DAO O LESIN EN EL ADN

Un dao o lesin en el ADN puede darse por

diferentes vas, el hecho de que se d o exista
un dao en el ADN, aun no implica mutacin,
pues hay mecanismos de reparacin que
corrigen dichos daos y que solo si todos
estos mecanismos fallan habr una mutacin
propiamente dicha.

La ADN polimerasa puede incorporar
bases equivocadas en la replicacin
Errores en la replicacin o
recombinacin provocan fracturas en el
ADN



Por errores en la replicacin del
DNA





Por ataques metablicos espontneos


Ataques Nucleofilicos

Dao oxidativo: metabolismo aerbico, radicales
superoxido O2, perxido de hidrogeno H
2
O
2
e
hidroxilo OH.

Metilaciones descontroladas

Producen
Prdida de bases tipo purinas por ruptura
espontnea del enlace con el azcar
5000/da/clula humana
Deaminacin espontnea de citosinas y adeninas
produce uracilo e hipoxantina
Molculas con oxgenos reactivos atacan los
anillos de las bases nitrogenadas
Estos ataques espontneos producen
despurinaciones y desaminaciones

Dao por agentes qumicos
externos: CARCINGENOS

Grupos electrfilos que reaccionan con O y N
Modifican las bases nitrogenadas
Pro-carcingenos: su metabolismo en el
organismo mediante el citocromo P450 los
transforma en carcingenos.
Qumicos ambientales como agentes alquilantes
y otras sustancias qumicas forman aductos con
las bases del ADN: hidrocarburos, productos
naturales como las aflatoxinas


Anlogos de bases
nitrogenadas










Por agentes fsicos: radiaciones


Radiaciones ionizantes: rayos gamma y rayos
X causan rupturas en la doble hlice

Luz UV causa la formacin de los dmeros de
timina







La radiacin UV produce dmeros de timina

La luz UV une de forma covalente dos residuos de timina
adyacentes en una hebra cadena de DNA, formando ciclobutano
Los dmeros de timina producen una distorsin local del DNA
Con menos frecuencia se pueden formar otros dmeros de
pirimidinas
T-T > T-C, C-T > C-C
La radiacin UV produce dmeros de timina
Fig 5-48 .- Biologa Molecular de la Clula 4 ed., Alberts y col.
La luz UV une de forma
covalente dos residuos de
timina adyacentes en una hebra
cadena de DNA, formando
ciclobutano
Con menos frecuencia se
pueden formar otros dmeros de
pirimidinas
T-T > T-C, C-T > C-C
Los dmeros de timina
producen una distorsin local
del DNA
UNA MISMA LESIN POR
DIFERENTES VIAS


La perdida de una base se puede dar
por cidos (agente qumico) por calor
(agente fsico) o de manera espontnea.
La diferencia fundamental radica en la
masividad de cada una de ellas por las
diferentes vas.

LESIN DEL DNA CAUSA
PRDIDA DE UNA BASE ELIMINACIN DE PURINAS POR CIDOS Y CALOR (EN EL
GENOMA HUMANO, HIDRLISIS ESPONTNEA DE 10.000
ENLACES GLUCOSDICOS /DA )
BASE ALTERADA RADIACIONES IONIZANTES, AGENTES ALQUILANTES,
ESPECIES REACTIVAS DE OXGENO (ROS: O
2
-.
, HO
.
, H
2
O
2
)
BASE INCORRECTA DESAMINACIN ESPONTNEA (C PASA A U Y A PASA A
HIPOXANTINA), ERRORES EN LA REPLICACIN NO
CORREGIDOS POR EXO 3-5)
DELECIN/INSERCIN AGENTES INTERCALANTES (NARANJA DE ACRIDINA,
PROFLAVINA)
DMEROS DE PIRIMIDINA RADIACIN UV
ROTURA DE LAS CADENAS RADIACIN IONIZANTE, AGENTES QUMICOS
(BLEOMICINA)
oxidacin hidrlisis
metilacin no controlada
El tamao de las flechas indica la frecuencia relativa de cada acontecimiento
Fig 5-46 .- Biologa Molecular de la Clula 4 ed., Alberts y col.
Estas alteraciones conducen a la
despurinacin o desaminacin de la doble cadena de DNA
DAOS DEL DNA
Alteraciones espontneas que requieren reparacin del DNA





Despurinacin y Desaminacin
Hay que tener muy claro que lesiones como estas
no son mutaciones pero que si pueden llegar a
serlas.


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Desaminacin de
bases
adenina
hipoxantina
guanina xantina
citosina uracilo
timina
no hay desaminacin
5-metil citosina
timina
Fig 5-52 .- Biologa Molecular de la Clula 4 ed., Alberts y col.

Alquilacin de bases y Despurinacin

La alquilacin de la posicin N7 de un nucletido de
purina, hace que su enlace glucosdico sea
susceptible a la hidrlisis y lleve a la prdida de la
base: Despurinacin.

Alquilacin de bases
Agentes alquilantes
Puede aparearse con C o T,
produciendo transversiones
La alquilacin de la posicin N7 de un nucletido de purina, hace que su
enlace glucosdico sea susceptible a la hidrlisis y lleve a la prdida de la
base: despurinacin
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Despurinacin y Desaminacin
Fig 5-47 .- Biologa Molecular de la Clula 4 ed., Alberts y col.
Sitio apurnico
Otras desaminaciones
(menos frecuentes)
A Hipoxantina
G Xantina
Sitio apurnico




Oxidacin de bases

El metabolismo celular expone el DNA a los efectos
perjudiciales de las especies reactivas de oxgeno
(ROS: O
2
-, HO., H
2
O
2
), subproductos naturales del
metabolismo oxidativo.
Se conocen ms de 100 modificaciones oxidativas
diferentes en el ADN. Por Ej.: G puede oxidarse a
8-oxoguanina
oxoG puede aparearse con C o con A.

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Oxidacin de bases
El metabolismo celular expone el DNA a los efectos perjudiciales de las
especies reactivas de oxgeno (ROS: O
2
-
.
, HO
.
, H
2
O
2
), subproductos naturales
del metabolismo oxidativo.
Se conocen ms de 100 modificaciones oxidativas diferentes en el DNA.
p. Ej.: G puede oxidarse a 8-oxoguanina
oxoG puede aparearse con C o con A.
Si oxoG se con A se produce
una TRANSVERSIN.
TRANSVERSIN: mutacin
puntual producida por la
sustitucin de una purina por una
pirimidina o al revs.
G C T =A


Los daos causados por diferentes agentes al ADN pueden ser
corregidos por sistemas de reparacin, si esto no fuese as se
acumularan miles de mutaciones en el ADN. Para esta reparacin
existen una serie de mecanismos especficos.
SISTEMAS QUE EVITAN LOS ERRORES ANTES DE QUE
OCURRAN:
Detoxificacin De Los Radicales Superxido: La dismutasa del
superxido cataliza la conversin de radicales superxido en
perxido de hidrgeno. A su vez, la catalasa convierte el perxido
de hidrgeno en agua.
Protena Del Gen mutT: Esta enzima impide la incorporacin de 8-
oxodG (antes mencionado) al DNA, hidrolizando para ello el
trifosfato de la 8-oxodG a la forma monofosfato.


REPARACIN DE LAS LESIONES AL ADN

SISTEMAS DE REPARACIN SIN ERRORES:

Reversin directa de la lesin:
Fotoreactivacin: (Ruptura de los dmeros de
pirimidinas por accin de una fotoliasa (phr)
activada mediante luz visible).
Las transferasas de grupos alquilo son otras
enzimas implicadas en la reversin directa de
lesiones. Eliminan ciertos grupos alquilo aadidos a
las posiciones 0 a 6 de la guanina por agentes como
NG y EMS.






Escisin de la regin daada seguida de
remplazamiento preciso


Vas de reparacin por escisin (escisin + reparacin)

Sistemas enzimticos para reconocer, eliminar y
reparar daos inducidos al ADN se han descrito y
estudiado bien en bacterias.

- Reparacin de nucletidos aislados por lesin UV:
necesita la otra hebra como templado (hasta 30 pb)
Intervienen las endonucleasas uvrA ,B ,C y la
helicasa uvrD.

Vas de reparacin especfica

- Reparacin mediante nucleasa AP (sitios AP,
alquilacin o metilacin)
Estas enzimas introducen hendiduras en la
cadena mediante la rotura de enlaces
fosfodisteres en los sitios AP. Esto promueve un
proceso de reparacin por escisin mediado por
otras tres enzimas: una exonucleasa, la
polimerasa de DNA I y la ligasa de DNA

Reparacin mediante glucosilasas de DNA:
Intervienen exoIII (xth), endo IV (nfo) DNA
glicosilasa (fpg) y/o DNA glicosilasa I (tag)
Existe tambin una glucosilasa que reconoce y
escinde hipoxantina, el producto de la
desaminacin de la adenina. Otras glucosilasas
eliminan bases alquiladas, purinas con anillos
abiertos, bases daadas oxidativamente y, en
algunos organismos, foto dmeros producidos por
la luz UV. Todava se siguen descubriendo nuevas
glucosilasas.


Reparacin de errores de
replicacin



Reparacin de roturas de doble
cadena
Unin de extremos no-
homlogos


KU desenrrolla los
extremos del molde hasta
que regiones muy cortas
(2-6 pb) puedan
aparearse
DNA-PK: Protena
quinasa dependiente de
DNA
Protena KU: ATPasa
dependiente de DNA con
actividad helicasa