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LES METHODES

CHROMATOGRAPHIQUES
 
Présentation des phénomènes

Adsorption partage

1905
1905

100 microns

Distance de diffusion d

Si-OH

Si d Le temps de rétention
HPLC = microparticule
1905 1970

100 microns 5 microns

Distance de diffusion
Volume interparticules

Dans une colonne, il faut forcer


le solvant pour qu’il passe à
travers un lit de microparticules
Autres apports technologiques

Pompe Détecteur
P souvent Faible volume de cellule
Supérieure
A 100 bars

Injecteur
Volume injecté : quelques microlitres
Similitudes
Porosité
Surface
spécifique
200-300 m2/g
Capacité élevée

Différences
élevée Diffusion faible
faible vitesse élevée
faible Efficacité élevée
lent Rééquilibre Rapide
H----O-R
δ ’+ δ ’-

Liaison plus forte


L’alcool est plus
δ - δ +
retenu par la
Si-O----H silice

δ ’’+ δ ’’-

H----NH-R
On ne peut pas utiliser l’alcool ou
l’eau avec la silice
La chromatographie utilise un
solvant apolaire ( totalement
anhydre) et une phase stationnaire
polaire

Il serait plus judicieux de faire


l’inverse et utiliser :

Une phase Une phase


stationnaire mobile polaire
Apolaire contenant
(C18 H37) de l’eau

Chromatographie à polarité
de phases inversée
Matériaux de base en
CLHP

Silice Silice greffée


-Si-OH -SiOSiR

R = C18 H37
R = C6H5
R = C3H7NH2
R = C3H7CN
Adsorption
Partage, échange d'ions
La chromatographie en phase liquide

Courbe HEPT

0.1 2 mL/min
COMPARAISON CPG HPLC

CPG HPLC
Diffusion
D’Eddy A A

Diffusion B B
moléculaire élevée Négligeable

Résistance
au transfert C C
De masse
COMPARAISON CPG HPLC
(suite)

A travers la masse molaire du


soluté
CPG
HPLC
Size exclusion chromatography
(GPC)

500 10 4 2.106

Masse molaire
COMPARAISON CPG HPLC
(suite)
CPG HPLC
Phénomènes volatilité solubilité
mis en jeu solubilité Solubilité

Phase mobile - Gaz - Solvant


- Influence- Essentiel dans
peu lala séparation
séparation -
- compressible Incompressible
Diffusion Élevée Faible
dans la phase
mobile
Effet de la essentiel importance
température secondaire
COMPARAISON CPG HPLC
(suite)

CPG HPLC
Résistance faible élevée
au transfert
de masse

Soluté volatile soluble dans


la phase
mobile