I.

INTRODUCCION

Es una tcnica de separacin
extraordinariamente verstil que
presenta distintas variantes
En toda separacin cromatografiar
hay dos fases una mvil y otra
estacionaria.
La cromatografa de capa fina, es
un tipo de cromatografa donde la
fase estacionaria es una capa
delgada de un material depositado
sobre un soporte, a este conjunto
se le llama placa
Si un componente est la mayor
parte del tiempo en la fase mvil el
producto se mueve rpidamente,
mientras que si se encuentra la
mayor parte en la fase estacionaria,
el producto queda retenido y su
salida es mucho ms lenta.
Cromatografa en
capa fina
II. OBJETIVOS
Conocer y aplicar la tcnica
de cromatografa en capa
fina, sus caractersticas y los
factores que en ella
intervienen.
Deducir, a travs del R
f
la
relacin que existe entre la
polaridad de las sustancias
que se analizan y la de los
eluyentes utilizados.
Aplicar la tcnica de c.c.f.
como criterio de pureza e
identificacin de las
sustancias.
III.MARCO TEORICO
La cromatografa de
capa fina es un
procedimiento que se
utiliza para separar
molculas
relativamente
pequeas.
A. La primera dimensin
se desarrolla hacia
arriba, y la 2da hacia la
derecha
Al igual que otras cromatografas,
consiste de una fase estacionaria y una
fase mvil y el principio es el mismo: la
sustancia de inters se adherir a la
fase estacionaria o se mover con la
fase mvil, viajando una distancia que
es inversamente proporcional a la
afinidad por la fase estacionaria.
Fase estacionaria
La fase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de
celulosa o de un gel de silicato unido a una superficie slida
(una placa de vidrio, aluminio, plstico o papel). Esta superficie
slida puede ser rgida o flexible. El tipo de fase estacionaria
que se utilice en un experimento depender del tipo de
molculas que se quieran separar.
Fase Mvil
Es la fase que se mueve en una direccin definida.
Puede ser un lquido, un gas o un fluido supercrtico.
La fase mvil consiste en la muestra que est
siendo separada/analizada y el disolvente, que se
mueven por el interior de la columna.


Proceso de Adsorcin:
La muestra aplicada en la capa es
adsorbida en la superficie del material
por la accin de fuerzas electrostticas
(fuerzas de Van der Waals, puentes de
Hidrgeno, efectos inductivos, etc.).
Los adsorbentes ms
utilizados en la Cromatografa
de Capa Fina son:
Slica gel (se utiliza en el 80%
de las separaciones)
xido de Aluminio Almina
(cida, neutra bsica)
Tierra Silcea Kieselguhr
Celulosa (Nativa o micro-
cristalina)
Poliamidas

3.1 Obtencin del cromatograma
Se debe preparar la cubeta en la que
se va a realizar la cromatografa. Esta
cubeta es un simple recipiente de
vidrio en donde se aade el eluyente
que se va a utilizar, siempre en un
nivel inferior a la lnea base que se ha
dibujado en la placa.
En la cubeta se introduce una tira de
papel de filtro para que el vapor del
eluyente est por toda la cubeta.
En este momento se introduce con
cuidado la placa en la cubeta y se
tapa, esperando a que el nivel del
eluyente ascienda por la placa.
Cuando el nivel se encuentra casi en
el borde superior, se extrae la placa y
se dibuja una nueva lnea en este
nivel.
El disolvente al ser voltil se evapora
en poco tiempo dejando la placa seca.
Ahora se debe buscar un mtodo para
visualizar el resultado del
cromatograma y ver la separacin de
los componentes pinchados en la
placa.
En el caso de que la sustancia sea
coloreada no habra ningn problema
ya que se veran los componentes.

3.2 Interpretacin: factor de
retencin R
f


El factor R
f
es el cociente de la distancia recorrida
por el compuesto (d
c
) entre la distancia recorrida por
el eluyente (d
e
). Obviamente el R
f
toma valores
entre 0.0 y 1.0. Siempre ha de indicarse el eluyente
y el soporte en el que se ha determinado.

de
dc
R
f

3.3 FACTORES QUE INFLUYEN EN LA
SEPARACIN POR CROMATOGRAFA
Polaridad
El motivo principal es su diferente polaridad.
Molculas ms polares quedan ms retenidas en la
fase estacionaria, es decir "corren menos", mientras
que las molculas menos polares se ven menos
retenidas y avanzan a mayor velocidad arrastradas
por eluyente.
Eleccin del eluyente
La polaridad de la mezcla de disolventes - eluyente -
utilizado es clave para obtener una buena
separacin.
3.4 Aparatos y materiales.
Instrumentos que mas se utilizan en la cromatografa de
capa fina:
Cubeta cromatogrfica
- Placas de cromatografa
- Pipetas de microlitro
- Recipiente de vidrio con pulverizador
- Probeta o matraz Erlenmeyer con
- Secador
- Plantilla para TLC o regla
- En caso necesario: lmpara UV para comprobar la
fluorescencia o la disminucin de la misma.

3.5 Cromatografa bidimensional en
capa fina
Para mejorar una separacin incompleta, se
combinan dos pasos de cromatografa mono
dimensional de la manera siguiente:


1 paso
Cargar la
muestra en una
esquina de la
placa y
desarrollarla en
sentido
ascendente.
2 paso
Girar 90 la placa
desarrollada y
seca, de manera
que la mezcla ya
separada
parcialmente se
encuentre en el
borde inferior.
IV. CONCLUSIONES
En este informe se logr conocer y como aplicar la
cromatografa por capa fina, sus caractersticas y los
factores que influyen en la separacin por cromatografa

Se aprendi a como calcular los valores del factor de
retencin de las sustancias para poder deducir la
relacin que existe entre la polaridad de las sustancias
que se analizan con la de los eluyentes que se utilizan
con ellas y as mismo poder aplicar un criterio para
identificar la pureza de sustancias de acuerdo con la
pigmentacin (es) que estas presenten al realizar la
cromatografa.