filtrar, evaporar y redisolver en 5 mL de
disolvente
- Resultados se compararon con los obtenidos en Soxhlet, siendo
similares en ambos casos
1.1 INTRODUCCION
DISPERSION EN MATRIZ SOLIDA
1) Se mezcla la muestra slida con un slido adsorbente por ejemplo
C18 (octadecilsilano)
2) Se introduce en un cartucho vaco
3) Se aaden pequeos volmenes de disolventes orgnicos para
eluir los analitos del cartucho. (En ocasiones se puede incluir una
etapa previa de limpieza de la muestra con un disolvente que no
eluye a los analitos pero si a otros compuestos de la muestra)
La tcnica de dispersin de matriz en fase slida (MSPD) es muy
parecida a la tcnica de extraccin en fase slida (SPE) que se emplea
para la preconcentracin de muestras lquidas, mientras que la MSPD
se usa para muestras slidas
PROCEDIMIENTO
1.1 INTRODUCCION
Introducir la
mezcla en un
cartucho vaco
Mezclar y triturar la
muestra y el
sorbente slido
Sorbente slido Muestra
ANALISIS
Elucin de los analitos
Disolvente orgnico o
mezcla de disolventes
Limpieza de la muestra
ESQUEMA GENERAL DE LA TECNICA DE DISPERSION EN MATRIZ SOLIDA
0.5-2 gramos de muestra
y de adsorbente (C18,
C8) cuatro veces menos
(4:1)
El disolvente orgnico
depender de la polaridad de
los analitos
Polares disolvente polar
Apolares disolvente apolar
El nmero de aplicaciones de
esta tcnica es muy pequeo. Un
ejemplo es la de un alcohol
(Lutensol) en peces
1.1 INTRODUCCION
TRATAMIENTOS DE MUESTRAS LIQUIDAS
Anlisis directo
Tcnicas de preconcentracin incrementar la fraccin molar del
analito (orgnicos e inorgnicos)
TECNICAS DE PRECONCENTRACION
EVAPORACIN
EXTRACCIN LQUIDO-LQUIDO (LLE)
EXTRACCIN EN FASE SLIDA (SPE)
MICROEXTRACCIN EN FASE SLIDA (SPME)
EVAPORACION
Se basan en la reduccin del volumen de muestra mediante
evaporacin DESTILACION
Fundamento: Se basa en la distinta volatilidad de los componentes de la
muestra
La temperatura de destilacin de la temperatura de volatilizacin y de los
analitos
Tcnica de preconcentracin no adecuada para compuestos voltiles y
termolbiles
CALOR
AGUA DE
REFRIGERACION
FIGURA. Rotavapor
1.1 INTRODUCCION
EXTRACCION LIQUIDO-LIQUIDO
Se basa en la diferencia de solubilidad de un soluto en dos fases lquidas
inmiscibles
El analito se transfiere desde la muestra lquida o un extracto de la misma hasta
una fase lquida inmiscible que se separa de la anterior
Adems de la preconcentracin se consigue la limpieza de la muestra
1) Se adiciona a la muestra un volumen de disolvente
orgnico inmiscible en un embudo de decantacin
2) Se agita la mezcla vigorosamente durante varios
minutos
3) Se deja en reposo hasta que las dos fases se
separen
4) Se recoge la segunda fase en un matraz redondo
5) Se repite el proceso
6) Los total de extractos se lleva a sequedad y se
redisuelve el residuo con un volumen pequeo de
disolvente adecuado para el anlisis
1.1 INTRODUCCION
EXTRACCION EN FASE SOLIDA
Es una de las tcnicas actuales ms usadas
Se pone en contacto la muestra en estado lquido con una fase slida
que retiene a los analitos de inters (o a las interferencias)
Los analitos son eluidos desde la fase slida con un disolvente
adecuado
Conlleva la preconcentracin de los analitos
Los procesos de retencin de lo analitos pueden ser debidos a
reacciones de intercambio inico o bien de adsorcin
EXTRACCION EN FASE SOLIDA
ETAPAS
1) Acondicionamiento del cartucho
2) Paso de la muestra a travs del cartucho RETENCION DE LOS
ANALITOS
3) Secado del cartucho con aire o N2 MEJORA DE LAS RECUPERACIONES
4) ELIMINACION DE INTERFERENCIAS
5) ELUCION DE LOS ANALITOS
EXTRACCION EN FASE SOLIDA
ETAPAS
ETAPA1.
Acondicionamiento
del cartucho
ETAPA2. Paso de la
muestra por el
cartucho
ETAPA3.
Secado del
cartucho
ETAPA4. Eliminacin
de interferencias
ETAPA5. Elucin de
los analitos
1.1 INTRODUCCION
EXTRACCION EN FASE SOLIDA
INSTRUMENTACION
1.1 INTRODUCCION
SISTEMA AUTOMATICO PARA PRECONCENTRACION MEDIANTE SPE
1.1 INTRODUCCION
TRATAMIENTOS DE MUESTRAS GASEOSAS
Anlisis directo COMPUESTOS VOLTILES
Tcnicas de preconcentracin ADSORCION DE LOS ANALITOS
EN UN SORBENTE SOLIDO O EN UNA TRAMPA FRIA (Toma de
muestras)
TECNICAS DE TRATAMIENTO
Desorcin trmica
Purga y trampa se hace pasar un gas (N2) a travs del cartucho y los
analitos voltiles son recogidos en una trampa slida y a continuacin son
desorbidos trmicamente
Extraccin de los analitos mediante Soxhlet o ultrasonidos
Microextraccin en fase slida
APLICACIONES
Extraccin de BTEX= benceno, tolueno, etilbenzeno y orto-, meta- y para-
xileno
1.1 INTRODUCCION
FIGURA. Inyeccin de muestras
gaseosas