Familiarizarnos con los materiales y equipos

empleados en el laboratorio de
Microbiologa, su importancia, la utilidad
que prestan, y el cuidado que debe
proporcionrseles para su buen
funcionamiento.
Desarrollar el concepto de esterilizacin.
Conocer los fundamentos de los diferentes
mtodos de esterilizacin aplicados en el
laboratorio de microbiologa.
Aprender a aplicar el mtodo de
esterilizacin

LA ESTERILIZACIN
Esta operacin comprende todos los
procedimientos fsicos, mecnicos y qumicos,
que se emplean para destruir, inactivar o
retener grmenes en general y patgenos en
particular. A travs de esta, los materiales de
laboratorio alcanzan un estado de desinfeccin
que evita la contaminacin operatoria.

Calor
La utilizacin de este mtodo y su eficacia depende de
dos factores: el tiempo de exposicin y la temperatura.
Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto
grado, a la accin del calor. El calor provoca
desnaturalizacin de protenas, fusin y desorganizacin
de las membranas y/o procesos oxidantes irreversibles en
los microorganismos.
Fuego Directo: Este procedimiento consiste en exponer a
la llama de un mechero de Bunsen el objeto que se
desea esterilizar. Cuando ste es de metal se deja
permanecer en el rea de reduccin de la llama hasta
que se ponga al rojo (asas de cultivo; algunas agujas, etc)
. Si es de vidrio se deja un tiempo prudencial, procurando
que la llama llegue a todos lados. Antes de utilizar el
objeto esterilizado es necesario dejarlo enfriar en un sitio
asptico. Este procedimiento tiene limitaciones debido a
que deteriora los objetos y si son de gran volumen, la
esterilizacin nunca es perfecta.

El calor seco produce desecacin de la clula, esto
es txico por niveles elevados de electrolitos y fusin
de membranas, residuos que quedan adheridos al
objeto estril. Estos efectos se deben a la
transferencia de calor desde los materiales a los
microorganismos que estn en contacto con stos.
An as se sigue utilizando el calor seco en todos los
laboratorios para la esterilizacin de placas de petri
y pipeteros (recipientes metlicos para alojar pipetas
para la siembra de sustancias lquidas).
La accin destructiva del calor sobre protenas y
lpidos componentes o nutrientes de los
microorganismos, requiere mayor temperatura
cuando el material est seco o la actividad de agua
del medio es baja.

Estufas: Para esterilizar por intermedio del aire caliente es
necesario colocar los objetos en aparatos especiales llamados
estufas. Y llevar el aire interior a una temperatura entre 150 y 190
C.
Calor Hmedo: El calor hmedo produce desnaturalizacin y
coagulacin de protenas. Estos efectos se deben principalmente
a dos razones:
*El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras
biolgicas son producidas por reacciones que eliminan agua.
*El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor
mucho ms elevado que el aire.
Autoclave: Se realiza la esterilizacin por el vapor de agua a
presin. El modelo ms usado es el de Chamberland. Esteriliza a
120 a una atmsfera de presin (estas condiciones pueden
variar) y se deja el material durante 20 a 30 minutos.
Filtracin: Este procedimiento es aplicable a la esterilizacin de
lquidos y gases, especialmente los primeros. Cuando el lquido a
filtrar no puede resistir, sin descomponerse, la accin del calor, se
aplica la tcnica de filtracin, la que puede efectuarse mediante
presin o aspiracin.
Se basa en el pasaje de lquidos a travs de sustancias porosas que
detienen a los microbios. La filtracin se utiliza para emulsiones
oleosas o soluciones termolbiles. Su usa para esterilizar aceites,
algunos tipos de pomadas, soluciones oftlmicas, soluciones
intravenosas, drogas diagnsticas, radio frmacos, medios para
cultivos celulares, y soluciones de antibiticos y vitaminas.



Estos mtodos provocan la perdida de
viabilidad de los microorganismos.
En comparacin con los procedimientos
fsicos, estos mtodos tienen una
importancia secundaria. Los antispticos
son considerados venenos
protoplasmticos que, al actuar sobre los
grmenes, los destruyen.
Este mtodo es ptimo para la antisepsia
de las manos del operador, de locales, de
mesas de trabajo, de jaulas de animales, y
para destruir grmenes que puedan caer
en lugares de trabajo.

Su accin depende de:
El tipo de radiacin
El tiempo de exposicin
La dosis

Radiaciones Ionizantes: Producen iones y radicales
libres que alteran las bases de los cidos nucleicos,
estructuras proteicas y lipdicas, y componentes
esenciales para la viabilidad de los microorganismos.
Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para
esterilizar materiales termolbiles (termo sensibles)
como jeringas descartables, sondas, etc. Se utilizan a
escala industrial por sus costos.

Rayos Ultravioleta: Afectan a las molculas de DNA
de los microorganismos. Son escasamente
penetrantes y se utilizan para superficies, se utilizan
para la esterilizacin en quirfanos.

Rayos Gamma: Su empleo esta basado en los
conocimientos sobre la energa atmica. Este tipo de
esterilizacin se aplica a productos o materiales
termolbiles y de gran importancia en el campo
industrial. Puede esterilizar antibiticos, vacunas,
alimentos, etc.

Envolturas para la esterilizacin de
algunos materiales de laboratorio: tubos
de ensayo, placa petri,. Pipetas, cuchilla
para licuadora, tijeras y pinzas.

Nos familiarizamos con los materiales y
equipos empleados en el laboratorio de
Microbiologa, a la vez aprendimos su
importancia, la utilidad que prestan, y el
cuidado que debe proporcionrseles para
su buen funcionamiento.
Desarrollamos el concepto de
esterilizacin.
Conocimos los fundamentos de los
diferentes mtodos de esterilizacin
aplicados en el laboratorio de
microbiologa.
Aplicamos el mtodo de esterilizacin

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Anlisis Cualitativo. Moeller, Therald.
1961. Beta, Buenos Aires.
Anlisis Cualitativo. Ray Brumbley. 1988.