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Reprotoxicit

Facult de mdecine de Constantine


Cours de 1
e
anne rsidanat Toxicologie 2013-2014
Khaoula KOULOUGHLI
16/04/2014
1
Plan :
I. Introduction ;
II. Rappel physiologique ;
III. Reprotoxicit ;
IV. Evaluation de la reprotoxicit ;
V. Conclusion.
2
I. Introduction :
La reproduction humaine est l'ensemble des
processus par lesquels un homme et une
femme engendrent un nouvel individu.
Il sagit certainement dun phnomne
biologique complexe, le plus complexe de
tous, impliquant des processus divers et
hautement spcifiques.

3
II. Rappel Physiologique :
1. Systme reproducteur masculin;
2. Systme reproducteur feminin ;
3. Fcondation ;
4. Dveloppement embryonnaire.

4
II. Rappel Physiologique :
1. Systme reproducteur masculin :
Il comprend:
02 testicules ou gonades mles, double
fonction: gamtogne, se traduisant par
la production des spermatozodes ; et
endocrine, consistant en l'laboration de
diverses hormones, surtout les
andrognes.
Des voies spermatiques extra testiculaires
: pididyme, canal dfrent et canal
jaculateur.


5
II. Rappel Physiologique :
1. Systme reproducteur masculin :
Testicules :
Contiennent les tubes sminifres au sein
desquels se fait la spermatognse.

Ces tubules contiennent des cellules nourricires :
cellules de Sertoli.

Entre les tubules sminifres, se trouvent les
cellules de Leydig ; responsables de la fabrication
des hormones mles ou
andrognes(Testostrone).


6
II. Rappel Physiologique :
1. Systme reproducteur masculin :
Des glandes annexes, exocrines, dont
les produits de scrtion entrent dans
la composition du sperme.
Il s'agit de la prostate, des vsicules
sminales et des glandes de Cowper.



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1) Les vsicules sminales:
Au nombre de 02, elles scrtent un liquide alcalin ,
riche en glucides et nourrissant les spermatozodes.
2) La prostate:
Situe sous la vessie, autour de lurtre.
Scrte un liquide blanchtre responsable de la couleur
du sperme.
3) La glande de cowper:
Scrte un liquide alcalin qui enlve les traces durine
dans lurtre.
II. Rappel Physiologique :
1. Systme reproducteur masculin :
Fonction :
Spermatognse :
Formation des spermatozodes.
Se droule dans les tubules sminifres des
testicules.
Dclenche la pubert par les hormones
hypophysaires sous linfluence de lhypothalamus.
Seffectue partir des cellules souches:
spermatogonies et les spermatozoides se
fabriquent en millions/jour.
Permanente et non cyclique comme lovognse.



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II. Rappel Physiologique :
1. Systme reproducteur masculin :
Fonction :
Les spermatozodes:
Petites cellules(3 de large et 60 de long) trs
mobiles forms de 03 parties:
La tte: acrosome (sac contenant les enzymes
ncessaires la pntration dans lovocyte) + noyau.
La pice intermdiaire: trs riche en mitochondries qui
fournissent lnergie ncessaire au mouvement.
Le flagelle: organe de propulsion du spermatozoide.
la dure de vie des spermatozoides dans les voies
gnitales fminines est de 48 72 h.



9
II. Rappel Physiologique :
1. Systme reproducteur masculin :
Fonction :
Production de testostrone :
Effets :
Dveloppement des organes gnitaux.
Pulsion sexuelle.
Apparition des caractres sexuels
secondaires; Ex : voix grave; barbe, poils
sur le corps; augmentation masse
musculaire; augmentation densit des
os




10
II. Rappel Physiologique :
2. Systme reproducteur feminin :

11
II. Rappel Physiologique :
2. Systme reproducteur feminin :
A. Anatomie :
Ovaires
Glande reproductrice situe dans la cavit
pelvienne.
Produisent les ovules et les hormones fminines
(Progestrones /strognes).
la naissance, les ovaires renferment des
millions de follicules I
aires
.
la pubert, les follicules se dveloppent et
librent chacun un ovule mature par le cycle
menstruel.


12
II. Rappel Physiologique :
2. Systme reproducteur feminin :

Trompes de Fallope
02 conduits reliant, chacun, un ovaire
lutrus.
Deux rgions:
Pavillon : recueille lovule au moment de
lovulation.
Ampoule : lieu o seffectue la fcondation.



13
II. Rappel Physiologique :
2. Systme reproducteur feminin :

Utrus :
Organe creux, unique, mdian, sigeant dans le
petit bassin.
Accueillir, hberger et nourrir lovule fcond.
Vagin :
Conduit membraneux qui s'tend de la vulve au
col utrin.
Taille: 8 12 cm de long et de 2 4 cm de large.




14
II. Rappel Physiologique :
B. Fonction :
1. Ovogense :
Ovocyte : Il s'agit d'une grosse cellule sphrique, immobile,
mesurant environ 140 de diamtre en fin de phase de croissance.
Deux types d'ovocytes:
Lovocyte I ou ovocyte immature:
Le noyau est bloqu en prophase
de 1re division de la miose
et qui n'a pas de globule polaire.


Ovocyte II ou ovocyte mature :
Le noyau est bloqu en mtaphase
de 2me division de la miose
et qui possde un dans lespace
sparant la zone pellucide et l'ovocyte.
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II. Rappel Physiologique :
B. Fonction :
2. Fonction endocrine :
- Les andrognes : scrts par la thque interne
des follicules en volution .
- Les strognes: scrts par la granulosa lors
de la croissance folliculaire et par le corps jaune
aprs l'ovulation .
- La progestrone: scrte par les cellules
folliculaires en phase folliculaire et par cellules
lutales en phase lutale.
- L'inhibine: scrte par les cellules folliculaires
durant la phase folliculaire et par le corps jaune
en phase lutale.
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II. Rappel Physiologique :
B. Fonction :
2. Fonction endocrine :

Rles :

L'inhibine: inhibe la scrtion de F.S.H.

L'aromatase: transforme les andrognes en
strognes.

Le couple strognes-progestrone assure :

La prparation l'implantation (muqueuse utrine).
La menstruation (par chute de leurs taux).

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II. Rappel Physiologique :

3. Fcondation :

18
Trajet des
spermatozodes
fcondation
ovaire
Muqueuse
utrine
L'embryon va ensuite se connecter aux
vaisseaux sanguins de l'utrus (placenta) ce
qui lui permettra d'obtenir les substances
nutritives ncessaires son
dveloppement.
II. Rappel Physiologique :
B. Fonction :
3. Dveloppement embryonnaire :
1
er
mois : apparition du cur; la moelle pinire et
cerveau: 1 g / 2,5 mm ;
2
me
mois : apparition des futurs membres: 11 g / 3
cm: ftus ;
3
me
mois: diffrentiaciation des organes sexuels :
45g / 11 cm ;
4
me
mois : aspect vraiment humain: 225g / 20 cm ;
5
me
mois : 1
e
ractions auditives et tactiles;
dveloppement des poumons (non fonctionnels):
700g / 26 cm.


II. Rappel Physiologique :

20
III. Reprotoxicit

La reprotoxicit dsigne tout phnomne de
toxicit pour la reproduction, en particulier
quand elle entrane la strilit, ou la
tratognse.

21
1. Dfinitions
III. Reprotoxicit :



Un reprotoxique :

Des substances qui possdent un caractre toxique sur la
reproduction et/ou le dveloppement.
Altration des fonctions de reproduction humaine ou du
produit de la conception.
Certains perturbateurs endocriniens ayant une action sur les
hormones sexuelles ont un potentiel reprotoxique mais pas
deffet spcifique sur la reproduction ou le dveloppement.
Tous les reprotoxiques nagissent pas selon un mcanisme de
perturbation endocrinienne (1).

22
1. Dfinitions
III. Reprotoxicit :
Classification :
Catgorie 1 : T toxique, R 60 et/ou R 61 :
Substances connues pour altrer la fertilit.
Substances connues pour provoquer des effets toxiques sur le dveloppement.
Catgorie 2 : T toxique R 60 et/ou R 61 :
Substances devant tre assimiles des substances altrant la fertilit.
Substances devant tre assimiles des substances causant des effets toxiques
sur le dveloppement.
Catgorie 3 : Xn nocif R 62 et/ou R 63 :
Substances proccupantes pour la fertilit
Substances proccupantes pour lhomme en raison deffet toxique possibles sur
le dveloppement (1).
23
1. Dfinitions
III. Reprotoxicit :
Un reprotoxique :

247 substances classes reprotoxiques UE
dont 21 en cat. 1, 101 cat. 2.
95% nouvelles substances mises sur le march
ne sont pas testes pour la reprotoxicit.
Programme REACH (1).

24
1. Dfinitions
III. Reprotoxicit
25
La toxicit pour la reproduction comprend :
Laltration des fonctions de reproduction ou de la capacit
de reproduction chez lhomme ou la femme ;
Linduction deffets nfastes, mais non hrditaires, sur la
descendance.
Effets sur la fertilit masculine ou fminine:
Effets sur la libido, le comportement sexuel, les diffrents
aspects de la spermatognse ou de lovognse, ou sur
laction hormonale ou la rponse physiologique qui
perturberaient la capacit de fcondation, la fcondation
elle-mme ou le dveloppement de lovule fcond y
compris limplantation.
La toxicit pour le dveloppement dans son sens le plus large :
Y compris tout effet perturbant le dveloppement normal aussi
bien avant quaprs la naissance (comportement maternelle et
lactation) (1).
2. Effets
En rsum, les effets
reprotoxiques :

A. Effet sur la frtilit ;
B. Effet sur le dveloppement
pr et post-natal ;
C. Effet durant la lactation.
III. Reprotoxicit
A. Effet sur la fertilit :


26
2. Effets
1. Action directe 2. Action indirecte
Action sur les
organes
reproducteurs
Action sur
les glandes
endocrine.
Sur le SNA
Trois niveaux daction :


27
1. Action directe
A. Effet sur la fertilit :
2. Action sur les cellules testiculaires.
3. Action sur la vascularisation.
1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides ;

28
1. Action directe
A. Effet sur la fertilit

1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides

Les atteintes qui en rsultent peuvent tre qualitative ou
quantitative :
1. Diminution du nombre de spermatozoides:
Azoospermie: absence de spermatozoide ljaculation ;
Oligospermie : spermatozoides < 20 millions /ml.
2. spermatozoides dfectueux, moins mobiles et morts:
Tratospermie: < 50 % des spermatozoides sont normaux ;
Ncrosospermie : sprmatozoides morts ljaculation ;
Immobilit totale. des SPZ.

29
1. Action directe
A. Effet sur la fertilit

1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides

SPZ.

Mcanismes
Action sur le
mtabolisme
Raction de stress Gnotoxicit
Antimitotique.
Radiation
ionisante.
Oxyde dthylne.
Polychloro
biphnyl (PCB).
Epichlorohydrine
30
A. Effet sur la fertilit

1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides


Mcanisme : Interaction directe
des produits chimiques
gnotoxiques avec les brins ou
avec dautres macromolcules
stabilisant lADN.

Gnotoxicit
31
A. Effet sur la fertilit

1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides

1. Antimotiques :
Ces mdicaments peuvent induire une strilit transitoire ou
dfinitive chez lhomme:
La procarbazine et les alkylants ( Cyclophosphamide,
Mthotrexate) dtruisent les spermatogonies
souches A1.
Les sels de platine dtruisent les spermatocytes I et
lon observe 100 % dazoospermie durant la
chimiothrapie.

Gnotoxicit
32
A. Effet sur la fertilit
1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides

2. Radiation ionisante :
Les testicules avec la MO reprsentent les organes les plus sensibles aux
radiations ionisantes. Exposition professionnelle ou thrapeutique.
Le mcanisme :
La gnration de cassure simple et double brin de lADN dont labsence
ou les anomalies de rparation conduisent linactivation cellulaire
durant la mitose.
Effets :
Sobserve sur la ligne germinale sobserve partir dune dose de
0,1gray applique aux testicules;
On observe une oligospermie partir de 8 cG et une azoospermie 80 cG
en irradiation unique;
Les testicules sont plus sensibles une irradiation fractionne qu une
irradiation unique.
Gnotoxicit
33
A. Effet sur la fertilit
1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides

3. Oxyde dthylne :

Interaction directe avec les protamines: molcules
stabilisantes de lADN.
Une baisse du comptage et de la mobilit spermatique
a t observe chez le singe expos 50 ppm pendant
24 mois (12).

Gnotoxicit
34
A. Effet sur la fertilit
1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides

Dans un tissu comme le testicule, avec ses
taux levs de mtabolisme et de la
rplication cellulaire, le stress oxydatif peut
tre particulirement prjudiciable, ce qui
rend la capacit antioxydante du tissu trs
importante (9).

Raction de stress
35
A. Effet sur la fertilit
1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides

Ces radicaux peuvent tre gnrs pendant le
mtabolisme oxydatif de divers composs:

1. PCB (PolyChloroBiphnyles):
Effets cytotoxiques directs par lintermdiaire des
ions superoxydes librs par les PN => altration de
la morphologie; mobilit; numration des SPZ et de
leur pouvoir fcondant.

Raction de stress
36
A. Effet sur la fertilit
1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides

2. Alcool et tabac :
Consommation excessive d'alcool ou
de la cigarette entraine une
augmentation de la production de
radicaux libres dans tous les tissus et
ont plusieurs reprises t associe
l'infertilit masculine ou des
conditions qui contribuent cette
infertilit (9).
Raction de stress
37
A. Effet sur la fertilit
1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides

La principale forme nergtique utilise par les
sprmatozoides est ladnosine Triphosphate (ATP).
La qualit de la mobilit des spermatozoides reflte la
qualit de la production mitochondriale dATP.
EX: Epichlorhydrine :
Exemple d'un compos qui semble affecter la mobilit
des spermatozodes par interfrence avec le
mtabolisme.


Action sur le
mtabolisme
3. Action sur la vascularisation.
Trois niveaux daction :


38
1. Action directe
A. Effet sur la fertilit :
2. Action sur les cellules testiculaires.
1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides ;

39
A. Effet sur la fertilit
2. Action sur les cellules testiculaires
1. Action sur les cellules de Sertoli
2. Action sur les cellules de Leydig
40
A. Effet sur la fertilit



Phtalates: perte de contact intercellulaire entre les
cellules germinales et les cellules de Sertoli: atrophie
testiculaire et dgnrescence des tubes sminifres.

2. Action sur les cellules testiculaires
1. Action sur les cellules de Sertoli
41
A. Effet sur la fertilit

Busulfan :
Interfre avec la synthse des andrognes produits par les
cellule de leydig.
Altration de la spermatognse et endommagement des
cellules de Sertoli.

2. Action sur les cellules testiculaires
2. Action sur les cellules de Leydig
3. Action sur la vascularisation.
Trois niveaux daction :


42
1. Action directe
A. Effet sur la fertilit :
2. Action sur les cellules testiculaires.
1. Action sur le spermatognse et les sprmatozoides ;

Cadmium: une exposition excessive a t implique
dans linfertilit associe la varicocle.

Anomalies de la spermatognse en raison de:
Probable augmentation de la T locale.
Hypoxie relative du testicule en raison de la stase
veineuse.


43
1. Action directe
A. Effet sur la fertilit :
3. Action sur la vascularisation


Avant la pubert, les ovocytes sont plus rsistants aux toxiques
en raison de leur tat de quiescence.
Ex:
Les radiations ionisantes: responsables de la destruction de la
rserve ovarienne en follicules insuffisance ovarienne
mnopause prcoce ( +/- court terme).

44
1. Action directe
A. Effet sur la fertilit :
45
2. Action indirecte
A. Effet sur la fertilit :
Action sur
les glandes
endocrines
Action sur
le SNA
1. Alcool :
Chez la femme: La consommation modre peut conduire
Irrgularits menstruelles et une infertilit, absence de scrtion
LH.
Plus rcemment, une augmentation temporaire des taux
dstradiol et testostrone a t mise en vidence.
Lalcoolisme chronique chez la femme se manifeste par une srie
de troubles de la reproduction: irrgularit des cycles voire arrt
complet des menstruations, avec strilit/mnopse prcoce.
Chez lhomme: certaines tudes montrent un baisse du taux de
testostrone.
46
2. Action indirecte
A. Effet sur la fertilit :
Action sur les
glandes endocrines
2. Perturbateurs endocriniens (Xnstrognes):
Substances chimiques dorigine naturelle ou synthtique ;
susceptibles dagir de nombreux niveaux des axes hormonaux
naturels , par des mcanismes molculaires variables en mimant
et/ou en bloquant les R dune hormone / liaison sa prot
transporteuse ou / blocage des R.

Consquences:
Perturbation de la maturation sexuelle et du dveloppement des
organes reproducteurs.
Malformation des gonades.
Cancers hormono-dpendants.


47
2. Action indirecte
A. Effet sur la fertilit :
2. La leuprorline: est un nanopeptide de synthse analogue agoniste
de la Gn-RH naturelle.
Indication: pour le traitement du cancer de la prostate hormono-
dpendant un stade avanc.

Mcanisme daction:
1er temps : augmentation de la production de la testostrone.
2me temps : ladministration prolonge entraine une inhibition de
la scrtion gonadotrope (diminution de la scrtion de LH)
Supprimant par consquent, les fonctions testiculaires chez
lhomme: (atrophie testiculaire, douleur testiculaire, strilit).
Chez la femme, latrophie de lendomtre utrin est un effet li la
diminution de sensibilit du R la GN-RH, qui provoque une
diminution de LH et FSH qui est lorigine dun hypogonadisme.
48
2. Action indirecte
A. Effet sur la fertilit :
Action sur SNA
B. Effet sur le dveloppement pr
et post-natal :

49
B1- Avortement
B3- Tratognse
B2- Cancrogense
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal

Une conception sur deux se termine par un avortement (2).
10-15% des grossesse se terminent par une fausse couche.
Taux maximal de ltalit : entre 0J-14J.
Priode pr-implantatoire et la diffrentiation cellulaire nest pas
encore ralise.
Sous laction dun toxique loeuf peut mourir et tre expuls.

Pb: est ftotoxique et peut tre responsable de mort in utro, de
prmaturit ou de troubles de dveloppement crbral.

Chez le rat, lactinomycine administre la femelle gestante ds la
fcondation a une action abortive mais non tratogne, par contre
administr aprs limplantation entre le 7 et 9me jour ,elle se
montre tratogne (Le type de malformation dpend strictement
de la priode dadministration).


50
B1- Avortement
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal


Lapparition dune volution cancreuse
chez le jeune suppose une anomalie trs
prcoce du DNA et doit avoir un rapport
intra-utrin. (post natal) ?

51
B2- Cancrogense
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal
L'embryognse: 13me au 58me jour de grossesse.
C'est la priode de morphognse ou organogense (seule la
formation de l'appareil gnital externe et la maturation du
systme nerveux central dbordent le 58me jour).
C'est une priode critique : c'est ce moment que les
xnobiotiques peuvent provoquer des malformations, c'est--
dire une tratognse (14).
Les malformations qui en rsultent peuvent tre irreversibles,
viables ou ltales (2).
Tout les organes, ne sont pas sensibles au meme moment de
la grossesse.
Leffet tratogne varie en fonction de lintensit et la dure
dexposition (2).

52
B3- Tratognse

53
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal
54
B2- Tratognse

55
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal
Mcanisme :

1. interfrence avec lADN ;
2. Diminution de lapport denergie et dosmolarit ;
3. Inhibition enzymatique ;
4. Autres modes dactions.
56
B3- Tratognse
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal
Mcanisme :
1. interfrence avec lADN :
De nombreux agents tratognes interfrent pendant la
rplication, la transcription des acides nucliques ou durant la
translation de lARN.
Ex: les agents alkylants (Chlorambucil), les agents dintercalation
(Ethidium).
Certaines de ces molcules sont actives par elle-mme, dautres
ncessitent une bioactivation comme les aflatoxines et la
thalidomide.

57
B3- Tratognse
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal
Mcanisme daction de la thalidomide :

La thalidomide induit la formation de radicaux libres qui
perturberaient lquilibre complexe des facteurs
paracrines de transcription impliqus dans la
diffrenciation du membre : exacerbation de lapoptose.

58
B3- Tratognse
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal
Mcanisme :
2. Diminution de lapport denergie et dosmolarit :
Certains tratognes peuvent modifier lapport dnergie ncessaire au
mtabolisme gnral en diminuant la disponibilit des substrats, soit
directement (carence alimentaires), soit par la prsence danalogues ou
dantagonistes des vitamines ou des acide amins essentiels.

Une hypoxie ou des molcules induisant cette hypoxie (CO,CO
2
) peuvent
aussi tre tratogne par modification des voies mtaboliques de lO
2

indispensable ou par production de dsquilibres osmotiques, ces
phnomnes provoquent des dmes et des hmatomes qui seront
cause de distorsion et dischmie tissulaire.

59
B3- Tratognse
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal
Mcanisme :
3. Inibition enzymatique :
5-fluoro uracile peut provoquer des malformations par
interfrence avec la croissance et la diffrenciation du fait de
linhibition de la thymidylate synthtase.
6-amino nicotinamide inhibiteur de la glucose-6-P
deshydrognase.

60
B3- Tratognse
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal
Acide valproique :
Par inhibition des actylase des
histones.
Le syndrome dexposition lacide
valproque associe des anomales
craniofaciales mineures et ,le cas
chant, des anomalies viscrales
svres (spina bifida ++).
61
B3- Tratognse
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal
L'aspirine et les anti-inflammatoires non-
strodiens (AINS) sont contre-indiqus ds le 6
me

mois de la grossesse.
Par leur effet inhibiteur de la COX, Ils peuvent
entraner une fermeture partielle du canal artriel
du ftus (un vaisseau important pour la circulation
ftale).
62
B3- Tratognse
B. Effet sur le dveloppement pr et post-natal
Mcanisme :
Autres modes daction :
Lhypervitaminose A peut tre associ des lsions
ultrastructurales des membrane cellulaires de lembryon chez les
rongeurs.
Ce mcanisme pourrait expliquer le caractre tratogne de la Vit
A.
Des agents physiques comme les radiations, hypo/hyperthermie,
les traumatismes dorigine mcanique peuvent aussi tre
responsables de malformations structurales.


63
B2- Tratognse
C. Effet duarant la lactation :

Diffrentes substances sont excrtes dans le
lait maternel:
Nicotine, dioxine; plomb ; mdicaments:
tolune ; AVK, perchlorthylne.
Mais leur consquences sur lenfant allait et
sur lallaitement sont mal connues.
64
1. Exprimentale :
A. In vivo ;
B. In vitro.
2. Diagnostic :
A. Strilit masculine ;
B. Strilit fminine ;
C. Diagnostic pr-natal.
65
IV. Evaluation
Les autorits sanitaires ont mis en place des
rglementations spcifiques.
Rglementation REACH pour les substances
chimiques. Utilise les protocoles de lOCDE.
ICH pour les substances mdicamenteuses pour
se conformer lensemble des requetes
internationales en matire dvaluation de la
toxicologie de la reproductionet du
developpement (ICH 5S (R2)).
66
IV. Evaluation 1. Exprimentale
In vivo
LD OCDE 414 : tude de toxicit pour le dveloppement pr-natal :
But : valuer les proprits toxiques vis-vis du developpement prnatal
de la substance teste, cd les effets sur la mre, les pertes pr- ou
postimplantatoire, la mortalit foetale, les anomalies structurelles ou les
altrations de la croissance du foetus.
Animaux dexprience:
Les animaux prfrs sont le rat et le lapin.
Trois groupes (trois doses) de traitement et un groupe tmoin (vhicule).
Voie dadministration : Oralement par intubation.
Programme exprimentaux :
Administration a des femelles gravides en priode dorganogense : de
limplantation jusqu la veille du sacrifice. On sacrifie habituellement un
jour avant la parturition. Les foetus sont extraits par csarienne.
Nombre des animaux : On doit choisir un nombre suffisant danimaux par
groupe, afin dautopsier environ 20 femelles.


67
IV. Evaluation 1. Exprimentale
In vivo
Observations :
Pendant ltude : signe de toxicit, poid corporel,
consommation de nourriture.
Examen terminal de la mre : autopsie, valuation
macroscopique de tous les organes, particulirement
lutrus (poids de lutrus gravide, nombre de corps
jaunes) et le placenta.
Examen terminal du foetus vivant et mort (poids,
sexe, malformations, anomalies du squelette et des
tissus mous).
Rapport et donnes : les rsulats seront valus
selon les effet observs chez le foetus et la mre et
en fonctions de lincidence et a svrit des effet.
68
IV. Evaluation 1. Exprimentale
In vivo
LD OCDE 415 : tude de toxicit de la reproduction sur une gnration:
But :
Evaluer les effets dune substance teste sur les performances de
reproduction des mles et des femelles, telles que la fonction gnitale,
le cycle oestral, comportement lors de lacouplement, la conception, la
gestation, la parturition, la lactation et le sevrage.
Animaux dexprience :
Au moins une espce, gnralement le rat.
Il est conseill dutiliser un nombre suffisant danimaux afin dobtenir au
moins 20 femelles gravides.
Programmes exprimentaux :
Application en phase de gamtogense, avant laccouplement : 3
semaines pour les rats femelles et 10 semaines pour les rats mles.
Le traitement se poursuit pendant laccouplement, puis jusquau sevrage
des nouveaux ns femelles. Les mles seront sacrifis aprs
laccouplement et les femelles aprs sevrage.

69
IV. Evaluation 1. Exprimentale
In vivo
Observation :
Pendant ltude : on observe les signes de toxicit, mortalit,
comportement pendant la gestation, poids corporel, consommation de
la nourriture, dure de la gestation, parturition.
Aprs la naissance : mortalit la naissance, nombre et sexe des petits,
poid la naissance, puis 4jours, puis chaque semaine jusqu la fin de
ltude, developpement physique, malformation ou anomalie, fonctions
sensorielles et rflexes.
Examen terminal : examens macroscopiques des adultes et des
nouveaux ns, examens histologiques des organes de la reproduction
des adultes, isolement des autres organes pour des examens
histologiques eventuels.
Rapport et donnes :
On value les rsultats en fonction des effets, des doses auxquelles on
observe des effets. Doit fournir une estimatimation satisfaisante dune
dose sans effets, et value les effets nocifs sur la reproduction. 70
IV. Evaluation 1. Exprimentale
In vivo
LD OCDE 416 : tude de toxicit de la reproduction sur deux gnrations :
But : evaluer leffet dune substance sur lintgrit et le fonctionnement des
appareils reproducteurs mmes et femelles, ainsi que la croissance et le
dveloppement de la dscendance.
Animaux :
Au moins une espce, gnralement le rat.
Il est conseill dutiliser un nombre suffisant danimaux afin dobtenir au moins
20 femelles gravides.
Trois groupes danimaux et un groupe tmoins.
Programmes exprimentaux :
Substance administre au cours de la gamtogense avant laccouplement :
durant plusieurs cycle oestraux et un cycle de spermatigense pour les mles
(70 jours chez le rat, 56 jours chez la souris).
Les parents gnration P continuent a tre trats pendant la priode de
laccouplement, de gravidit, et jusquau sevrage des nouveaux ns.
Aprs sevrage les nouveaux ns gnration F1 sont eux aussi trats puis
accoupls entre eux (la procdure est identique).
71
IV. Evaluation 1. Exprimentale
In vivo
Observation :
Pendant ltude :
Signes de toxicit, mortalit, poids corporel, comportement pendant la
gestation, dure de la gestation, consommation de la nourriture, parturition.
Aprs la naissance :
Mortalit la naissance, nombre et sexe des nouveaux ns, poids la
naissance et au jour 4, puis chaque semaine jusqu la fin de lallaitement,
developpement physique, malformation et anomalies, activit rflexe, fonction
sensorielle, etc.
Examen terminal :
Examen macroscopique des adultes et des nouveaux ns, pese des organes de
la reproduction des et (P, F1), pese du cerveau rate thysmusdes peitis (P,
F1) destins lautopsie.
Examens histologiques des organes de la reproduction.
Rapport et donnes :
Les seront valus en fonctions des effets observs, des doses auxquelles on
observe les effets. Permettent de dfinir la dose sans effets.
72
IV. Evaluation 1. Exprimentale
In vivo
LD OCDE 421 : essais de dpistage pour la toxicit pour
la reproduction et le dveloppement :

But :
Obtenir une premire srie dinformations sur les effets
possibles dune substance sur les performances de la
reproduction chez le mle et la femelle.
Elle ne remplace pas les LD 414, 415, 416.

73
IV. Evaluation 1. Exprimentale
In vivo
ICH :
Segment I effets sur la fertilit
But : dterminer leffet dun produit administr avant, pendant
accouplement (femelles et males) et jusqu limplantation de luf
dans lutrus, sur le comportement sexuel et la fertilit.

Segment II dveloppement embryonnaire
But : dterminer leffet dun produit administr des femelles
gestantes pendant la priode dorganogense.

Segment III dveloppement pr et post natal
But : produit administr aux femelles gestantes pendant
lorganognes et pendant la lactation, voir si il y a des effet
indsirables sur la gestation, la parturition, la lactation et la fertilit
des jeunes.

74
IV. Evaluation 1. Exprimentale
In vivo

Culture cellulaire :
Cellules de Sertoli et cellules Leydig germinales pour
valuer la toxicit testiculaire
Ovocytes.

Culture de tissu :
Cultures dovaire: tudes des scrtions ovariennes.
75
IV. Evaluation 1. Exprimentale
In
vitro
Intrrogatoire :

Antcdents : infertilit, anomalies de migration
testiculaire, TRT hormonaux (andrognes,
strognes) ou chirurgicaux (hernie,
varicocle).
Profession et habitudes alimentaires (s/ ,
suralimentation, thylisme) et comportement
sexuel.

76
IV. Evaluation 2. Diagnostic
A. Strilit
masculine
Examen clinique :

Etat
gnral/vasculaire/neurologique/mtabolique/n
utritionnel/endocrinien.
Examen de l'appareil gnital : prcise l'tat des
testicules (sige, volume, consistance) et du
scrotum.



77
IV. Evaluation 2. Diagnostic
A. Strilit
masculine
1. Spermogramme : affirme une strilit.
2. Test de pntration croise : permet :
Apprcier la capacit de migration des SPZ dans les
voies gnitales fminines.
Observer in vitro le comportement (pntration et
survie) du sperme du sujet dans la glaire cervicale
de sa femme et dans une glaire tmoin et celui d'un
sperme tmoin dans la glaire de la femme.
3. Dosages : par radio immunologie de :FSH
/Testostrone/Prolactinmie / test au LH-RH.
4. Biopsie testiculaire : est un geste dangereux.
5. Dfrentographie: localise l'obstacle au niveau des
canaux jaculateurs, ou dans le canal inguinal. 78
IV. Evaluation 2. Diagnostic
A. Strilit
masculine
Classification
L'infcondit primaire (femme n'ayant jamais eu de
gestation )
L'infcondit secondaire : dsigne le fait d'avoir dj eu
une grossesse.

L'interrogatoire :
L'anciennet de l'infcondit du couple ;
La contraception utilise ;
Notion de prise de mdicaments ;
Les problmes professionnels.




79
IV. Evaluation 2. Diagnostic
B. Strilit
fminine
Examen Physique :
L'examen de l'appareil gnital par le toucher vaginal ;
L'examen des seins avec mise en vidence d'une
galactorrhe ;
La vrification de la glaire cervicale ;
L'ouverture du col.
Examen biologique :
Les dosages hormonaux :
FSH, LH, stradiol et andrognes au 2
me
j du cycle.
Progestrone et prolactine au 22e jour.
LHystrosalpingographie
Cet examen permet d'analyser l'anatomie de l'appareil
gnital interne.
Dtecter les anomalies constitutionnelles ou acquises.

80
IV. Evaluation 2. Diagnostic
B. Strilit
fminine
Echographie obsttricale :
Cest une technique dimagerie employant des ultrasons mis par une sonde; renvoys
par le ftus et analyss par systme informatique les traduisant en images.
1
er
trimestre :
Dtermination de la vitalit de la grossesse.
Dpistage prcoce de certaines malformations.
Localisation de la grossesse en reprant luf afin de sassurer de sa situation intra-
utrine.
Dtermination du nombre dembryons.
Ralisation dune biomtrie pour une datation prcise de la grossesse.
2
me
trimestre:
Dpistage des malformations ftales.
Contrle du bon dveloppement ftal.
3
me
trimestre:
Apprciation de la croissance et du bien-tre du ftus.
Etude de la morphologie ftale.


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IV. Evaluation 2. Diagnostic
C. Pr-natal

Les tudes de la toxicit de la reproduction font partie
des tudes rglementaires demandes, dans le dossier
dAMM.

Les diffrents types dtude segment I, II, et III couvrent
les domaines de fertilit, gestation, lactation et
permettent ainsi un maximum de scurit pour le
passage aux tudes chez lhomme et la
commercialisation de nouveaux mdicaments.


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V. Conclusion
BIBLIOGRAPHIE :
(1) Gaelle Rivire. De la conception la grossesse, les substance
reprotoxique. La semaine sant scurit au travail. 2009
(2) Alain viala, Alain Botta. Toxicologie. 2
e
dition.
(3) FrancK Lu. Toxicologie Gnrale 1991.
(4) 14. Amine Belmouden. Mdicament et grossesse. Esprance
Mdicale Octobre 2011, Tome 18, N 182.
(5) Stadler J, Lafon D. Reprotoxicit rglementaire : REACH et ICH.
EMC Volume 7, Octobre 2012.
(6) 17. Manuel MARK, interactions gntiques et pigntique des
substances tratognes. Institut dEmbryologie Institut de
Gntique et de Biologie Molculaire et Cellulaire Hpital
Universitaire de Strasbourg.
(7) INRS, fiche toxicologique de loxyde dthylne.
(8) 9. TERRY T et al. Oxidative Stress: A Common Factor in Testicular
Dysfunction. Journal of Andrology, Vol. 29, No. 5,
September/October 2008.
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