Preparo de Amostras UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA GRUPO DE PESQUISA EM QUMICA ANALTICA INSTITUTO DE QUMICA Misso da qumica analtica Propor os meios para a determinao da composio qumica dos materiais A seqncia analtica Definio do problema Escolha do mtodo Amostragem Pr-tratamento da amostra Medida Calibrao Avaliao Ao
- Qual a informao analtica necessria?
- Amostragem: adequada?
- Qual mtodo de anlise fornecer a informao?
- PREPARO: converter a amostra em forma adequada para anlise.
- Calibrao: obteno com padres adequados.
- Medio: obteno de dados da amostra.
- Avaliao: resultado obtido confivel?
SEQUNCIA ANALTICA Definio do problema Determinao de elementos em baixas concentraes em diferentes amostras Avaliao dos teores de mercrio em guas e sedimentos Nveis tpicos de Hg em amostras ambientais Ar Chuva Oceano aberto gua costeira
Sedimentos marinhos Solos contaminados 1 - 4 ng m 3
5 - 100 ng l -1
0,5 - 3 ng l -1
2 -15 ng l -1
< 100 ng g -1 50 -100 g g -1
Rios e lagos 1 - 3 ng l -1 Sedimentos e solos < 700 ng g -1 fjkrug@cena.usp.br A seqncia analtica Definio do problema Escolha do mtodo Amostragem Pr-tratamento da amostra Medida Calibrao Avaliao Ao Limites de deteco tpicos para as principais tcnicas espectroanalticas Figura adaptada de http://www.perkinelmer.com/ FAAS ICP-OES Radial ICP-OES Axial HGAAS GFAAS ICP-MS 100 10 1 0,1 0,01 0,001 Limites de deteco (g / L) 0,0001 1000 FAAS ICP-OES Radial ICP-OES Axial HGAAS GFAAS ICP-MS 100 10 1 0,1 0,01 0,001 Limites de deteco (g / L) 0,0001 1000 FAAS ICP-OES Radial ICP-OES Axial HGAAS GFAAS ICP-MS 100 10 1 0,1 0,01 0,001 Limites de deteco (g / L) 0,0001 1000 ESTRATGIAS ANALTICAS PARA A DETERMINAO DE METAIS E AMETAIS EM MAMFEROS AQUTICOS AMOSTRAGEM
ESCOLHA DA TCNICA PR-TRATAMENTO
DETERMINAO
CONTROLE DE QUALIDADE - BRANCOS - REPLICATAS - MATERIAL DE REFERNCIA CERTIFICADO
TRATAMENTO/INTERPRETAO DOS DADOS
(Skoog et al., 2006; Krug,2006) TRATAMENTOS PRELIMINARES
DECOMPOSIO DA AMOSTRA ETAPAS DA ANLISE AMOSTRAGEM ESCOLHA DAS ESPCIES/TECIDOS
CONDIO DA CARCAA
MATERIAL UTILIZADO E LOCAL DE COLETA
ACONDICIONAMENTO DAS AMOSTRAS
PROFISSIONAL QUALIFICADO
(Geraci& Lounsburry,1993; OShea,1999) PROCESSO DE COLETAR UMA PEQUENA MASSA DE UM MATERIAL CUJA COMPOSIO REPRESENTE TODO O MATERIAL QUE EST SENDO AMOSTRADO. (Skoog et al, 2006) AMOSTRAGEM
ANIMAIS SELVAGENS
ENCALHES CONDIO DA CARCAA
LOCAL DE COLETA INADEQUADO TRANSPORTE P/ LABORATRIO
DIFICULDADES Pr-tratamento da amostra
oportuno observar que, entre todas as operaes analticas, a etapa de pr-tratamento das amostras a mais crtica. Em geral, nesta etapa que se cometem mais erros e que se gasta mais tempo.
tambm a etapa de maior custo.
Tempo gasto na anlise qumica Preparo da amostra 61% Amostragem 6% Anlise 6% Tratamento dos dados 27% http://www.sampleprep.duq.edu/dir/why_sp_2.html Adaptado de Ronald E. Major An overview of sample preparation, LC-GC,vol 9, n1, 1991. A importncia do preparo de amostras nos mtodos analticos Mxima 60,6% Nenhum a 1,6% Mnima 6,8% Moderada 31,0% http://www.sampleprep.duq.edu/dir/why_sp_1.html Adaptado de Ronald E. Major An overview of sample preparation, LC-GC,vol 9, n1, 1991. Preparo da Amostra Os procedimentos de preparo de amostras dependem da natureza da amostra, dos analitos a serem determinados e sua concentrao, do mtodo de anlise e da preciso e exatido desejadas. DECOPOSIO POR VIA SECA ??? DECOMPOSIO POR VIA MIDA ??? DILUIO ??? ANLISE DIRETA ??? EXTRAO ??? AMOSTRA REAGENTES ENERGIA Rompimento das ligaes/ destruio da estrutura cristalina Reagentes complementares SOLUO ANALITOS Prof. Dr. Celso Spinola- UFBa Tratamentos Preliminares Amostra Lavagem Secagem Moagem Peneiramento Refrigerao Agitao mecnica Polimento Procedimentos Fsicos Tratamentos Preliminares Lavagem Normalmente utilizada para poucos materiais, como partes de vegetais como razes, folhas e frutos. Procedimento: soluo detergente neutra (01-3% v/v) + gua desionizada O procedimento deve ser rpido
Ateno!!! Pode haver perdas de elementos por lixiviao Tratamentos Preliminares Secagem A secagem a peso constante comum para amostras slidas que apresentam gua em quantidade varivel e em forma no determinada.
Solos, rochas, minrios e sedimentos
Materiais biolgicos
Minerais (aluminatos, silicatos)
105 C
60 65 C (estufa com circulao forada de ar)
> 1000 C
Ateno!!!
Vegetais secagem em sacos de papel ou algodo em estufa com circulao de ar por 48h ou at peso constante.
- ESTUFA COM CIRCULAO FORADA DE AR (60-65 C)
- MICROONDAS DOMSTICO
- LIOFILIZAO (remoo de gua de uma amostra por sublimao a vcuo)
Tratamentos Preliminares Secagem Tratamentos Preliminares Moagem Melhora a homogeneidade da amostra Ocorre basicamente pelo choque entre a amostra e o material que compe o moinho, logo uma grande fonte de contaminao Pode ser promovida por esmagamento entre duas superfcies, frico contra uma superfcie e alterao e fragilizao da estrutura Pode ser classificada como: grosseira, que empregada como uma pr-moagem (5 mm); fina (63 m) e extra- fina (< 63 m) Tratamentos Preliminares Moagem extra-fina Moagem grosseira Liquidificador Processador Moinho de facas Moagem fina Moinho de disco Almofariz e pistilo Moinho de bolas Moinho vibracional Moinho de jato de ar Moinho criognico Moinhos mecnicos perdas de elementos volteis devido ao aquecimento da amostra Tratamentos Preliminares Moagem criognica
Amostra Congelada em N 2 (-196 C) ou acetona (-78 C) para aumentar a dureza e provocar falhas na estrutura Facilita a cominuio Utilizado para materiais com baixo ponto de fuso que possam obstruir outros equipamentos (ex: gorduras e graxas duras), partes de plantas resistentes e elsticas, substncias sensveis oxidao (ex: vitamina A e carotenos), substncias que podem perder seu aroma (ex: caf e pimenta) e tambm hormnios, pinicilinas e semelhantes Precaues Dureza 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Mineral Talco
Gypsum
Calcita
Fluor-spar
Apatita
Feldspato
Quartzo
Topzio
Corundum
Diamante
Equipamentos desgastados propiciam maiores riscos A resistncia abraso do material do equipamento deve ser sempre maior que o grau de dureza do material da amostra Os minerais em geral apresentam alto grau de dureza Tratamentos Preliminares Separao de componentes de amostras slidas Extrao de espcies inorgnicas em amostras slidas inorgnicas (p.e. solos). Lixiviao de compostos de elementos metlicos solveis presentes em slidos inorgnicos
Filtrao Materiais em suspenso podem entupir irreversivelmente nebulizadores pneumticos utilizados em espectrometria atmica Decomposio e solubilizao de amostras A grande maioria das tcnicas analticas usadas para determinao de elementos em amostras orgnicas e inorgnicas, requer que a amostra esteja na forma de uma soluo aquosa. As amostras na forma de solues so mais versteis que na forma de slidos; As curvas analticas de calibrao podem ser feitas com solues-padro de fcil preparao; Diluies so simples; Separaes de constituintes com ou sem pr-concentrao so possveis. Parmetros para a escolha do mtodo de decomposio: Amostra propriamente dita Elementos ou compostos a serem determinados Faixas de concentrao Tipo, composio, e homogeneidade das amostras analticas Quantidade de amostra disponvel para anlise Quantidade de amostra necessria para as determinaes Requisitos especiais: local da anlise, controle na produo Escolha do mtodo de pr-tratamento depende de vrias consideraes:
Soluo obtida deve ser compatvel com o mtodo de determinao Exigncias metrolgicas
Aspectos restritivos
Calibraes exigidas (balana, temperatura, pipetas, bales volumtricos) Homogeneidade = f(massa de amostra, analitos) Repetibilidade e reprodutibilidade, acurcia, seletividade e limite de deteco Custo Tempo disponvel Espao fsico Competncia do analista Tcnicas Convencionais Via mida
cidos ou misturas de cidos, agentes oxidantes
Via seca (Combusto mineralizao)
Incinerao presso atmosfrica Incinerao vcuo Fuso
PREPARAO DE AMOSTRAS VIA MIDA VIA SECA Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos Abertura ou decomposio significa converter a amostra em uma outra forma slida com transformao qumica. A nova forma facilmente solvel em soluo aquosa. Ex.: fuso de uma amostra de silicato insolvel com Na 2 CO 3 at a formao de um produto claro que se solidifica aps esfriar, sendo prontamente dissolvido com soluo de cido ntrico diludo. Dissoluo ou solubilizao significa que a amostra slida, lquida ou gasosa dissolvida em lquidos adequados a baixas temperaturas. Pode ou no ocorrer uma reao qumica. Dissoluo x Abertura Mineralizao e Decomposio da Matria Orgnica Amostras orgnicas ou de natureza mista sofrem dois processos distintos de ataque, que muitas vezes acontecem simultaneamente: mineralizao e dissoluo.
Mineralizao Destruio da mat. orgnica Dissoluo Dissoluo da mat. inorgnica Um procedimento IDEAL para dissoluo de amostras deve ser: Capaz de dissolver a amostra completamente, sem deixar nenhum resduo. Razoavelmente rpido para ser executado Os reagentes utilizados no devero interferir na determinao do analito e/ou na separao dos constituintes de interesse. Os reagentes devero estar disponveis em alto grau de pureza para no contaminar as amostras. As perdas por volatilizao, por adsoro e/ou absoro ou por quaisquer outras razes devero ser desprezveis; Tanto os reagentes como a amostra no devero atacar o recipiente onde ser feita a reao; As contaminaes devidas ao ambiente devero ser desprezveis; O procedimento deve apresentar o mnimo de insalubridade e periculosidade; A soluo final dever conter todos os analitos de interesse. Decomposio e solubilizao de amostras Fora do cido; Ponto de ebulio; Poder oxidante do cido e/ou de um de seus produtos de decomposio; Poder complexante com respeito aos ons de interesse; Solubilidade dos sais correspondentes; Grau de pureza e/ou facilidade de purificao; Aspectos relacionados segurana durante a manipulao.
cidos Minerais PONTO DE EBULIO PRESSO ATMOSFRICA cido Concentrao P.E. (C) HCl 37% (m/v) 110 HF 49% (m/v) 108 HNO 3 70% (m/v) 120 gua-rgia (HCl:HNO 3 3:1) v/v 112 H 2 SO 4 98,3% (m/v) 338 H 3 PO 4 85% (m/v) 150 Os cidos minerais mais comuns so: HCl, HNO 3 , H 2 SO 4 , HClO 4 e HF Decomposio e solubilizao de amostras Classificao dos cidos na decomposio de amostras por via mida No oxidantes
HCl HF H3PO4 H2SO4 diludo HClO4 diludo Oxidantes
HNO 3
HClO 4 conc. a quente H 2 SO 4 conc. a quente
Decomposio e solubilizao de amostras cido ntrico - HNO 3
o cido mais usado na decomposio da matria orgnica
ORG + HNO 3 NO x + CO 2 + H 2 O
Entra em ebulio 120C, o que facilita sua remoo aps a oxidao, mas limita a sua eficcia
Em sistemas abertos, no oxidante suficientemente forte para mineralizar completamente o material orgnico Decomposio e solubilizao de amostras cido sulfrico H 2 SO 4
Possui elevado ponto de ebulio (mx. 339C), o que aumenta a eficcia da decomposio, mas dificulta a sua remoo;
Possui a desvantagem de formar compostos insolveis com alguns metais: CaSO 4 (pouco solvel), BaSO 4 , SrSO 4 e PbSO 4 ;
Sua viscosidade pode causar interferncias em algumas tcnicas de deteco (e.g. ICP, ETAAS) cido clordrico HCl
Ponto de ebulio de 110C
Carter no oxidante
Dissolve sais de cidos fracos (carbonatos, fosfatos); a maioria dos metais solvel com exceo de AgCl, Hg 2 Cl 2 e TiCl
Cloretos volteis: As(III), Sb(III), Ge(IV), Se (IV), Hg(II), Sn(IV) Decomposio e solubilizao de amostras cido perclrico HClO 4
Utilizado com conhecimento e ateno, este reagente extremamente eficiente na destruio da matria orgnica.
Do ponto de vista tcnico, a mistura HNO 3 e HClO 4 a que possui menos desvantagens.
Mas devido a ocorrncia de ocasionais exploses, aconselhvel evitar o seu uso. Decomposio e solubilizao de amostras Algumas regras na manipulao: Nunca use cido mais concentrado que 72%; Nunca deixe que o cido concentrado a quente entre em contato direto com materiais facilmente oxidveis; No utilize capelas de exausto com superfcies expostas construdas com material orgnico no recomendado (p.e. madeira); No armazene o cido com frascos contendo tampas de borracha; Lave o papel de filtro com bastante gua aps seu uso com cido perclrico; Lave com gua os locais onde o cido possa ter entrado em contato. Decomposio e solubilizao de amostras As misturas de cidos so muito utilizadas porque:
Diferentes propriedades teis podem ser combinadas (um cido com poder complexante com um cido oxidante):
Dois cidos podem reagir formando produtos com maior reatividade que qualquer um deles empregado isoladamente:
gua rgia (HNO 3 :HCl, 1:3)
Uma propriedade indesejvel em um cido pode ser moderada pela presena de um segundo cido: HNO 3 + HClO 4
A amostra pode ser dissolvida com um cido, o qual separado da mistura por um outro cido que o substitui (HF + HClO 4 , HF + H 2 SO 4 ). Misturas de cidos minerais Decomposio e solubilizao de amostras Utilizados para melhorar a eficincia da dissoluo com um ou mais cidos minerais:
Agentes oxidantes:
H 2 O 2 , Br 2 , KClO 3 + HCl
Eletrlitos inertes so adicionados para aumentar o ponto de ebulio do cido, resultando numa maior temperatura final para a dissoluo (adio de Na 2 SO 4 , K 2 SO 4 ou (NH 3 ) 2 SO 4 ao H 2 SO 4 ).
Agentes complexantes mantm os analitos em soluo, evitando a precipitao (cido tartrico, ctrico e ltico combinados com o HNO 3 para dissolver ligas).
Catalisadores aumentam a velocidade de dissoluo com cidos (Cu 2+ , Hg 2+ ). Misturas de cidos com outros reagentes Perxido de hidrognio H 2 O 2
Misturas de cidos com perxido de hidrognio so particularmente eficientes na oxidao da matria orgnica. A gua o nico produto de decomposio presente. encontrado com alto grau de pureza. Combinado com o poder de desidratao do cido sulfrico, esse tipo de reao rapidamente degrada a matria orgnica a espcies menores, que volatilizam facilmente. Tcnicas de Dissoluo mais usadas VIA MIDA Convencional (sistema aberto/fechado) Forno de microondas (sistema focalizado/com cavidade) VIA SECA Decomposio por fuso Cimento Aluminatos Silicatos Minrios de Ti e Zr Minrios mistos de Be, Si, Al Resduos insolveis de minrio de ferro xidos de cromo, silcio e ferro xido mistos de tungstnio, silcio e alumnio
Utilizado para material inorgnico de difcil dissoluo, como: Decomposio por fuso 1. A amostra finamente moda misturada intimamente com um eletrlito cido ou bsico Fundentes: Na 2 CO 3 (p.f. 851C), NaOH (p.f. 318C), Na 2 O 2 , KHSO 4 , etc.) 2. A proporo entre a massa de amostra e do eletrlito (fundente) pode variar de 1:2 a 1:50 3. A mistura geralmente colocada em um cadinho de nquel ou platina 4. O cadinho aquecido por um perodo de tempo suficientemente adequado para que a amostra fique totalmente dissolvida na soluo fundida, resultando em um lquido bem claro. 5. O material se solidifica quando resfriado a temperatura ambiente, sendo quebrado e transferido para um copo 6. Se a fuso for bem sucedida o material ser facilmente solvel em gua ou cido diludo. Procedimento geral: Decomposio por combusto (Dry ashing) A temperatura conveniente para pirlise da matria orgnica encontra-se freqentemente entre 450-550C. A calcinao em mufla baseia-se na queima da frao orgnica da amostra com o oxignio do ar, obtendo-se um resduo inorgnico solvel em cido diludo. Procedimentos recomendados pela AOAC para determinao de minerais em alimentos. .
Calcinao em mufla Decomposio por combusto (Dry ashing) Fornos tipo mufla Decomposio por combusto (Dry ashing) Possibilidade de tratar grande quantidade de amostra, sendo a relao massa de amostra/volume final muito flexvel. Vantagens: A cinza resultante livre de matria orgnica o que desejvel para algumas tcnicas analticas. As cinzas podem ser dissolvidas em meio compatvel com o mtodo de determinao, sendo necessrio uma pequena quantidade de cido. Caracteriza-se pela simplicidade e baixo custo Decomposio por combusto (Dry ashing) Requer um longo tempo para calcinao (> 12 h). Limitaes: Perdas da amostra como um aerossol slido e/ou perda parcial ou total de vrios elementos por volatilizao (Hg, As, Se). Podem existir perdas devido a reteno de elementos-trao nas paredes do recipiente, ou atravs de combinaes com constituintes das cinzas.
Alto risco de contaminao. Difcil dissoluo de algumas cinzas. 0 nenhuma perda + 2 a 5% de perda ++ 6 a 20% de perda +++ >20% de perda
Procedimento analtico para amostras de plantas *
Pesar em cadinho de platina 1-3 g de amostra seca. Levar mufla e elevar progressivamente a temperatura at atingir 450 C em 4 horas. Manter a essa temperatura por 16 horas. Aps o resfriamento, adicionar 2 mL de gua deionizada, 3 mL de HNO 3
e 2 mL de HF. Evaporar lentamente at a secura em banho de areia ou placa de aquecimento. Repetir duas vezes o ltimo passo adicionando 2 mL de HNO 3 e 1 mL de HF. Dissolver o resduo com 2 mL de HNO 3 , aguardar 15 min, adicionar 20 mL deionizada e aquecer at suave ebulio Aps resfriamento, transferir para um balo volumtrico e aferir.
* Mtodo do Comit Inter-Instituts dEtude des Techniques Analytiques
Aplicao Tcnica: ICP OES Tratamento das amostras: incinerao em mulfla a 450C por 24h e digesto cida em bloco. 1 Determinao de Al, Ba, Ca, Co, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Ni, P e Zn em caf cru Morgano et al. Cienc. Tecnol. Aliment. 2002, 22(1), 19-23. Na calcinao: 1 g de amostra de caf cru modo Dissoluo das cinzas em HCl conc. Na digesto (12h): 1 g de amostra de caf cru modo + 10 mL HNO 3 conc. + 3 mL H 2 O 2 30% (v/v). Resultados: o procedimento por via seca apresentou maior repetibilidade e exatido.
Placa Aquecedora Banho Maria Bloco Digestor Chama (bico de Bunsen) SISTEMA ABERTO Decomposio por via mida (wet methods) Decomposio por via mida (wet methods) Baseiam-se no aquecimento da amostra na presena de um cido mineral oxidante geralmente concentrado. A decomposio pode ser realizada presso atmosfrica ou em recipiente fechado (bomba de decomposio PTFE clssica , microondas fechado). Utilizam diferentes fontes de energia: trmica (placa de aquecimento, bloco digestor), ultra-snica e radiante (infravermelho, ultravioleta e microondas) Nos mtodos modernos de decomposio por via mida, vrias combinaes e propores de cidos fortes garantem tanto a mineralizao quanto a dissoluo da amostra. Trs deles contribuem especialmente para a destruio da matria orgnica: HNO 3 , H 2 SO 4 , HClO 4
Correntes convectivas . . . . . . Aquecimento por conduo Temperatura da superfcie externa superior ao P.E. bomba digestor Kjeldahl bloco Aquecimento condutivo chapa Decomposio por via mida (wet methods) Forno de microondas com cavidade Forno de microondas focalizadas Sistema assistido por microondas Decomposio por via mida (wet methods) Decomposio por via mida (materiais biolgicos) 100 500 mg Moagem Digesto com 5-10 ml HNO 3
Digesto a frio durante 12 h recomendvel Requer digesto complementar com HClO 4 (1-2 ml) Digestes durante 3-12 h (depende da matriz) Baixo custo de instrumentao Alta freqncia analtica (40-100 amostras/digesto) Filme Decomposio por via mida (mat. biolgicos) Requer combinaes: HClO 4 , H 2 SO 4 , H 2 O 2
Gerao de resduos (solues cidas) Vapores corrosivos de NO 2 (capelas e tratamento dos gases)
Digestes podem demorar 5 dias (depende da matriz) H riscos de perdas por volatilizao: Hg (como elemento) As, B, Cr, Pb, Sn, Zn (como compostos halogenados) Notas sobre a decomposio de materiais biolgicos com HNO 3 e H 2 SO 4 em sistemas abertos A mxima temperatura do meio de decomposio limitada pelo ponto de ebulio do azetropo HNO 3 /gua (ca 120C).
H 2 SO 4 pode ser usado para aumentar a temperatura da decomposio, mas h desvantagens: difcil purificar o cido Interfere em muito mtodos devido alta viscosidade Forma sulfatos de baixa solubilidade com muitos elementos (e.g. Cd, Pb, Sr, Ba), prejudicando a exatido dos resultados
Alto consumo de cidos, leva a altos valores de brancos.
As temperaturas atingidas so bem menores do que as necessrias na via seca, diminuindo, assim, perda por volatilizao so minimizadas.
Perdas por reteno nas paredes dos recipientes so menos freqentes.
As reaes dos elementos traos com constituintes da amostra so limitadas.
Decomposio por via mida (wet methods) Vantagens: Pode ocorrer co-precipitao de alguns elementos com um elemento principal da matriz. Por exemplo, Ca precipitar com CaSO 4 , se for utilizado H 2 SO 4 .
A presena de cloretos pode levar a perda de alguns elementos por volatizao (e.g. As)
A dissoluo incompleta um risco maior na via mida devido escolha inadequada de reagentes ou um inapropriado programa de aquecimento (temperatura x tempo). Decomposio por via mida (wet methods) Limitaes: 1 - Use of Doehlert design for optimizing the digestion of beans for multi-element determination by inductively coupled plasma optical emission spectrometry
Wagna Piler Carvalho dos Santos 1,2 , Diogenes Ribeiro Gramacho 1 , Alete Paixo Teixeira 1 , Antnio Celso Spnola Costa 1 , Maria das Graas Andrade Korn 1 *
1 Ncleo de Excelncia em Qumica Analtica (NQA-PRONEX), Grupo de Pesquisa em Qumica Analtica, Instituto de Qumica, Universidade Federal da Bahia, Campus de Ondina, 40170-290 Salvador, Bahia, Brazil. 2 Centro Federal de Educao Tecnolgica da Bahia, Barbalho, 40.300-010, Salvador-Bahia
Aplicao Santos, W., Tese de Doutorado, 2007 1 - Determinao de elementos essenciais (Ca, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Ni, P, Zn) e no-essenciais (Al, Ba, Cd, Pb) em leguminosas de gro
Tcnica: ICP OES
Tratamento das amostras: digesto cida em chapa aquecedora por 20 minutos a 120 0 C Na digesto (20 min): 0,5 g de amostra de feijo modo + 7 mL HNO 3 conc. + 1 mL H 2 O 2 30% (v/v). Resultados: o procedimento por via mida apresentou boa repetibilidade e exatido. Decomposio por via mida com sistemas fechados Comparando-se com os sistemas abertos, tem-se as seguintes vantagens:
No h perda por volatilizao Menor tempo de reao (3 a 10 vezes) Melhor decomposio devido a maior presso e temperatura atingidas. O branco reduzido devido a menor quantidade de reagentes Nenhuma contaminao por fontes externas. Decomposio por via mida com sistemas fechados Pode ser realizada utilizando-se:
Bomba de decomposio PTFE clssica
Microondas com recipiente Teflon, PFA ou TFM baixa presso (at 1,5 MPa)
Sistema a alta presso (at 15 MPa) com recipiente de TFM, PFA ou quartzo. Decomposio por via mida com sistemas fechados Bomba de decomposio PTFE clssica Aquecidas em estufa ou mufla at 200C Presso: 0,1 a 30 MPa Amostra: 0,1 a 5 g
Bomba de decomposio PTFE Volumes disponveis: 23 ml, 45 ml e 125 ml Avaliao da contaminao ambiental por metais em lagostas (Spiny lobster) no litoral norte do Estado da Bahia
Aplicao Adriana Oliveira, Alete Paixo, Gabriel Luiz dos Santos, Joilma Menezes, Joo David Neto, Ludmila Manhaes, Maria Andra da Silva, Sidney Santana, Suzana Ms Rosa,Vitria Soares. Objetivo
Avaliar os impactos ambientais das atividades industriais no litoral norte do estado da Bahia, atravs da determinao de metais em amostras de sedimento e lagostas da espcie (Spiny lobster) coletados em estaes prximas a emissrios localizados na rea de estudo.
Objetivos Especficos
Identificar e quantificar metais (Al, As, Cd, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb, Se, Sr, V e Zn) em amostras de sedimento, msculo e vsceras de lagostas.
Obter dados preliminares sobre a contaminao por poluentes qumicos na regio utilizando sedimento como indicador ambiental e lagostas da espcie (Spiny lobster) como bioindicador. Avaliao da contaminao ambiental por metais em lagostas (Spiny lobster) no litoral norte do Estado da Bahia
EFLUENTES LANADOS ATRAVS DE EMISSRIOS
+
FALTA DE MONITORAMENTO
LAGOSTAS + SEDIMENTO: INDICADORES
JUSTIFICATIVAS VSCERAS MSCULO PR-TRATAMENTO LAVAGEM SEPARAO DE VISCERAS MOAGEM PENEIRAMENTO PR-TRATAMENTO DIGESTO DE AMOSTRAS 0.20g de AMOSTRA + 2 mL HNO3 + 2mL GUA MILLIQ 14 HORAS
120 C DETERMINAO DE METAIS ICP OES 0,20 g Digesto em bomba parr 14h = 120 C Diluio para 15 mL Determinao de metais ICP OES Tratamento e interpretao dos dados * Tempo de liofilizao varivel at completa sublimao Liofilizao* moagem Peneira (300 m) DESCRIO RESUMIDA DAS ETAPAS DAS ANLISES CONCLUSES - GRANDE VARIABILIDADE ENTRE METAIS EM CADA ESTAO
- AMOSTRAGEM INADEQUADA DE VSCERAS
- FALTA DE LIMITES ESTABELECIDOS PARA OUTROS ELEMENTOS IMPORTANTES NA LEGISLAO
- NECESSIDADE DE ESTUDOS LEVANDO EM CONSIDERAO TODA O ECOSSISTEMA DA REGIO
Emprego de bombas de digesto 2 ml HNO 3 conc + H 2 O 2
Temperatura: ?
250 mg de amostra
+ Emprego de bombas de digesto Emprego de bombas de digesto Emprego de bombas de digesto Decomposio por via mida com Microondas Ultraviolet Infrared Microwave V i s i b l e
Inner-shell eletrons Espectro Electromagntico Principais componentes de um forno de microondas Magnetron: gerador de microondas Guia de ondas: canal metlico, paredes refletoras, levam as microondas at a cavidade Cavidade: espao interno do forno onde so colocadas as amostras (paredes feitas de material refletores de MW) Prato giratrio: assegurar homogeneidade do aquecimento Espalhador de microondas: distribuir uniformemente a radiao que sai do guia de ondas Sistema de ventilao Interao Radiao Microondas e Matria Materiais transparentes energia microondas - no so aquecidos. Condutor Isolante Dieltrico Metais refletem energia microondas e no aquecem. Reflexo Transparncia Materiais absorvem energia microondas - aquecimento. Absoro . . . . . . Aquecimento assistido por radiao microondas Reprinted with premission from Neas, E.; Collins, M. in Introduction to Microwave Sample Preparation:Theory and Practice, copyright 1988 by The American Chemical Society. Sample-acid mixture (absorbs microwave energy) Localized superheating Vessel wall (transparent to microwave energy) Microwave heating Lquidos (cidos e solventes) so rapidamente aquecidos quando expostos radiao microondas. Absoro ocorre principalmente por dois mecanismos: - ROTAO DE DIPOLOS - CONDUO INICA Como materiais so aquecidos? Rotao de dipolos Depende da presena de molculas polares. Normalmente, molculas polares esto orientadas ao acaso; contudo, em presena de um campo eletromagntico as molculas so alinhadas. Quando o campo oscila e a polaridade do campo eletromagntico varia em uma velocidade estabelecida pela freqncia, as molculas tentam seguir a mudana do campo, causando atrito e, conseqentemente, aquecendo o material. Aquecimento Assistido por Radiao Microondas Liner, sleeve and frame transparent to MW energy Sample-acid mixture absorbs MW energy
Vapor is not heated by microwave Localized superheating
Microwave-assisted heating Aspectos Positivos da Tecnologia Microondas Aquecimento volumtrico: energia rapida/e transferida para o material sendo aquecido. Economia de energia: perdas de calor por irradiao, conduo e conveco so reduzidas (at 70%). Tamanho de equipamento reduzido em at 20%. Controle instantneo do processo: incio e parada rpidas. Aspectos Positivos da Tecnologia Microondas Transferncia de energia limpa: usualmente via algum efeito de polarizao no prprio material. Temperaturas elevadas. Controle de reaes qumicas: acelerao de processos qumicos e reaes sem solventes.
Aspectos Negativos da Tecnologia Microondas Complexidade da rea: difcil previso da natureza exata da interao entre o campo eletromagntico e a matria. Uniformidade de temperatura: profundidade de penetrao da radiao. Medida de temperatura: a natureza pontual da maior parte dos procedimentos de medida de temperatura e a no uniformidade do aquecimento pode gerar dados incorretos.
Aspectos Negativos da Tecnologia Microondas
Custo de implementao: geral/e maior do que estratgias convencionais de aquecimento. Tamanho do magnetron e ciclo de trabalho. R & D: Novas aplicaes geral/e exigem desenvolvimento e compreenso do comportamento da amostra. Isso implica que implementao imediata invivel.
Decomposio por via mida com Microondas Microondas no focalizado Frascos Fechados Por-que? Anlise de Traos Eliminao do uso de cido sulfrico Digesto usando somente cido ntrico Menor consumo de reagentes Menores brancos analticos Menor custo de reagentes com alta pureza Evita perdas de analitos que podem gerar compostos alta/e volteis Proteo do ambiente (vapores cidos; menor volume de resduos cidos)
Controle direto de temperatura Monitoramento e controle direto para um frasco de referncia at 300C com termopar ou fibra ptica Temperatura medida 20 vezes por segundo Sensor inserido em tubo cermico inerte
Controle de temperatura em todos frascos (contact-less) Sensor focalizado de IR Controle seqencial de temperatura em todos frascos Perfil de variao de temperatura para cada frasco Aspectos Positivos do Forno de Microondas com Cavidade Possibilidade de atingir temperatura de trabalho > que P.E. dos reagentes (P interna ) o que implica em processos de digesto mais rpidos e maior poder oxidante. Digesto simultnea de um grande nmero de amostras (6-50). Menor possibilidade de perdas e contaminao (frascos fechados).
Aspectos Positivos do Forno de Microondas com Cavidade Menor consumo de reagentes, resultando em menores brancos analticos e digeridos menos concentrados em cidos. Menor gerao de resduos. Qumica limpa: reduo de vapores desprendidos para o ambiente. Controle da distribuio da radiao microondas durante o processo de digesto aperfeioa a repetibilidade. Aspectos Positivos do Forno de Microondas com Cavidade Possibidade de usar reagentes com alta pureza, e.g. HNO 3 e H 2 O 2 , sem perda de eficincia devido aos baixos P.E.. Possibilidade de trabalhar com solues diludas de cido ntrico. Aspectos Negativos do Forno de Microondas com Cavidade Segurana: presso. Segurana: riscos de exploso devido gerao de H 2 durante a digesto de ligas e metais. Limitada massa de amostra. Limitaes de temperatura e presso devidos aos materiais dos frascos. Segurana: necessidade de trabalhar com amostras similares na maioria dos programas de aquecimento, i.e. amostras com teores similares de gua e compostos orgnicos. Aspectos Negativos do Forno de Microondas com Cavidade Limitaes prticas para adicionar reagentes durante a digesto. Necessidade de aguardar um longo tempo para abertura dos frascos aps a digesto. Baixa reprodutibilidade ao empregar diferentes equipamentos ou frascos mesmo para equipamentos e frascos produzidos por um mesmo fabricante, mas de diferentes lotes. Decomposio por via mida com Microondas Microondas focalizado Forno de Microondas com Radiao Focalizada Adequado para massas de amostra elevadas Adio automtica de reagentes (ou amostras) Presso atmosfrica (segurana) Temperaturas elevadas (uso de cido sulfrico) Mltiplos procedimentos simultneos
Forno de Microondas com Radiao Focalizada:
Aplicaes Tpicas Massas de amostra elevadas (> 1 g) Amostras orgnicas gerao de gases Requer mltiplas adies de reagentes Requer variaes de temperatura Requer cido sulfrico para atingir altas temperaturas Procedimentos de extrao sob baixas temperaturas Aplicao Tcnica: ICP OES Tratamento das amostras: digesto com HNO 3 conc. e H 2 O 2 30% (v/v) 5 Determinao de nutrientes minerais e elementos txicos em cafs solveis Santos e Oliveira. Food Compos. Anal. 2001, 14, 523-531. 1 g de amostra de caf 6 ml de NHO 3 a 65% (v/v) 0,5 mL de H 2 O 2 a 30 % (v/v) Nmero de amostras = 21 Resultados: Recuperaes quantitativas (84-102%) foram obtidas para Na, K, Mg, Al, P, S, Ca, Mn, Fe, Ni, Cu, Zn, Cd, Sb, Pb, Cr e Sn. Somente uma amostra com 0,520,02 mg/kg de Cr estava acima do limite estabelecido pela Legislao Brasileira para alimentos. Aplicao Tcnica: ICP OES Tratamento das amostras: extrao aquosa e digesto em forno de microondas fechado. 6 Determinao de Ca, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Na, Pb, S, Se, Si, Sn e Zn em cafs brasileiros com o objetivo de caracterizao quanto a regio geogrfica e modo de produo. Fernandes et al. Spectrochim. Acta Part B. 2005, 60, 717-724. Extrao: 1,0 g de amostra + 10 mL de gua fervente, centrifugar e acidificar o sobrenadante com HNO 3 (0,014 mol L -1 ). Digesto: 0,25 g de caf + 3 mL de HNO 3 conc. + 1 mL de H 2 O 2 , em MW ( 700 W/15min). Resultados: Foi possvel correlacionar a concentrao dos elementos com o modo de produo (orgnico ou convencional). Aspectos Positivos do Forno de Microondas com Radiao Focalizada Digesto de massas elevadas de amostra (at 10 g) especial/e para amostras com alto teor de compostos orgnicos que geram elevados volumes de gases. Adio programada de reagentes. Segurana presso ambiente. No h uma longa etapa de resfriamento e reduo de presso aps a digesto. Aspectos Positivos do Forno de Microondas com Radiao Focalizada Uso de frascos construdos com diferentes materiais (PTFE, vidro borossilicato e quartzo). Possibilidade de implementar diferentes programas de aquecimento para diferentes amostras em cada frasco de digesto. Variedade de aplicaes: extrao de orgnicos, extrao para especiao qumica, digesto cida ou alcalina para determinao de teores totais. Aspectos Positivos do Forno de Microondas com Radiao Focalizada Trabalho sob elevadas temperaturas utilizando-se cido sulfrico. Remoo de vapores (para sistemas operando presso atmosfrica) aumento do rendimento reacional (Princpio de Le Chatelier) Segurana para processos reacionais sob baixa presso. Possibilidade de combinao com outras fontes de energia (e.g. ultrassom) para acelerar o processo de digesto. Aspectos Negativos do Forno de Microondas com Radiao Focalizada Elevada acidez dos digeridos pode dificultar a determinao de elementos por tcnicas que envolvem a introduo de amostra por nebulizao pneumtica (requer elevada diluio). Elevados volumes de reagentes podem gerar brancos analticos altos e grande produo de resduos. Heterogeneidade de distribuio da radiao microondas: implica em diferentes condies em cada frasco reacional, o que afeta a eficincia de digesto (baixa repetibilidade). Aspectos Negativos do Forno de Microondas com Radiao Focalizada Uso de cido sulfrico (mximo P.E.) para aumento de temperatura em sistemas operando presso ambiente: a elevada viscosidade do cido sulfrico pode interferir no transporte de amostra e determinaes dos analitos por tcnicas como ICP OES e ICP-MS. Alm disso, sulfatos insolveis podem ser formados. Limitada freqncia analtica: 1 a 6 amostras, enquanto que no forno de microondas com cavidade pode-se processar at 80 amostras simultanea/e. Concluses O melhor procedimento para decomposio aquele que resulte em alta porcentagem de recuperao, requer reduzido volume de reagentes, menor tempo de anlise e pequeno potencial de contaminao
O mtodo de combusto, para a maioria dos metais, fornece resultados exatos; mas requer um tempo maior do que o necessrio para anlises por via mida, especialmente aquelas utilizando sistema fechado ou microondas Concluses Para alguns elementos a extrao cida, sem dissoluo completa da amostra, suficiente para uma determinao quantitativa O mtodo de digesto utilizando microondas tem se mostrado bastante promissor, obtendo-se alta recuperao, um tempo de digesto bastante curto e baixa contaminao OBRIGADA!!!!