UNJBG

FACULTAD DE CIENCIAS
E.A.P. BIOLOGA MICROBIOLOGIA

MICROBIOLOGA
DE
MICROBIOLOGIA
INDUSTRIAL
ALIMENTOS

Aislamiento, Seleccin y
tcnicas de seleccin para
microbios y metabolitos
Docente: Msc. Daladier M Castillo Cotrina
Alumnas: Jordan Ismael Huanacuni Pilco
2009-34042
Gandhy Reiniero Portugal Zegarra
2009-34017

Los mos presentan una gran variedad metablica

por lo que en distintos aislados microbianos
podemos encontrarnos una amplia variedad de
compuestos.
Una de las tareas de la Microbiologa Industrial es
desarrollar procedimientos que permitan el
aislamiento y seleccin de microorganismos de
inters industrial

Una tcnica de aislamiento y seleccin efectiva

debe permitir en pocos pasos, la eliminacin de
los mos sin valor, al mismo tiempo que la
deteccin fcil de los deseados aun cuando estos
se encuentren en una muy baja proporcin, en la

poblacin inicial.

Figura 1: Produccin de acido

lctico por los Lactobacilos.

Figura 2: Produccin de vinagre

gracias a la bacteria Acetobacter.

Figura 3: Protozoarios con alta

capacidad
de
metabolizar
compuestos orgnicos.

Figura 4: produccin de insulina

transgnica con Escherichia coli.

 Un microorganismo de uso industrial debe

producir la sustancia de inters,
Debe estar disponible en cultivo puro,
Debe ser genticamente estable y
Debe crecer en cultivos a gran escala.

 Otra caracterstica importante es que el

microorganismo industrial crezca rpidamente y
produzca el producto deseado en un corto
perodo de tiempo.

 El microorganismo debe tambin crecer en un

relativamente barato medio de cultivo disponible
en grandes cantidades.
Adems, un microorganismo industrial no debe
ser patgeno para el hombre o para los
animales o plantas.

FUENTES DE OBTENCIN DE
MO DE INTERS INDUSTRIAL

FUENTES DE OBTENCIN DE MO
DE INTERS INDUSTRIAL
1.- Fuentes naturales de aislamiento.

2.- Colecciones internacionales de cultivos tipo o

stock.

3.- Programas de mejoramiento de cepas.

A) FUENTES NATURALES DE
AISLAMIENTO
Agua negras.

Posos
petroleros
y
refineras.

Suelos. (100 millones de mo

por
gramo
de
suelo)
bosques, jardn etc.).
Residuos
vegetales
en
descomposicin.

Races y tubrculos de
vegetales.
Aguas dulces (lagos, Rios).
Tejidos animales.

Residuos
de
industrias
alimentarias.
Residuos lignocelulosicos.
Residuos de ganado.
Residuos
de
productos
pesqueros.
Frutos en descomposicin.
Residuos de los procesos
de fermentacin.
Residuos
de
plantas
elaboradoras de jugos.

FUENTES DE OBTENCIN DE MO
DE INTERS INDUSTRIAL
Para el aislamiento de nuevos productos
metablicos, los investigadores intentan aislar
cepas a partir de ambientes extremos o poco
corrientes con la esperanza de que tales cepas
sean capaces de producir nuevos metabolitos.

Para la tarea de aislamiento de

microorganismos hay que plantearla
considerando
A) las caractersticas del producto
y del proceso que se va a realizar.
(indicar dnde tomar las muestras )
B) las caractersticas ecolgicas de
la
muestra
que
se
toma.
(cmo disear los medios de
aislamiento para los microorganismos
presentes en dichas muestras.)

 Para esto, se realizan una serie de pasos donde

se
aplican
tcnicas
microbiolgicas
convencionales
y
comprende:
1. Muestreo
2. Tratamiento de la muestra
3. Enriquecimiento
4. Aislamiento
5. Manutencin y preservacin
microorganismos

de

los

El estudio ecolgico de las caractersticas del

microorganismo de inters permitir hacer una
bsqueda sistemtica en los diferentes nichos
de un ecosistema, lo que proporcionar un gran
nmero de microorganismos de salida para el
proceso de deteccin.

 Lista de grupos de microorganismos que van a ser

aislados (los medios y tcnicas de cultivo son diferentes
para bacterias y hongos, por ejemplo).
Descripcin del ecosistema o hbitat en el que se van a
tomar las muestras
Agrupacin de las muestras segn el material de origen
(suelo y horizontes del suelo, agua, material vegetal,
etc.).
lista de los parmetros ambientales a considerar (pH,
salinidad, potencial redox, temperatura, etc.).

 Lista de los substratos naturales disponibles por los

microorganismos autctonos en su ambiente natural.
Diseo de las tcnicas de aislamiento usando la
informacin de los puntos anteriores.
Evaluacin de las tcnicas de aislamiento usando
patrones internos como control.
Utilizacin de procedimientos de enriquecimiento para
los microorganismos que puedan ser de inters.

MTODOS Y TCNICAS DE
AISLAMIENTO Y SELECCIN

SELECCIN DE
MICROORGANISMOS

SELECCIN DE MICROORGANISMOS
Debido a que el xito o fracaso de un
proceso fermentativo comienza con el
microorganismo utilizado, en la eleccin del
mismo se deberan tener en cuenta ciertos
criterios generales, o que se indican a
continuacin:

SELECCIN DE MICROORGANISMOS
1. La cepa a utilizar debe ser genticamente
estable.
2. Su velocidad de crecimiento debera ser
alta.
3. La cepa debe estar libre de contaminantes,
incluidos fagos.
4. Sus requerimientos nutricionales deberan
ser satisfechos a partir de medios de cultivo
de costo reducido.

SELECCIN DE MICROORGANISMOS
5. Debe ser de fcil conservacin por largos
perodos de tiempo, sin prdida de sus
caractersticas particulares.
6. Debera llevar a cabo el proceso
fermentativo completo en un tiempo corto.
7. Si el objetivo del proceso es un producto,
ste debera ser de alto rendimiento y de
fcil extraccin del medio de cultivo.

AISLAMIENTO DIRECTO
En este caso es deseable que el medio que se
utiliza para el aislamiento permita la mxima
expresin del material gentico del organismo.

AISLAMIENTO DIRECTO
Si se busca por ejemplo un organismo con
accin antimicrobiana, se puede crecer al
potencial productor, en una caja de Petri en
presencia del o los organismos contra los
cuales se requiere la accin antimicrobiana,
observndose la produccin del inhibidor por
las zonas de inhibicin de crecimiento.

ENRIQUECIMIENTO DEL CULTIVO

Esta tcnica consiste en incrementar en una
poblacin mixta el nmero de organismos de
inters en relacin al resto.

ENRIQUECIMIENTO DEL CULTIVO

De esta forma se busca favorecer el
crecimiento
de
un
tipo
dado
de
microorganismos mediante condiciones de
cultivo adecuadas al mismo, o de
condiciones inapropiadas para el desarrollo
de los otros.

SELECCIN DE MICROORGANISMOS
Screening
(Bsqueda):
Deteccin
y
aislamiento de microorganismos de inters
industrial de entre una poblacin compleja de
organismos
utilizando
procedimientos
selectivos.

SELECCIN DE MICROORGANISMOS
Seleccin Primaria: Deteccin y aislamiento
de microorganismos potencialmente tiles, a
partir de una poblacin compleja y variada.
Es importante:
Rapidez
Sensibilidad
Bajo costo
Prediccin
Manejo fcil para muchas muestras.
Efectivo para un amplio rango de compuestos pero especfico para el
blanco.

SELECCIN DE MICROORGANISMOS
Seleccin Secundaria: Estudio de los
microorganismos aislados en la seleccin
primaria, para separar los que tienen inters
potencial de los que tienen inters real y mejorar
estas cepas seleccionadas.
Es importante:
Identificacin
Comparacin de crecimiento de produccin en medios lquidos y
slidos.
Identificaciones empleando tcnicas del producto deseado:
cromatografa.
Evaluaciones del producto: para toxicidad.

SELECCIN DE METABOLITOS
Producto metablico que se obtiene en el
metabolismo celular.

M. primario

M. Secundario.

Metabolitos primarios
B= biomasa
S= substrato
t= tiempo

Metabolitos Secundarios

B= biomasa
S= substrato
t= tiempo

EJEMPLOS DE
PROCEDIMIENTOS DE
SELECCIN

Seleccin de microorganismos
productores de antibiticos
Los
microorganismos
productores
de
antibiticos se encuadran dentro de las
bacterias
(Bacillus,
Pseudomonas
y
fundamentalmente actinomicetos) y hongos
(Penicillium).
Los parmetros que se utilizaran para
seleccionar
estos
microorganismos
productores de antibiticos seran:

Seleccin de microorganismos
productores de antibiticos
Temperatura:
Hongos
20-22C;
Actinomicetos 28C.
pH: Hongos pH cido; Bacterias pH neutro
Oxgeno: Todos los productores son aerobios
Carbono: Actinomicetos glicerol, quitina,
almidn
Nitrgeno: Actinomicetos caseina, arginina,
asparragina; En general amonio o nitrato.

Seleccin de microorganismos
productores de antibiticos

Hongos

Actinomicetos

Una vez crecidas las colonias que nos interesan, se utiliza

un medio que contenga el microorganismo, luego se aslan,
para ensayos posteriores, aquellas colonias que produzcan
halos de inhibicin.

Seleccin de microorganismos
productores de vitaminas
Necesitamos, al igual que para la deteccin
de antibiticos, un microorganismo test que
posea un requerimiento absoluto para el
factor de crecimiento que nos interesa
(auxtrofos).
Estos microorganismos pueden ser bien
mutantes naturales o mutantes provocados
por la accin de agentes mutgenos.

Seleccin de microorganismos
productores de vitaminas

A escala industrial y de forma general se utilizan como

microorganismos productores de aminocidos a las bacterias.

Seleccin de microorganismos
productores de vitaminas

Como microorganismos productores de vitaminas a los eucariotes

(levaduras y hongos filamentosos).

Seleccin de microorganismos
productores de enzimas
Debido a la dificultad que entraa el manejo
de microorganismos, siempre que sea
posible, se recurre a utilizar las enzimas
producidas por stos en lugar de las clulas
enteras.
A la hora de realizar el Screening se debe
utilizar en el medio de enriquecimiento como
fuente de carbono el sustrato del enzima que
buscamos:

Seleccin de microorganismos
productores de enzimas
Para microorganismos productores
amilasas puede usarse almidn.

de

Seleccin de microorganismos
productores de enzimas
Para microorganismos productores
celulasas puede usarse celulosa.

de

TCNICAS DE SELECCIN
PARA MICROBIOS Y SUS
METABOLITOS

TECNICAS DE SELECCIN PARA

MICROBIOS Y SUS METABOLITOS
Las
tcnicas
de
seleccin
son
procedimientos,
llamados
tambin
SISTEMAS DE ENSAYO, que se utilizan
para la seleccin de un microorganismo o de
un determinado metabolito microbiano de
inters.

TECNICAS DE SELECCIN PARA

MICROBIOS Y SUS METABOLITOS
Se conocen diferentes sistemas de ensayo,
algunos de ellos se describen a continuacin:

TECNICAS DE SELECCIN PARA

MICROBIOS Y SUS METABOLITOS

SCREEN
ANTIBACTERIAL

TECNICAS DE SELECCIN PARA

MICROBIOS Y SUS METABOLITOS

SCREEN DE
INHIBIDORES
DE BETA
LACTAMASA

TECNICAS DE SELECCIN PARA

MICROBIOS Y SUS METABOLITOS

SCREEN DE
INHIBIDORES
DE BETA
LACTAMASA

TECNICAS DE SELECCIN PARA

MICROBIOS Y SUS METABOLITOS

SCREEN DE CEPAS
MICROBIANAS
PRODUCTORAS DE
BACTERIOLISINAS

TECNICAS DE SELECCIN PARA

MICROBIOS Y SUS METABOLITOS

SCREEN DE CEPAS
MICROBIANAS
PRODUCTORAS DE
BACTERIOLISINAS

TECNICAS DE SELECCIN PARA

MICROBIOS Y SUS METABOLITOS

SCREEN DE CEPAS
MICROBIANAS
PRODUCTORAS DE
BACTERIOLISINAS

GRACIAS