M.C.

VANIA MARILYN MARIN

RANGEL
DEFINICION Y UBICACIN TAXONOMICA
M.O. UNICAELULARES
SE REPRODUCEN POR FISION BINARIA
VIDA LIBRE; ALGUNOS SON INTRACELULARES: Clamydia y
Ricketsias
INTEGRAN EL REINO DE LAS PROCARIOTAS
ADN CIRCULAR CERRADO

Staphylococcus aureus
Enterococcus faecalis
Bacillus megaterium Rodospirillum rubrum

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Cpsula: Se presenta en muchas bacterias, sobre todo patgenas. Es una estructura viscosa
compuesta por sustancias glucdicas. Tiene funcin protectora de la desecacin, de la fagocitosis
o del ataque de anticuerpos.
Pared Bacteriana: Formada por pptidoglucanos y otras sustancias. Es una
envoltura rgida que soporta las fuertes presiones osmticas a las que est
sometida la bacteria. Por la estructura de su pared distinguiremos las bacterias
Gram+ y Gram-.
Membrana plasmtica: Similar en estructura y composicin a la de las clulas
eucariotas. Presenta unos repliegues internos llamados
mesosomas.
Mesosomas: Repliegues de la membrana con importantes funciones pues
contienen importantes sustancias responsables de procesos metablicos
como el transporte de electrones, la fotosntesis o la replicacin del ADN.
Ribososmas: Similares a los de la clula eucariota aunque de menor tamao.
Intervienen en la sntesis de protenas.
Cromosoma bacteriano: Est formado por una sola molcula de ADN de doble
hlice, circular y no asociado a histonas.
Plsmidos: Molculas de ADN extracromosmico tambin circular.
Inclusiones: Depsitos de sustancias de reserva.
Fagelos: Estructuras filamentosas con funcin motriz, formados por fibrillas
proteicas
Fimbrias o Pili: Filamentos largos y huecos con funciones relacionadas con el
intercambio de material gnico y la adherencia a sustratos.
Esquema clula procariota
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En numerosas bacterias se forma en
la parte externa de la pared una
cpsula viscosa compuesta por
sustancias glucdicas. Esta envoltura,
que se presenta en casi todas las
bacterias patgenas, las protege de
la desecacin y de la fagocitosis por
los leucocitos del hospedador, as
como del ataque de los anticuerpos,
lo que aumenta la virulencia de las
bacterias encapsuladas.
La presencia de la cpsula no es, sin
embargo, un carcter diferenciador,
pues determinadas bacterias pueden
o no formarla en funcin de los
medios de cultivo.
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Reproduccin
asexual
Generalmente las bacterias se multiplican por biparticin o
divisin binaria, tras la replicacin del ADN, que est dirigida por
la ADN polimerasa de los mesosomas, la pared bacteriana crece
hasta formar un tabique transversal que separa las dos nuevas
bacterias. (Simple divisin)
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Crecimiento Bacteriano
Rezago o letargo: las bacterias se estn adaptando a las condiciones ambientales para
iniciar su crecimiento, lo que requiere de la sntesis de nuevas enzimas y protenas
especficas.
Exponencial: las bacterias se dividen ilimitadamente, porque las condiciones ambientales
son ptimas y no existe ningn tipo de limitacin para su desarrollo.
Estacionaria: el crecimiento experimenta una reduccin por el agotamiento de los
nutrientes y por la acumulacin de desechos metablicos producidos por las propias
bacterias, que les resultan letales. Finalmente el aumento del nmero de individuos se
detiene por completo, alcanzando la fase estacionaria mxima, y luego comienza a
disminuir.
Declinacin o muerte: la mortalidad de la poblacin aumenta sostenidamente, lo que
determina su extincin.
Aunque los microorganismos vivos se pueden examinar
directamente con un microorganismos ptico, a menudo
hay que fijarnos y teirlos para aumentar la resolucin,
acentuar las caractersticas morfolgicas y conservarlos
para su estudio en el futuro.
2 tipos de
tinciones
Positivas: se emplea el
uso de colorantes que tien al
microorganismo y no al
medio.
Negativas: se emplea el uso de colorantes que no tienen afinidad por
los constituyentes celulares (Ejemplo: nigrosina). Tien al medio y no a
las bacterias, sirven para ver celulas con capsulas de
mucopolisacaridos.
Simples: uso de un solo
colorante. Sirven para
distinguir formas.
Diferenciales: uso de un
colorante inical y luego un colorante
de contraste. Sirven para diferenciar
distintos tipos de celulas (Ejemplo:
tincion Gram)
Tinciones
Permite distinguir dos grandes grupos de bacterias que poseen diferencias
estructurales en la pared celular.
Peptidoglicano
Polimero de N-acetilglucosamina y N-acetilmuramico
unidos por peptidos.
Tincion Gram
Peptidoglicano
Tincion Gram
Tincion Gram
1) Preparar un extendido
A partir de cultivos en medio liquido: Se toma un poco de cultivo
con el ansa y se desparrama sobre un portaobjeto.
A partir de cultivos en medio solido: Se apoya el ansa sobre una
colonia, luego se coloca una gota de agua sobre el portaobjeto y se
desparrama el material con el ansa..
Protocolo
2) Fijar el material
Una vez que el material esta seco, pasar
el portaobjeto sobre el mechero.
Tincion Gram
3) Cubrir el portaobjeto con
Cristal violeta
Se deja el colorante durante 20
segundos.
4) Lavar con agua
Gram + Gram
_
5) Agregar el mordiente (lugol)
(Lugol: solucion de I
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y KI). Se deja actuar el
mordiente durante 20 segundos y luego se
lava con agua.
Tincion Gram
6) Agregar el decolorante
(Decolorante: solucion de acetona y EtOH).
El agregado del decolorante produce una DESHIDRATACIN de la pared de
pptido glicano que la transforma en una barrera fsica impermeable al
solvente.
Como consecuencia se impide el lavado del cristal violeta, quedando
atrapado en el interior de las bacterias Gram +.
Gram + Gram
_
Tincion Gram
7) Agregar el colorante de
contraste (safranina)
8) Lavar con agua
Gram + Gram
_
Tincion Gram
Rosa (Gram -)
Violeta (Gram +)
Pared celular bacteriana
Estructura exclusiva de las bacterias
Funciones:
-Confiere rigidez
-Responsable de la forma celular
-Barrera contra ciertos agentes txicos
Componente bsico: Peptidoglicano
Peptidoglicano o murena
Envuelta de Grampositivos
Envuelta de Gramnegativos
Endotoxina
Lipopolisacrido (LPS)
Diferencias Grampositivos y Gramnegativos
Grampositivos Gramnegativos
No siempre presente
Naturaleza polisacardica o peptdica
Propiedades antifagocticas
Cpsula
Tincion de esporas
Endospora bacteriana: estructura bacteriana altamente resistente al calor y a
condiciones ambientales desfavorables. El principal desencadenante de la
formacon de esporas es la falta de nutrientes. Se observan en los generos
Bacillus y Clostridium (gram +).
Son altamente resistentes a:
-Calor
-Desecacion
-Acidos
-Alcali
-Desinfectantes
esporangio
exosporium
Cubierta de la espora
corteza
Nucleo (pared celular,
membrana plasmatica,
acidos nucleicos, etc...)
Clasificacion en funcion de su
posicion
Tincion de esporas
1) Preparacion del extendido y fijacion por calor.
2) Cubrir con verde de malaquita calentando
durante 3 minutos.
3) Lavar con agua.
4) Agregar colorante de contraste (safranina).
5) Lavar con agua.
Protocolo:
Tincion de esporas
Tincion de acido resistencia (Ziehl-Neelsen)
Permite distinguir bacterias del genero Mycobacterium. Estas poseen en su pared
acido micolico (hidroxilipido de cadena ramificada que se encuentra acomplejado
al peptido glicano de la pared celular.
Protocolo:
1) Preparacion del extendido y fijacion por calor.
2) Cubrir el portaobjeto con fucsina fenicada (fucsina
basica con fenol).
3) Calentar hasta emision de vapores.
4) Lavar con agua.
5) Agregar decolorante (HCl 3%, EtOH 95%).
6) Lavar con agua.
7) Agregar el colorante de contraste (Azul de metileno).
8) Lavar con agua.
Tincion de acido resistencia (Ziehl-Neelsen)
Los microorganismos se pueden teir
satisfactoriamente mediante Tincin Simple,
esto es, utilizando solo un colorante.
El valor de esta clase de tincin radica en su
simplicidad y facilidad de empleo.
El frotis, previamente fijado, se cubre con un
colorante durante el tiempo adecuado, se lava el
exceso de colorante con agua y se seca el
portaobjetos.
Los colorante es bsicos como cristal violeta, azul
de metileno y carbolfucsina se emplea con
frecuencia para determinar el tamao, la forma y
la organizacin de las bacterias.

En el primer paso de esta tincin, se tie con el colorante bsico cristal
violeta (violeta de genciana), el colorante primario. A continuacin,
se trata con una solucin yodada que acta como mordiente.

Esto es, el yodo aumenta la interaccin entre la clula y el colorante,
de forma que aquella se tie ms intensamente.

Luego se decolora el frotis lavndolo con etanol o acetona. Este paso
produce el aspecto diferencial de la tincin de Gram; las bacterias
Gram positivas retienen el cristal violeta, mientras que las Gram
negativas lo pierden y aparecen incoloras.

Finalmente, el frotis se tie de nuevo con un colorante bsico de
diferente color al cristal violeta.
La safranina es el colorante de contraste ms comn y tien las
bacterias Gram negativas de rosa o rojo, dejando a las Gram
positivas de color violeta.
La tincin de acido- alcohol resistencia es otro mtodo
importante de tincin diferencial. Unas pocas especies,
particularmente Mycobacterium no se unen fcilmente a
colorantes simples y hay que teirlas con un tratamiento
ms fuerte: calentando una mezcla de fucsina bsica y
fenol.
Una vez que la fucsina bsica ha penetrado en la cella con
la ayuda del calor y el fenol, las clulas acido-alcohol
resistentes no se decoloran fcilmente con una solucin
acidoalcohlica, permaneciendo de color rojo.
Esto se debe al elevado contenido en lpidos de las
paredes de estas clulas; en partculas, los cidos
miclicos, los responsables de la propiedad de cido-
alcohol resistencia.
Las bacterias no cido-alcohol resistentes se decoloran
con la solucin acidoalcoholico, por lo que se tien de
azul con azul de metileno (tincin de contraste).
Este mtodo se emplea para identificar Mycobacterium
tuberculosis y M.Leprae., agente patogenos
responsables de la tuberculosis y la lepra.

Uno de los mas sencillos es la tincin negativa,
tcnica que revela la presencia de cpsulas
difusa alrededor de muchas bacterias.
Se mezcla las bacterias con tinta china o colorante
de nigrosina y se extienden en una capa fina
sobre el portaobjetos.
Despus de secarlo al aire, las bacterias aparecen
como cuerpos ms claros en medio de un fondo
azul oscuro, porque la tinta y las partculas de
colorantes no pueden penetrar ni la clula
bacteriana ni su cpsula.

La extensin de la regin de luz est determinada por el
tamao de la cpsula y por la propia clula. Apenas se
produce modificacin de la forma bacteriana y la clula
se puede teir posteriormente para conseguir una mejor
visibilidad.
Las bacterias de los gneros Bacillus y Clostridium forman una
estructura de supervivencia en condiciones ambientales
desfavorables, excepcionalmente resistentes durante periodos
largos de tiempo. Esta estructura se denomina endospora pues se
desarrolla dentro de la clula. La morfologa y la localizacin de las
esdosporas varan con la especie y son a menudo de un gran valor
para la identificacin bacteriana; pueden ser esfricas a elpticas,
con un dimetro menor o superior al de la bacteria madre.
Se puede observar con el microscopio de contraste de fases o
mediante tincin negativa. Las endosporas no se tien bien o
mediante tincin negativa. Las endoporas no se tien bien con la
mayora de los colorantes, pero una vez teidos, resisten
intensamente la decoloracin. Esta propiedad es la base de la
mayora de los mtodos de Tincin de endosporas..
Con el metodo de Schaeffer-Fulton, las endosporas se
tien primero calentando las bacterias con verde
malaquita, la preparacin con agua para eliminar el resto
de colorante y se contratie con safranina. Esta tcnica
revela endosporas de color rosa a rojo

TINCION DE FLAGELOS
Los flagelos son estructuras de locomocin en forma de
hilo, tan delgados que slo se pueden observar
directamente con el microscopio electrnico.
Para observarlos con el M. optico, se aumenta su grosor
cubrindolos con mordientes, como cido tnico y
alumbre de potasio, y tindolos con pararosanilina o
fucsina bsica.
Los mtodos de tincin de flagelos ofrecen una
informacin taxonmica importante acerca de su
presencia y el modelo de su distribucin.

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Relacin Bacterias y Antibiticos
El balance del cuerpo entre la salud y la enfermedad se llama homeostasis. Que
depende de la relacin del cuerpo y las bacterias con que vive. Comnmente las
bacterias invasoras son destruidas por las clulas de sangre y por diversas
acciones del sistema inmune. Cuando hay demasiadas bacterias como para ser
manejadas por el sistema, o la persona infectada tiene una resistencia baja a la
infeccin, resulta la enfermedad y se necesitan los antibiticos para ayudar a
restaurar la homeostasis
Antibiosis
es
La relacin general entre
un
Antibitico Organismo Infeccioso
Homeostasis
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Antibiticos
Sustancias obtenidas
son
de
Bacterias u
Hongos
Sntesis
Qumicas
Empleadas en
El Tratamiento de Infecciones
Va de Administracin puede ser
su
Oral Tpica Inyectable
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Antibiticos
Actan a travs de dos mecanismos principales
Accin Bactericida
Accin Bacteristatica
Matan
microorganismos
existentes
Impide su
reproduccin
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Tcnica del antibiograma
1.-CUESTIONARIO



2.-INVESTIGAR LOS GENEROS BACTERIANOS
RESPONSABLES DE INFECCIONES:
RESPIRATORIAS
GASTROINTESTINALES
VIAS URINARIAS
SEXUALES
CUTANEAS (OJOS, PIEL )
INVESTIGAR CARACTERISTICAS GENERALES
,MORFOLOGICAS Y GRAM.