Liberacin de la grasa por disolucin de las sustancias protecas, separacin de las grasas por centrifugacin y posterior medida volumtrica en ste en el butirmetro de Gerber Reactivos y soluciones
cido sulfrico PA Alcohol iso-amlico Solucin de cido sulfrico 50%
Procedimiento Se pesan de 3 a 5 g de la muestra molida y homogeneizada en vaso del butirmetro. Se aade al butirmetro solucin de cido sulfrico 50% hasta completar vaso con la muestra. Se cierra con un tapn de goma y se coloca en bao de agua a 65C a 70C durante 20 minutos agitando el butirmetro en intervalos de 5 minutos. Despus, se aaden 1 mL de alcohol isoamlico y solucin de cido sulfrico 50% hasta marca 35 del butirmetro. Se tapa, se agita invirtindolo varias veces y se coloca nuevamente en el bao de agua durante 5 minutos a la misma temperatura. Pasado este tiempo, el butirmetro se centrfuga a 3000 rpm durante 5 minutos. Posteriormente, se coloca en el bao de agua y se mantiene en reposo durante 5 minutos. Finalmente,se lee directamente el porcentaje de grasa separada en la escala del butirmetro.
Clculos Resultados se expresan en porcentaje por lectura directa de la grasa separada en la escala del butirmetro. Diferencia entre resultados de dos determinaciones realizadas simultneamente o en rpida sucesin por el mismo analista, no ser mayor de 0.5 g de grasa por 100 g de muestra DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE GRASA LIBRE EN PRODUCTOS CRNICOS Principio Se basa en secado de la muestra, la extraccin de la grasa con solvente orgnico y el posterior secado de la grasa obtenida. Reactivos y soluciones
ter de petrleo , ter etlico Procedimiento Preparacin de ensayo Secan alrededor de 20 g de muestra a 103C por 2 horas. Pesar con exactitud 5 g de muestra seca sobre dedal de extraccin. Colocar en el extractor Soxhlet y aadir al baln, previamente tarado, cantidad de solvente proporcional a las dos terceras partes de su volumen. Determinacin Extraccin de grasa de 6 a 8 horas sobre bao de agua a temperatura de ebullicin del solvente orgnico empleado. Culminado el proceso de extraccin, sustraer dedal del extractor Soxhlet y recuperar el ter. Posteriormente se coloca el baln con la grasa en estufa durante una hora a temperatura de 103C. Enfrar en desecadora y pesar el baln con la grasa hasta peso constante, de manera que dos pesadas sucesivas no difieran ms de 0.001 g. Clculos Contenido de grasa se expresa en % m-m en base seca. Resultados se reportan hasta la centsima y la diferencia entre los resultados de dos determinaciones realizadas simultneamente o en rpida sucesin por el mismo analista no debe ser mayor de 0.5% m- m. DETERMINACIN DE GRASA EN LECHE (Mtodo Gerber) Los lpidos lcteos suministran la principal fuente de energa del alimento. La grasa lctea est compuesta en su mayor fraccin (9798%) por triacilglicridos de bajo y alto punto de fusin. El resto de la grasa est representada por diacilglicridos, monoacilglicridos y en menor proporcin fosfolpidos, glicolpidos, esteroles y cidos grasos libres. Contenido de grasa expresa la calidad y determina la clasificacin. Su composicin en cidos grasos saturados y no saturados determina la textura y las potencialidades de ocurrencia de los procesos oxidativos que la deterioran, como la liplisis y la rancidez. Principio Liberacin de la grasa por disolucin de las sustancias proteicas, separacin de la grasa por centrifugacin y posterior medida volumtrica de sta. Aplicable a leche natural, pasterizada y esterilizada. Reactivos y soluciones cido sulfrico Alcohol isoamlco
Procedimiento Colocar en el butirmetro 10 mL de cido Sulfrico . Agregar 11 mL de leche lentamente para que no se mezclen(observando separacin de ambas capas) Agregar 1 mL de Alcohol iso-amlico, cerrar el butirmetro. Agitar envuelto en un pao para evitar posibles proyecciones hasta la total disolucin de la fase proteica de la leche. Verter y dejar en reposo para observar si la disolucin ha sido completa. Llevar a centrfuga durante 5 minutos. Sacar de la centrfuga evitar mover la capa superior de grasa ya separada. Colocar en el bao de agua (65C) durante 5 minutos. Sacar y leer rpidamente. Clculos
Se lee directamente el porcentaje de grasas en la escala del butirmetro. DETERMINACIN DE GRASA DE LECHE NATURAL, CERTIFICADA, HIGIENIZADA Y PASTEURIZADA (Mtodo de Rse Gottlieb) Aplicable a leches naturales, higienizadas, certificadas y pasteurizadas, enteras y parcialmente desnatadas. Contenido en materia grasa de las leches: porcentaje en masa de las sustancias. Contenido en materia grasa se determina por extraccin de la citada materia grasa de una solucin alcohlica-amoniacal, mediante ter etlico y ter de petrleo, evaporacin de los disolventes y pesado del residuo, segn el principio del mtodo de Rse Gottlieb. Reactivos y soluciones Deben ser de calidad pura, no dejar en la evaporacin mayor cantidad de residuos que la autorizada para el ensayo en blanco. Reactivos podrn destilarse de nuevo en presencia de 1 g aprox. de mantequilla deshidratada por 100 mL de disolvente. Agua Destilada Alcohol Etlico 96% Amoniaco 25% Sulfato de Cobre penta-Hidratado Eter Etlico (exento de perxidos) Eter de Petrleo con p.eb 30C y 60C o 40 - 60C Yoduro de Potasio Solucin de Amoniaco 25% Disolvente mixto, preparado poco antes de su utilizacin, mezclar volmenes iguales de ter Etlico y Eter de Petrleo Procedimiento Preparacin de muestra Poner muestra a 20C. Mezclarla cuidadosamente hasta obtener distribucin homognea de la materia grasa. No agitar muy enrgicamente para evitar formacin de espuma en la leche o el batido de la materia grasa. Si resulta dificultoso dispersar la capa de nata, calentar lentamente hasta 35 - 40C Enfriar rpidamente la muestra hasta la temperatura ambiente. Si se separa la materia grasa lquida o se observa la presencia de partculas blancas de forma irregular adheridas a las paredes del recipiente que contiene la muestra, el anlisis no dar los resultados correctos. Ensayo en blanco Al mismo tiempo que se determina el contenido en materia grasa de la muestra, efectuar un ensayo en blanco con 10 mL de Agua Destilada, en lugar de la muestra, empleando la misma tcnica de anlisis que se utiliz para la muestra. Si el resultado del ensayo en blanco excede de 0.5 mg, habr que comprobar los reactivos, y aquel o aquellos que resulten impuros debern sustituirse o purificarse.
Determinacin Secar el matraz en estufa durante de media a una hora. Dejar enfriar matraz hasta temperatura ambiente una vez enfriado, pesarlo con una aproximacin de 0.1 mg. Invertir tres o cuatro veces el recipiente que contiene la muestra preparada y pesar inmediatamente en el aparato de extraccin directamente o por diferencia de 10 a 11 g de la muestra bien mezclada, con una aproximacin de 1 mg. Aadir 1.5 mL de disolucin de amoniaco, mezclar Aadir 10 mL de Alcohol Etlico 96 % y mezclar de modo homogneo, manteniendo abierto el aparato de extraccin. Aadir 25 mL de ter Etlico cerrar el aparato y agitarlo vigorosamente, invirtindolo varias veces, durante 1 minuto. Si es necesario, enfriar aparato con agua corriente. Quitar el tapn y aadir 25 mL de ter de Petrleo, utilizando los primeros mL para enjuagar el tapn y que los lquidos de los enjuagues penetren en el ltimo. Cerrarlo y agitarlo e invertirlo repetidamente durante 30 segundos. Dejar el aparato en reposo hasta que la capa lquida superior est completamente lmpia y claramente separada de la fase acuosa. Quitar el tapn y enjuagarlo, tambin el interior del cuello del aparato, con algunos mL de la mezcla de disolventes, dejar que los lquidos de los enjuagues penetren en el aparato. Trasvasar con cuidado al matraz, la capa superior de decantacin o con la ayuda de un sifn. Si el trasvase no se efecta mediante un sifn, tal vez sea necesario aadir un poco de Agua Destilada para elevar la separacin entre las dos capas. Enjuagar exterior e interior del cuello del aparato, o el extremo y la parte inferior del sifn, con algunos mL de la mezcla de disolventes. Hacer una segunda extraccin repitiendo las operaciones descritas, desde la adicin de ter Etlico , pero utilizando slo 15 mL de ter Etlico y 15 mL de ter de Petrleo. Efectuar una tercera extraccin procediendo como se indica anteriormente, pero omitiendo el enjuague final. Eliminar con cuidado por evaporacin o destilacin la mayor cantidad posible de disolvente. Cuando ya no subsiste el olor a disolvente, calentar el matraz, tumbado, durante una hora en la estufa. Dejar que matraz se enfre hasta la temperatura ambiente y pesar con una aproximacin de 0.1 mg. Repetir la operacin calentando a intervalos de 30 a 60 minutos hasta obtener una masa constante. Clculos La masa expresada en gramos, de la materia grasa extrada es:
m( grasa) (M1-M2)- (B1-B2)
M1 = masa, en gramos, del matraz M, que contiene la materia grasa despus de desecar hasta masa constante. M2 = masa, en gramos, del matraz M, sin materia grasa, o en caso de presencia de materias insolubles, despus de extraer completamente la materia grasa. B1 = masa, en gramos, del matraz B, del ensayo en blanco, despus de desecar hasta masa constante. B2 = masa, en gramos, del matraz B, o en le caso de presencia de materias insolubles, despus de extraer completamente la materia grasa. S = masa, en gramos, de la cantidad de muestra utilizada en la determinacin. y el contenido en materia grasa de la muestra se expresa en porcentaje en peso. La diferencia entre los resultados en dos determinaciones repetidas (resultados obtenidos simultneamente o uno inmediatamente despus de otro, por el mismo analista) no debe ser mayor de 0.03 g de materia grasa de 100g de producto. DETERMINACIN DE GRASA EN CEREALES Los lpidos representaN entre el 1 y el 4 % del grano de los cereales, encontrndose fundamentalmente en el germen. Los lpidos se encuentran en todos los tejidos del grano, generalmente como componentes de la membrana celular. Predominan los triglicridos, seguidos de los glicerofosfolpidos, los que pueden representar el 4 % de los lpidos totales, aunque tambin podemos encontrar cantidades apreciables de mono y diglicridos y cidos grasos libres. Los cidos grasos saturados constituyen el 11-26 % del total y los no saturados el 72-85%. Durante la germinacin y la respiracin o durante la molturacin del grano, las lipasas pueden dar lugar a la aparicin de nuevos cidos grasos libres, lo que conlleva a una disminucin del pH y a la aparicin de productos de oxidacin si sta tiene lugar por las condiciones ambientales favorables. La determinacin de grasas en los cereales se realiza con el objetivo de completar el conocimiento de la composicin qumica del producto. Principio Contenido en grasa bruta de un producto: parte del mismo extrable por ter etlico en condiciones determinadas. Incluye ceras, pigmentos, vitaminas, etc. Mtodo aplicable a los granos, harinas y otros productos derivados de los cereales. Procedimiento Pesar de 5 a 10 g de muestra, molida ( pase por tamiz de 500 y desecada a 100C)e introducirlos en un cartucho que se tapona con algodn. Tarar el matraz, desecado en la estufa y enfriado en el desecador. Introducir el cartucho en el extractor, aadir ter etlico, una vez conectado el matraz y proceder a extraccin, continundola hasta que el ter sea incoloro Sacar el cartucho del extractor y recuperar el ter. Llevar el matraz con el extracto y el resto del disolvente a la estufa de desecacin a 100C y tenerlo media hora. Se enfra despus en desecador y se pesa el matraz con la grasa hasta peso constante, de manera que dos pesadas sucesivas no difieran ms de 0.001 g Clculos
Calcular el contenido de grasa bruta expresado en porcentaje sobre sustancia seca. DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE FIBRA EN CONSERVAS DE FRUTAS Y VEGETALES Alimentos de origen vegetal como cereales, frutos secos, verduras, frutas y legumbres proporcionan fibra La fibra no tiene valor nutritivo ya que no se puede digerir ni absorber, pero contribuye a la asimilacin de los alimentos, a mantener sano el aparato digestivo y a eliminar los productos de desecho del cuerpo. Previene aparicin de enfermedades como el estreimiento y el cncer de colon, mejora niveles de glucosa en sangre en los diabticos y disminuye el nivel de colesterol en sangre y los riesgos de padecer la obesidad.
Los alimentos ricos en fibra insoluble son vegetales crudos, frutas con semillas comestibles como el coco, el salvado o cascarilla de los cereales y los cereales integrales como el maz, trigo, arroz y avena que no han sido trillados y conservan an su cascarilla. Constituyentes de la fibra cruda en las frutas y vegetales son celulosa, la hemicelulosa y las sustancias pcticas. Celulosa, se emplea principalmente la carboximetilcelulosa, la metilcelulosa y la hidroxipropilmetilcelulosa y la celulosa microcristalina. Pectinas desempean papel muy importante en la industrializacin de las frutas, sobre todo en lo relacionado con la elaboracin de bebidas. Se emplean en la elaboracin de jaleas, mermeladas, confituras y postres dietticos Se basa en la determinacin cuantitativa del residuo de la fibra en las paredes celulares de la fruta o vegetal, obtenido mediante la digestin de la muestra en medio cido.
Principio Procedimiento Preparacin de la muestra Productos lquidos o pastosos: Se homogeniza la muestra, con una varilla de vidrio o agitador durante 15 segundos. Productos slidos o semislidos: Se toman tres porciones en puntos diferentes de la muestra y se tritura en mortero hasta obtener mezcla homognea. Productos de fase slida y lquida: Para productos de 30 das o ms de producidos, se separa la fase lquida y se agita durante 15 segundos trabajando directamente con la misma y desechando la fase slida. Para productos de menos de 30 das de producidos, se homogeniza la muestra hacindola pasar por una licuadora, retirando previamente las semillas u otras materias que pudieran interferir. Frutas frescas: Dependiendo se pican en pequeas porciones, se muelen o se pasan por una licuadora. Frutas deshidratadas: Se muelen tres veces o se pasa por una licuadora evitando afectaciones de la muestra. Especias: Se procede de igual forma que para el caso de las frutas deshidratadas. Preparacin de la porcin de ensayo Para productos con un contenido de grasa menor a 2% se trabaja directamente con la muestra de ensayo. Para productos con un contenido de grasa superior a 2%, se procede a desgrasar la muestra de ensayo a travs del mtodo Soxhlet. Determinacin Se pesan con exactitud 5 g de muestra en el frasco erlenmeyer que se utilizar en la digestin . Se aaden 25 mL de mezcla cida, se ajusta el condensador a la boca del frasco erlenmeyer y se calienta moderadamente para evitar proyecciones Cuando comienza la ebullicin, se mantiene moderadamente durante 30 minutos. Concluido el tiempo de digestin, se enfra el frasco erlenmeyer y se filtra a travs de asbestos u otro material filtrante resistente al cido, sobre crisol de Gooch previamente tarado. Se lava el frasco erlenmeyer con solucin de cido actico y se transfieren cuidadosamente las porciones del lavado sobre el crisol filtrante. El residuo del filtrado se lava con agua caliente hasta que las aguas del lavado tengan un pH de 5. P Slava tres veces con porciones sucesivas de acetona y ter etlico. Se coloca el crisol en la estufa a 75C durante no menos de 45 minutos. Se deja enfriar en desecadora, se pesa y se repite la operacin hasta peso constante. El crisol con el residuo seco se introduce en una mufla a temperaturas entre 500 y 550C durante no menos de 4 horas. Se deja enfriar en desecadora y se pesan con exactitud las cenizas obtenidas.
DETRMINACIN DE FIBRA DIETTICA INSOLUBLE (FDI) EN CEREALES Los componentes de la fibra diettica en las capas externas de los cereales son la celulosa, la hemicelulosas, las -glucanas y las pentosanas. Celulosa es un polmero formado por unidades de D-glucosa En las harinas de trigo, las hemicelulosas solubles en agua, provocan un aumento de la absorcin del agua, y por tanto, una disminucin del tiempo de amasado, con lo que mejora el volumen del pan y su textura. En centeno, la cantidad de hemicelulosas encontrada es muy superior a la del resto de los cereales (8 %) y se sabe que tienen un papel importante en el proceso de panificacin. En la cebada, influyen en los procesos de malteado y produccin de cerveza y en la avena, donde presentan porcentajes elevados (4 6 %), forman las bases de las gomas de avena, de reciente inters por reducir los niveles de colesterol. Las -glucanas y pentosanas tienen la caracterstica de ligar agua, por lo que se les denomina, comnmente, gomas. Principio La muestra se extrae con una solucin de detergente neutro en caliente. La determinacin de las cenizas en el residuo filtrado permite conocer por diferencia, de peso, la cantidad de celulosa, hemicelulosa y lignina dela muestra.
Procedimiento Pesar, aproximadamente 1g de muestra previamante homogenizada. Agregar 100 mL de solucin de detergente neutro, Decahidronaftaleno y 0,5 g de Sulfito de Sodio Anhidro. Calentar hasta ebullicin y mantener a reflujo durante una hora. Filtrar a travs de filtro de vidrio fritado del nmero 2 (previamente calcinado a 550C) conectado a un sistema de succin por vaco. Lavar sucesivamente con unos 300 mL de Agua Destilada hirviendo. Aadir hasta sobrepasar el nivel del residuo una solucin al 2,5% de amilasa en tampn fosfato 0,1 N. Incubar a 37C durante 18 horas, aproximadamente. Filtrar la solucin enzimtica por succin a travs de un sistema de vaco y lavar el residuo con unos 80 mL de Acetona PA. Secar el filtro con el residuo a 110 C durante 8 horas, como mnimo. Enfriar en desecador y pesar. Mantener el filtro con el residuo en mufla hasta 550C durante 3 horas. Enfriar y pesar.
Clculos.
Calcular el contenido de fibra alimentaria insoluble expresado en porcentaje. Observaciones.
DETEREMINACIN DE SULFATOS EN VINAGRE Principio Precipitacin del sulfato de bario en medio cido, calcinacin del precipitado y pesaje final del residuo de incineracin.
Procedimiento A 100 mL de muestra aadir 2 mL de solucin de Acido Clorhdrico 1N, Calentar a ebullicin e ir aadiendo gota a gota 10 mL de solucin de Cloruro de Bario 1% sin que deje de hervir la solucin. Continuar hirviendo 5 minutos manteniendo el volumen constante, aadiendo Agua Destilada caliente siempre que sea necesario. Dejar en reposo hasta que el sobrenadante est claro (una noche es suficiente, aunque no conviene sobrepasar ese tiempo). Filtrar por papel sin cenizas de poro fino, lavar con Agua Destilada caliente hasta que no den reaccin con solucin de Nitrato de Plata 0,1% las aguas del lavado, secar. Calcinar, enfriar en desecador y pesar Clculos Calcular el contenido de sulfatos expresado en g de de vinagre